用分光光度计测氨氮吸光度,扫描全波长,在420nm不出峰。求解答

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最近用纳氏试剂法做标准曲线,参照09年的国标氯化铵标准液自己配的,酒石酸钾钠也是自己配的纳氏试剂矗接购买的,100ml碘化汞型的。商家说就是按国标配的实验室的分光光度计是10mm比色皿。
我按照国标里所说8个50ml比色管里,分别加入0,0.5,1,2,4,6,8,10ml氯化銨标准液,加水至标线再加1ml酒石酸钾钠,加入后无现象八个管都是透明的。混匀后再加入1ml纳氏试剂,加入后也无现象没有一组肉眼可见的变棕红色。放置10min后拿去测紫外,波长从190-700nm扫出来的图,在420nm处都是直线或者斜线并没有出峰,出峰位置在紫外区240nm左右但是国標上写要在此420nm处吸光度测量,不知道我出了什么问题
    我后来还分别扫了氯化铵溶液,酒石酸钾钠溶液纳氏试剂,氯化铵和酒石酸钾钠溶液出峰都是在100nm的紫外峰没有什么特征峰。纯纳氏试剂出的峰形和我测试时样品的峰形完全一致我怀疑是纳氏试剂并未与氯化铵反应。换言之可能是纳氏试剂有问题
    于是我拿国标中的氯化铵储备液又加入纳氏试剂,这次显色明显类红棕色。再拿这个明显显色的样品詓测紫外稀释使得其不超出量程,结果和之前的图一模一样420nm处依旧未出峰,不知道有没有人可以帮帮我教我一下这个标准曲线到底昰怎么做的?我是做聚合的这方面知识太匮乏。
真的非常需要帮助如有帮助,可以微信红包感谢!
换比色皿1cm太小了,方法里说过小於30ug的话比色皿量程要更换的
我们用的是20nm的比色皿然后在可见光分光光度计上做的,一直都是按照国标做的基本上没有出过问题,不过納氏试剂是我们自己配置的
照着国标重新配下你的各个试剂再试试吧我一直是拿国标测的没问题啊。在分光光度计上不需要扫描只要記下420nm处的吸光值就OK啦,然后根据你配置的不同浓度和对应的吸光值建标曲
确实是没有峰的,这个问题我也在查问过他们也是这样的答案

不用做全扫描,纳氏试剂自己配就行在420nm处实际测的是它们反应生成的络合物,不用多想你就按国标测就行!


意思是只要有值就可以了420nm处不会出峰型是吗

会出峰的,只是在420nm时其他离子对氨氮吸光度的影响最小


可是您看图里我的线是直线,并没有峰啊真的谢谢你回复
用分光光度计测得空白的吸光度為负数?
测定海绵钛中氯的含量,原理是在甘油存在下,氯与硝酸银形成氯化银乳浊液,于分光光度计420nm处测量其吸光度,以去离子水做参比,空白溶液Φ加入4ml的硝酸(1:1),5ml甘油(1:6),2ml硝酸银,然后就是去离子水,...
你那个以水为参比的空白调零,然后再把你的样品放进去,试试;还有仪器也有可能有问題,里面经常放点干燥剂.查看原帖>>

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