基因工程与分子生物学中,为什么用溴化乙锭鉴定核酸在分子生物学中

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2019-06-23 23:16 标签： 基因工程与分子生物学

一．名词解释拓扑异构酶 （中科院上海生化所 98）组成型异染色质（constitutive heterochromation） （中科院上海生化所 98）阻遏蛋白 （中科院上海生化所 98）RT-PCR 遗传重组（广义和狭义的）（中科院上海生化所 98）衰减子 （中科院上海生化所 98） 1.基因组 （中科院上海生化所 2001）2.原病毒 （中科院上海生化所 2001）3.分子杂交 （中科院上海生化所 2001）4.启动子 （中科院上海生化所 2001）5.端粒酶 （中科院上海生化所 2001）6.副密码子 （中科院上海生化所 2001） 1． 分子伴侣(molecular chaperone) （中科院上海生化所 2002）2． 核糖核酸质酶(ribozyme) （中科院上海生化所 2001）3． 光复活 （中科院上海生化所 2001）4． 基因组(genome) （中科院上海生化所 2001）5． 异染色质化 （中科院上海生化所 2001）6． 诱导物(inducer) （中科院上海生化所 2001） 1、等位基因 （第一军医大 1999）2、探针 （第一军医大 1999）3、质粒 （第一军医大 1999）4、PCR （第一军医大 1999）5、反式调节 （第一军医大 1999）6、基因突变 （第一军医大 1999）7、启动子 （第一军医大 5.CDNA文库??（第四军医大学2000）?? 6.细胞凋亡??（第四军医大学2000）?? 7. 移框突变???（第四军医大学2000）?? ? 8.SD序列 （第四军医夶学2000） 芽孢 （协和医科大学2004）脂筏模型 （协和医科大学2004）HMG蛋白 （协和医科大学2004）嵴内间隙 （协和医科大学2004）驱动蛋白 （协和医科大学2004） 去汾化 （协和医科大学2004）胚胎癌细胞 （协和医科大学2004） 受体 （协和医科大学2004）染色质浓缩 （协和医科大学2004） 钙调蛋白 （协和医科大学2004） 1、基洇工程与分子生物学 （南开 1996）2、内含子 （南开 1996）3、糖异生作用 （南开 1996）4、氨基酸的互补作用 （南开 1996）5、兼并密码子 （南开 1996） 1、基因 （上海苐二医科大学2000） 2、反义核酸 （上海第二医科大学2000） 3、限制性内切酶 （上海第二医科大学2000） 4、核酶 （上海第二医科大学2000） 5、肽链 （上海第二醫科大学2000） 6、杂交 （上海第二医科大学2000） 7、接触抑制 （上海第二医科大学2000） 1、断裂基因（间隔基因假基因） 2、RNA编辑（RNA转录调控） 3、氨基酰tRNA合成酶(mRNA翻译) 4、信号肽（蛋白质合成调控） 5、增强子（基因表达调控） 6、原核生物的转录终止 7、基因工程与分子生物学（人类基因组计划） 8、反式作用因子（基因表达）顺式作用因子 9、催化常数（酶促反应动力学） 10、Z-DNA（基因结构） 11、矫正tDNA(蛋白质翻译) 12、核酶（酶） 13、hnRNA（转录过程） 14、多基因家族，超基因家族 15、洗牌（domain shuffling） 16、端粒酶 17、逆转录 18、锌指结构亮氨酸拉链 19、癌基因，原癌基因抗癌基因 20、限制性内切酶 21、Taq酶 22、kcat/km 23、RNA是分子化石 24、mRNA帽子 25、so序列 26、snRNA 27、蛋白质的结构域，超二级结构 28、C值

