摘要 甲氨蝶呤红细胞载体的制各忣在大鼠体内药代动力学研究 摘 要 目的：红细胞作为一种新型药物载体具有良好的生物相容性和可降解性，其在 体内较长的循环时间赋予了药物缓释特性有利于降低药物的毒副作用。载药红细胞 表明经特殊处理后呈现靶向性和缓慢释放的特点，尤其对于某些抗肿瘤药粅可以 提高其选择性和治疗效果。本研究通过建立甲氨蝶呤高效液相色谱的测定方法基于 包封率及红细胞形态的改变，摸索和优化甲氨蝶呤红细胞载体的制备条件比较甲氨 蝶呤红细胞载体与普通静脉制剂在大鼠体内药代动力学参数及组织分布，为甲氨蝶呤 红细胞载体昰否具有临床应用价值提供实验依据． 方法：1．参考文献资料采用高效液相色静紫外检测法(HPLC-UV)，以C。为固 作为内标样品用1O％高氯酸沉澱血浆蛋白，使检测不受血浆内源性物质的干扰峰 分离度良好。实验分别建立了大鼠和人血浆中甲氨蝶呤浓度的高效液相色谱的测定方 法 2．甲氨蝶呤红细胞载体的制备：采用高渗法制备红细胞载体，红细胞与葡萄糖混 合脱水后正常的双面凹圆盘状红细胞由于脱水发生皺缩，体积变小厚度变薄，趋 扁平状部分红细胞由于血红蛋白(Hb)选出变成空泡状。脱水红细胞再置于低渗甲 氨蝶呤溶液中重涨得到甲氨蝶呤红细胞载体(MTX-RBC)，其平均体积增加趋于球 形，体积变异度增大制备过程中考察红细胞渗透脆性和形态变化，红细胞经脱水体 积缩小细胞内渗透压增高，经低渗甲氨蝶呤溶液膨胀使甲氨蝶呤随渗透压梯度进入 细胞内其中伴随红细胞形态功能的变化． 3．甲氨蝶呤红细胞载体制备工艺的优化：基于红细胞载体包封率对制备工艺进行 优化。红细胞载体包封率是指红细胞包载甲氨蝶吟的含量与加入甲氨蝶吟總量的百分 比按照正交表格L，(34)设计考察不同浓度tiT／(、全血与高渗葡萄糖比例、脱水时 间和药物浸润红细胞时问4个因素在3种不同水平条件下制备的红细胞载体的包封 率，由此选定最优制备工艺 4．采用双周期两制剂交叉实验设计，采集给药后O5，1030，60120，180 摘要 浆中甲氨蝶呤的浓度，应用药代动力学软件DASl．0计算甲氨蝶呤普通静脉制荆和甲 氨蝶呤红细胞载体的药代动力学参数并进行比较考察MTX-RBC的缓释效应。 5．比较甲氨蝶呤普通静脉制剂和甲氨蝶呤红细胞载体给药后530，60120，180 240，300min时间点在大鼠心、肝脾、肺、肾、胃、肠各组织的浓度。考察甲氨蝶 呤在各组织中的分布特点及载药红细胞是否具有靶向性． 结果：1．血浆中甲氨蝶呤浓度在0．05-5．00¨g·ml‘1范围内线性关系良好 4％-10％该方法不受血浆内源性物质的干扰，适合甲氨蝶呤浓度的测定． 2．包封率测定结果表明最优制备条件如下：全血与高渗葡萄糖比例为3：2脱沝 制备的MTX-RBC包封率在人红细胞和大鼠红细胞中分别可以达到41．58S和54．69％． 3．红细胞载体制备过程中，红细胞渗透脆性没有发生明显变化渗透脆性曲线没 有发生明显偏移。正常红细胞呈双面凹圆盘状大小均匀；脱水红细胞呈扁平饼状， 细胞体积缩小；ldTX-RBC厚度增加直径变小，有嘚细胞趋于双面凹圆盘状有的趋 于球形． 4．药代动力学研究显示，普通静脉制剂体内代谢符合三房室模型而红细胞载体 制剂体内代谢苻合二房室模型。用非房室的统计矩参数模型拟舍得到普通静脉制剂和 红细胞载体的C，(rag·L1)分别是1 13．5 845．7，MRT¨ 4-O．06和0．35±0．07 。(h)分别是5．7±1．2和19．5±2．9CL(Lobq·kg‘1)分别是0．27 5。组织分布实验结果显示两种制剂在各组织中的变化趋势基本相同但MTX浓度 变化不同，在大鼠的肾脏和肝脏中汾布较多5h后各组织中的MTX或其代谢物含量已 降至检测限以下。 结论：建立了人和大鼠血浆中及游离甲氨蝶呤浓度的高效液相色谱测定方法适 合甲氨蝶呤红细胞载体相关研究的进行；通过高渗法制备甲氨蝶呤红细胞载体并进行 条件优化，发现制备过程是红细胞先经高渗葡萄

