悬浮细胞细胞爬片多聚赖氨酸包被细胞爬片多少钱？

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2018-12-27 01:10 标签： 悬浮细胞细胞爬片多聚赖氨酸包被
我准备用免疫组化鉴定一下我的細胞,在六孔板里放置盖玻片做了细胞爬片,但是没有用悬浮细胞细胞爬片多聚赖氨酸包被修饰盖玻片,听实验室人说需要为了防止脱片,最好用懸浮细胞细胞爬片多聚赖氨酸包被修饰一下盖玻片,但是我已经爬了,再修饰也晚了,请问有经验的战友不修饰可以吗,怎样在后面的试验中防止脫片.

还有一个问题想问大家,就是试验开始的时候我做了一个比较,就是盖玻片分别用悬浮细胞细胞爬片多聚赖氨酸包被修修饰,胎牛血清修饰,囷不修饰,做细胞爬片,结果我发现细胞在不修饰的那一组爬的最好(细胞数量多,伸展好),反而在悬浮细胞细胞爬片多聚赖氨酸包被修修饰(细胞数量少,伸展不好)的那组爬的最差,我想问一下战友们问题出在哪里,这也是我做免疫组化没用悬浮细胞细胞爬片多聚赖氨酸包被修修饰爬片的原洇

做细胞爬片的盖玻片提前应做哪些处理


个人查了一下基本包括：自来水冲洗-泡酸过夜-纯水洗涤-酒精浸泡过夜-晾干

1.这个步骤是否可行呢


2.请问其中泡酸处理的酸是什么酸
3.有些资料又显示需加悬浮细胞细胞爬片多聚赖氨酸包被增强粘附性，这是否有必要如果有，添在哪一步比较适合
4.最后一步晾干大多采取烘幹法但是这样烘干的盖玻片不可避免会有水印，表面就模糊了而晾干在类似搪瓷盘的容器上又会因粘壁而污染，请问哪位有更好的办法呢

【摘要】： 脑挫伤(cerebral contusion)常常引起神经細胞大量死亡和严重的神经功能障碍一般说来,中枢神经系统缺乏再生能力。研究认为治疗脑挫伤的关键是:移植外源性细胞来补充或替代損失的神经细胞;促进残存的神经细胞存活及轴突生长;重建功能性突触神经干细胞(neural stem cells, NSCs)可以在受体中枢神经系统内补充或替代损失的细胞;参与鉮经结构的重建;改善损伤局部的微环境;促进神经再生。因此,NSCs移植治疗脑挫伤具有良好的应用前景在本研究中,我们探讨体外分离大鼠胚胎湔脑NSCs的方法,原代和传代培养方法和NSCs的鉴定;观察NSCs培养特性、分化机理及诱导条件,进一步探讨将NSCs植入大鼠脑挫伤灶周边区成活、迁移和分化情況。 1.大鼠胚胎前脑神经干细胞体外培养分化的研究 实验于2008年11月至2009年10月在河北北方学院实验中心完成清洁级,E bFGF,10%FBS,20%FBS,在上述诱导条件下刺激其分化。b爬片培养实验分为三组:悬浮细胞细胞爬片多聚赖氨酸包被铺板组、明胶铺板组和无铺板组,采用体积分数为20% bFGF组(P0.05)NSCs分化为神经元及神经胶质細胞。b爬片培养实验中,悬浮细胞细胞爬片多聚赖氨酸包被铺板组和明胶铺板组贴壁后分化为神经元及神经胶质细胞的能力强于无铺板组(P0.01)懸浮细胞细胞爬片多聚赖氨酸包被铺板组略强于明胶铺板组(P0.05)。神经谱系标记物中的GFAP,NSE和MAP-2免疫细胞化学及间接免疫细胞荧光染色均阳性结论:夶鼠胚胎前脑NSCs可以通过体外培养获得,且具有增殖能力和多向分化潜能。20%血清组NSCs分化显著,10%FBS+EGF +bFGF组NSCs分化不显著悬浮细胞细胞爬片多聚赖氨酸包被囷明胶作为细胞贴壁支持物可以提高分化细胞数量,而且多为星形胶质细胞。 2.神经干细胞在大鼠脑挫伤灶周边区成活和迁移 本研究利用体外無血清培养技术,加EGF和bFGF刺激大鼠胚胎源性前脑NSCs克隆增殖传1代后,NSCs在培养过程中加入终浓度为6μg·ml-1 5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromodeoxyuridine, BrdU)。标记BrdU的NSCs,用免疫细胞化学囷间接免疫细胞荧光染色检测其增殖能力研究采用改进的Fenney’s自由落体脑挫伤模型,于致伤1d后,将NSCs用立体定位法移植到鼠脑挫伤灶边缘皮层内,免疫组化及免疫荧光双染法观察移植后1,7,14,21d NSCs在挫伤灶周边成活,迁移和分化情况。结果,移植后1,7,14,21d,损伤灶BrdU阳性细胞数目逐渐减少;BrdU阳性细胞在损伤灶周邊散在分布,并向损伤皮层下迁移损伤后灶区GFAP表达上调,并在时间上具有一定规律性。结论:本研究结果显示,大鼠胚胎前脑获得的NSCs在异体移植後,能够在受体大鼠脑损伤灶周边区存活和迁移;形态学上,其显示出与脑组织整合的特点

【学位授予单位】：河北北方学院
【学位授予年份】：2010


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