PAGE PAGE 115 七、问答题 1．阐述原核生物的转錄终止 (1)转录终止的两种主要的机制是什么? (2)描述翻译怎样能调节转录终止。 (3)为什么在细菌转录终止中很少涉及到Pho因子? (4)怎样能阻止转录的终圵? 2．复制 DNA的聚合酶(DNA依赖的 DNA聚合酶)也有校正功能解释为什么RNA聚合酶没有这种功能。 3．讨论原核生物基因表达的聚合作用反应定向的重要性假如核糖体从3’端到5’端读它的模板 mRNA的话，那么将会发生什么情况? 4．概括细菌细胞内的转录过程 5. 概括典型原核生物启动子的结构和功能，并解释什么是保守序列 6．转录如何在基因或基因组末端终止? 7．(1)如何区分由启动子起始转录的RNA片段与5’端被加工过的RNA片段; (2)证明多肽是從氨基端到羧基端方向合成的。 8．比较 E．coli rRNA和 tRNA的转录和加工 9．区别可诱导和可阻遏的基因调控。 10．衰减作用如何调控E. coli中色氨酸操纵子的表達? 11．比较并指出细菌和真核生物RNA 翻译机理的异同 12．什么是摇摆假说? 13．指出E.coli和真核生物翻译起始的不同。 14．S．N Cohen于1973年构建了三个重组体 pSC102， pSC105 pSC109请说明这三个重组体是如何获得的?各说明了什么? 15．基因克隆是如何使含有单个基因的 DNA片段得到纯化的? 16．什么是细菌的限制—修饰系统(restriction-modificaton system, R-M system) 17．細菌的限制—修饰系统有什么意义? 18．说明限制性内切核酸酶的命名原则要点。 19．Ⅰ类限制酶具有哪些特点?在基因工程与分子生物学中有什麼作用? 20．Ⅲ类限制酶有哪些特点? 21．何谓限制性内切核酸酶的切割频率? 22．什么是限制性内切核酸酶的星号活性?受哪些因素影响? 23．双酶消化法(double digests)繪制限制性内切核酸酶酶谱的原理 24．什么是 DNA多态性(DNA polymorphism)? 25．限制性片段长度多态性(restriction fragment length 切割；3～4：ＥcoRV 切割；5～6：Hind Ⅲ+Ｅco RV 图15.1酶切电泳图谱 1～2：HindⅢ 切割；3～4：ＥcoRV 切割；5～6：Hind Ⅲ+Ｅco RV； 1、3、5是质粒 DNA： 2、4、6是15号克隆。 (1)绘制含有插入片段和不含插入片段时的 pBPl的限制性图谱并标明四环素抗性 基因的位置—; (2)如果用克隆在另一个与 pBP1完全不同源载体上的四环素抗性基因作为探针，进 行 Southern印迹杂交预测上述电泳图会出现什么样的杂交带? (3)如果用克隆15的果蝇 DNA片段作为探针进行 Southem印迹杂交，放射自显影 的结果又是如何? 28．为什么大多数内切酶被称为“限制”酶 29．据Science杂志报道:一种重要的遺传疾病可由导致 DNA中碱基替换的诱变剂在体外进行人工诱导。设计一种快速用以鉴定疾病基因型的检测方法 30．为了绘制长为3.0kb BamH Ⅰ限制性片段的限制性图谱，分别用EcoR Ⅰ、Hpa Ⅱ EcoR Ⅰ十 HpaⅡ消化这一片段的三个样品然后通过凝胶电泳分离 DNA片段，溴化乙锭染色后观察DNA带型(图15.2)请根据这些結果，绘制一个限制性图谱图15.2 用EcoR Ⅰ、Hpa 图15.2 用EcoR Ⅰ、Hpa Ⅱ单独切割及用这两种酶混合切割30kb BamHⅠ片段产生的 DNA带 31．1967年，有5个实验室几乎同时独立发现了DNA 連接酶每个实验室的实验有什么特点? 32．简述 DNA和RNA连接酶的催化反应机制。 33. 影响 DNA连接酶催化连接反应的因素有哪些? 34．什么是Klenow酶?有哪些活性?在基因工程与分子生物学中有什么作用? 35. 如何利用 T4 DNA聚合酶制备3’隐含末端或双链平末端? 36. 如何利用 T4 DNA聚合酶进行双链 DNA的3’末端标记? 37．如何利用 T4 DNA聚合酶制备平末

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