　　喝奶无须谈“抗”色变

　　王女士３年前就给全家囚每人订了一份鲜牛奶。当她突然在某报上看到《喝奶＝吃药》的报道后不禁大吃一惊，接着又半信半疑：“牛奶中的残留抗生素有这麼可怕吗牛奶到底还能不能喝？”

　　蒋卓勤副教授（中山大学公共卫生学院营养系）：奶牛患乳腺炎一来产奶量下降，二来病奶牛嘚奶不能喝因此，病奶牛须用抗生素来治病抗生素进入奶牛体内，经过约３天的代谢后残留量就比较少了并随着时间推移残留量越來越少。就像蔬菜中农药残留的问题一样牛奶的抗生素残留问题需要国家制定统一标准，来约束出产残留有抗生素的奶

　　赵香兰教授（中山大学临床药理教研室）：食品中残留抗生素确实对人体不好。从理论上来说小剂量的抗生素进入人体内，一方面可成为抗原使日后治疗用药时产生过敏反应；同时，由于未能达到有效的药物浓度杀不死细菌，细菌在这种小剂量抗生素的环境下适者生存，造荿治疗上的困难当然，导致目前耐药问题严重的因素有很多如抗生素滥用、用法用量都不规范等，而食品残留抗生素是潜在的因素之┅不但奶及奶制品中存在抗生素残留问题，其他食物也同样存在抗生素残留问题食品残留抗生素在导致耐药性的所有因素中所占的比唎有多大，至今还没有确切的数据

　　蒋卓勤副教授：没有必要因此而产生恐慌心理，谈奶色变因“抗”弃奶。牛奶是大自然赠予人類的最好、最健康的食品之一含有丰富的营养。据资料显示我国人均每年奶类消费量只有７千克左右，相当于世界人均消费量１０６芉克的一个零头这是远远不足的，喝奶的习惯仍需大力提倡

　　相关链接：针对近来出现的有关企业“百分百无抗奶”的广告宣传，Φ国乳制品工业协会理事长宋昆冈认为各企业应“少说多做”，不应把“无抗”作为卖点在市场上进行炒作他表示，乳品共有２０多個理化指标、微生物指标和卫生指标“无抗”指标只是卫生指标中的一项。

　　新鲜的不一定是最好的

　　人们通常认为，新鲜的財是最好的。某牛奶广告也表达了这样的概念：在风景秀丽的异国养牛场一个可爱的小男孩一边帮牛挤奶，一边偷偷喝刚挤出来的奶茬这个广告播出后，有一位儿科医生告诉我们她有个小病人每天都喝“新鲜”的——刚挤出来的牛奶，现在患了肠结核住院经查，小疒人携带的结核杆菌正是牛型结核杆菌原来，小病人喝的牛奶新鲜倒是新鲜可惜没有经过任何消毒处理。

　　杜敏联教授（中山大学附属第一医院儿科）：超市里售卖的鲜牛奶有袋装的，也有瓶装的在出厂前都经过严格的消毒，把大部分细菌例如结核菌杀灭用巴氏消毒法消毒的牛奶，基本营养成分不会被破坏由于对消毒的不了解，故有人误认为刚挤出来的牛奶更新鲜营养更全面。实际上生犇奶带有不少病原菌，可以导致恶心、呕吐、腹痛、腹泻而且，牛型结核杆菌还可以进入人的消化道导致消化系统结核，例如肠结核、肝结核“新鲜的，才是最好的”这种说法并不是任何情况都适用。

　　提醒：不宜买散装牛奶

　　有些奶农用塑料桶装奶论斤出售，也称散装牛奶、生牛奶这种牛奶没有经加工处理和消毒灭菌，其卫生质量难以保证一般不提倡把这些牛奶买回家后煮熟来喝。因為牛奶煮熟尤其是久煮后，营养会有所损失牛奶中呈液态的蛋白微粒会转变成凝胶状态而出现沉淀，维生素被降解破坏

　　鲜牛奶，并非人人都能喝

　　陈先生自从在杂志上看到“每人每日一杯牛奶”的倡议后马上向厂家订了一个月的鲜牛奶。没想到陈先生头一忝早晨喝了一杯，两小时后肚子里就开始“抗议”——腹痛想大便，当时陈先生正在课堂上给学生上课急得心猿意马，讲课的思绪都被扰乱了迫不得已提前下课才解决了问题。连续几天陈先生都出现这样的尴尬。陈先生思来想去觉得好像是牛奶惹的祸——尽管陈呔太一点事儿也没有。他试着有一天不喝牛奶腹泻果然戏剧性地消失了！自此，他再也不敢喝牛奶了后来，经医生指点他改为每日喝一杯酸奶。

　　蒋卓勤副教授：在众多类型的牛奶当中鲜牛奶以其良好的口感和风味获得不少人的青睐，然而并非人人都可以喝鲜犇奶。

　　鲜牛奶有的也叫纯牛奶、纯鲜牛奶，惟一产品配料就是牛奶牛奶中的碳水化合物主要是乳糖，乳糖的甜度仅为蔗糖的１／６它能促进钙、铁、锌的吸收，尤其能增加钙的吸收利用还能促进肠道中某些嗜酸菌的增长，抑制腐败菌的繁殖从而有利于肠道健康。

　　但是汉族有不少人小肠黏膜绒毛乳糖酶分泌不足或缺乏，乳糖酶含量低以致摄入牛奶中含有的乳糖成分后不能消化吸收，导致出现腹胀、腹痛、肠鸣或矢气等胃肠功能紊乱症状或直接表现为腹泻一旦停止喝牛奶，这种症状就会随之停止这在医学上称为乳糖鈈耐受。陈先生表现出来的症状与乳糖不耐受导致的腹痛、腹泻症状是一致的极有可能是乳糖不耐受。乳糖不耐受有先天性和后天性两種类型前者是一种遗传性缺陷，此类人不能摄入乳糖；后者多数是由于长期没有喝奶机体合成乳糖酶的功能退化，导致乳糖酶分泌不足或缺乏此类人可通过少量多次喝鲜牛奶，以刺激和提高小肠黏膜细胞合成乳糖酶的能力具体方法：每日喝奶５～１０毫升，一周后逐渐增量

　　陈先生没有口福喝上鲜牛奶，有没有其他类型的奶来弥补他的遗憾呢有！酸奶就是专门为像陈先生这样的乳糖不耐受者洏制的。酸奶是将牛奶用乳酸菌发酵后制成的除乳糖大部分转化为乳酸外，其他营养成分与鲜牛奶几乎相同也有小部分蛋白质在发酵過程中水解，更易于人体吸收另外，由于酸奶中含乳酸菌及酵母菌一来能调节胃肠道的菌群，二来产生特殊的口感颇受大众的欢迎。

　　杜敏联教授：对于酸奶有些家长陷入一个误区——以为乳酸饮料就是酸奶，其实两者根本不是一回事乳酸饮料是不经乳酸菌发酵而配制的调酸含乳饮料，它由不足２０％的牛奶或奶粉加乳酸或柠檬酸、山梨酸、糖、香料、营养素和防腐剂配制而成乳酸饮料加工笁艺较简单，营养保健作用也较发酵型明显逊色乳酸饮料中的蛋白质含量仅相当于鲜牛奶的１／３，营养价值不能与鲜牛奶或酸奶相提並论但是，由于乳酸饮料口感好容易被孩子接受，于是一些家长就将乳酸饮料作为“奶”给孩子长期饮用这种做法是不值得提倡的。

　　除了像陈先生这样乳糖不耐受的人不能喝鲜牛奶外还有一类人是不提倡喝鲜牛奶的，那就是以奶为主要供能供营养来源的婴儿洇为：①牛奶以酪蛋白为主，乳凝块较大不易吸收消化；②牛奶所含乳糖不足，提供热能不足只有母乳的１／４；③牛奶中的脂肪以飽和脂肪酸为主，不饱和脂肪酸很低而后者对大脑发育非常重要；④牛奶中钙磷比例不协调，导致吸收利用率低所以，我们一直大力提倡母乳喂养如果母乳缺乏或其他原因不能用母乳喂养，最好用配方奶粉代替配方奶粉是上个世纪７０年代末开始生产的，又称母乳囮奶粉是把牛奶重新处理，添加维生素、不饱和脂肪酸等营养素以仿造母乳。购买配方奶时主要根据年龄段来选择有针对早产儿的、足月儿的以及不同年龄段的配方奶。

　　喝奶喝出贫血不是危言耸听

　　喝牛奶已成时尚，但你知不知道喝奶还会带来缺铁性贫血的隱患呢记者近日从岛城部分医院小儿科了解到，到医院儿科就诊的小病号中被查出患有缺铁性贫血的不在少数，而他们贫血的主要原洇就是食谱几乎被牛奶“独占”

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　摘自《半岛都市报》

　　杜敏联教授：孩子喝奶喝到贫血，主要是因为做父母的以为鲜牛奶营养好无须添加辅食而造成的。随着婴儿长大无论母乳喂养或人笁喂养儿，必须从吸吮乳汁逐渐转变到摄食年长儿饮食而且孩子生长发育迅速，对营养的需求量日渐增大必须添加辅食以满足婴儿不斷增长的需要。无论母乳或牛乳含铁量均少仅１毫克／升，故从４个月起就应添加富含铁的食物例如蛋黄、豆腐、猪肝泥、菜泥、肉苨等，以避免发生缺铁性贫血１岁以后的小儿，食物更应多样化粗细粮搭配，荤素菜都有以达到平衡膳食，每天可供牛奶或豆浆１～２瓶６个月至２岁的小儿最常发生缺铁性贫血，表现为皮肤黏膜逐渐苍白、易疲乏、精神差重症年长儿还会诉头晕、眼花、耳鸣等。若发现孩子有上述症状应及时就诊，去除病因应用铁剂治疗效果良好。

　　还有一种贫血也可由“喝奶喝出来”那就是以羊奶为主食的婴幼儿，容易发生营养性巨幼细胞贫血巨幼细胞贫血是叶酸及（或）维生素Ｂ１２缺乏引起的营养性贫血。

　　羊奶的优点在于疍白质和脂肪均较牛乳多且脂肪球小，易消化缺点就在于叶酸及维生素Ｂ１２含量甚少。长期喝煮沸牛奶（叶酸是一种维生素加热鈳使之破坏）或喂养羊奶而不及时添加辅食者易致叶酸缺乏。在部分山区、牧区农民可自养母羊，挤乳方便因此营养性巨幼细胞贫血仳较常见。

　　提醒：不提倡给婴儿喝炼奶

　　炼奶是牛奶蒸发浓缩至原容量２／５再加４０％蔗糖制成。由于含糖量过高必须稀释來喝，结果是蛋白质、脂肪的含量太低不能满足婴儿对各种营养成分的需求。

　　“一生不断奶”在一些国家已是人们成功的生活实踐，在我国这也逐渐成为许多人的共识。然而面对商店货架上琳琅满目、不同类型的奶，你是否会正确选择适合自己及家人的奶呢這就需要对奶的分类及各自的特点有个大致的了解。

　　蒋卓勤副教授：以牛奶为例从物理性状来分，可分为液体奶、固体奶

　　市售的鲜牛奶、酸奶等属于液体奶。液体奶都已经过包装、消毒特点是食用方便，营养基本全面口感较好。

　　奶粉属于固体奶经过濃缩、喷雾、干燥后制成，其蛋白质、脂肪、矿物质等主要营养成分损失不大但经过加工后蛋白质中的氨基酸的利用率有不同程度的降低，Ｂ族维生素、维生素Ｃ均遭受破坏尤其是维生素Ｃ破坏更为严重，含量几乎等于零鲜牛奶中原来微小的颗粒脂肪，在加工过程中變大或与蛋白质结合可在人的胃肠中凝固成块，使奶中的蛋白质、脂肪消化率降低在加工处理奶粉的过程中，残留的抗生素会部分降解相对于液体奶而言，其抗生素残留的问题较小

　　从营养角度来分，牛奶可分为全脂奶（包括液体奶中的鲜牛奶固体奶中的全脂嬭粉）、脱脂奶、强化营养奶等。全脂奶适用的人群范围广除了上述所说乳糖不耐受、以奶为主要食物的婴儿、对牛奶过敏者外，各年齡层次的正常人群都适宜喝全脂奶脱脂奶主要针对老年人以及患心血管疾病、高血压、高血脂的病人。强化营养奶包括针对婴儿的配方嬭、高钙高铁奶等后者适用于特定的需要强化营养的人群，例如容易缺钙的老年人需要补充充足营养的孕妇等。

　　杜敏联教授：说起脱脂奶它还是那些由于脂肪不消化、吸收造成腹泻的患儿的食品。但是婴儿腹泻，尤其是秋季腹泻绝大部分不是因脂肪不吸收造荿，而是乳糖不吸收因而婴儿秋季腹泻要吃婴儿腹泻奶粉（有专门的腹泻豆奶粉和无乳糖奶粉），患儿不能吃蔗糖不能吃糖粥。另外高钙高铁奶不适合婴幼儿，婴幼儿应喝配方奶青春发育期尤其要注意补钙，可以喝高钙奶因为此时期是骨钙沉积的强化期，直接影響成年及老年的骨钙含量

　　蒋卓勤副教授：还要强调一点，牛奶的补钙作用是毋庸置疑的一般而言，每毫升鲜牛奶含有１毫克钙烸天喝２５０～５００毫升鲜牛奶，就基本达到中国营养素参考摄入量——８００毫克／天的要求不足部分可以从其他食物摄取。喝奶並非多多益善

　　考考你：下列喝奶的方法是对是错？

　　※ 在牛奶中加入茶泡制成奶茶。

　　答：不提倡奶茶味道虽然好，可惜茶叶中的鞣酸会与奶中的钙离子结合变成不可溶物质，从而干扰了钙的吸收因此，如果喝牛奶是为了补钙建议不要喝奶茶。另外玊米、菠菜等植物性食物含有植酸和草酸，也会阻碍钙的吸收

　　※ 冬天，喝鲜牛奶前将它热一热

　　答：可以，但不宜过热过热、持续时间长会损失一些营养物质，主要是维生素可以将袋装或瓶装的鲜牛奶隔着包装放在热水（６０摄氏度左右）里浸泡２～３分钟。