专利名称：：具有治疗性质的Aβ1-42特异性单克隆抗体的制作方法具有治疗性质的Api-42特异性单克隆抗体本发明涉及用于治疗由淀粉状蛋白或淀粉状蛋白样蛋白引起的或与其相关嘚疾病和病症的治疗和诊断的方法和组合物所述疾病和病症包括淀粉样变性，这是一组与淀粉状蛋白相关的病症和异常诸如阿尔茨海默病。淀粉样变性不是单一的疾病实体而是一群多种以蜡状的、淀粉状的蛋白(称之为淀粉状蛋白，它们积累在一个或一个以上的器官或身体系统中)细胞外组织的沉积为特征的进行性疾病过程随着淀粉状蛋白沉积物堆积，它们开始干扰器官或身体系统的正常功能至少存茬15种不同类型的淀粉样变性。主要形式是没有已知前例的原发性淀粉样变性其它疾病之后的继发性淀粉样变性和遗传性淀淀粉样变性。繼发性淀粉样变性发生在患有慢性感染或炎性疾病诸如结核病、称为家族性地中海热的细菌感染、骨感染(骨髓炎)、类风湿性关节炎、小腸发炎(肉芽肿性回肠炎)、霍奇金病和麻疯病的人群中。淀粉状蛋白沉积物通常包含三种组分占淀粉状蛋白物质的90%的淀粉状蛋白质原纤维(fibril)包含数种不同类型蛋白中的一种。这些蛋白能够折叠为所谓的"p-折叠"片状原纤维这种独特的蛋白构型显示出对刚果红(ongored)的结合部位，导致了澱粉状蛋白质的独特的着色性质此外，淀粉状蛋白沉积物与淀粉状蛋白P(五边形的)组分(AP)(与正常血清淀粉状蛋白P(SAP)相关的糖蛋白)密切相关以忣与硫酸化糖胺聚糖(GAG)(结締组织的复杂碳水化合物)密切相关。许多老年疾病基于或与淀粉状蛋白样蛋白有关并且部分地以促进疾为特征。這些疾病包括但不限于神经疾病诸如阿尔茨海默病(AD)，包括以认知记忆能力的损失为特征的疾病或病症例如，诸如轻度认知损害(MI)、路易體痴呆(Lewybodydementia)、唐氏综合征(Down'ssyndrome)、遗传性脑出血伴淀粉样变性(荷兰型)；关岛帕金森-痴呆综合征其它基于淀粉状蛋白样蛋白或与其相关的疾病是进行性核上性麻痹、多发性硬化、克-雅二氏病(reutzfeldJaobdisease),帕金森氏病、HIV相关痴呆、ALS(肌萎缩性侧索硬化症)、包涵体肌炎(IBM)、成年发病型糖尿病、老年性心脏淀粉样变性、内分泌肿瘤以及其它疾病，包括黄斑变性尽管这些疾病的发病机理可能是不同的，但它们特有的沉积物经常包含许多共同的汾子成分在显著程度上，这些可能归因于促进发炎途径的局部活化从而导致活化的补体组分、急性期反应物、免疫调节剂及其它发炎介質的同时沉积(MGeer等1994)。阿尔茨海默病(AD)是一种神经疾病主要认为由淀粉状蛋白斑，即在脑中蛋白质异常沉积的积累所引起的在感染个体脑Φ发现的最常见的淀粉状蛋白的类型主要包含Ap原纤维。科学证据表明在斑块中p-淀粉状蛋白质的产生和累积的增加导致神经细胞死亡这促進AD的发展和进程。在关键脑区域的神经细胞的损失又导致神经递质的减少和记忆的减损主要造成斑块聚集的蛋白质包括淀粉状蛋白前体疍白(APP)和两种早老蛋白(早老蛋白i和早老蛋白n)。通过酶p和Y分泌酶连续裂解淀粉状蛋白前体基酸的Ap肽的释放APPs的降解可能会增加它们在斑块中聚集的倾向。由于其末端的两个极疏水的氨基酸残基A卩(l-42)片段尤其具有构建聚集物的高倾向。因此认为A卩(l-42)片段主要涉及并造成AD中神经炎斑块形成的起始并因此具有高病理学潜力。因此需要可以靶向并扩散淀粉状蛋白斑形成的特异性抗体AD的症状出现緩慢，第一个症状可能仅僅是轻度健忘在这一阶段,个体可能忘记新近的事件、活动、熟悉的人或东西的名称以及不能解决简单的数学问题。随着疾病进展症状能更容易地被注意到并且变得足够严重从而导致患有AD的人们或他们的家人寻求医学帮助。AD的中期症状包括忘记如何做诸如整理清洁的简单任务以及说话、理解、阅读或书写的问题逐渐显现。后期的AD患者可能变得焦虑或具攻击性可能从家里走失以及最终需要全面护理。目湔唯一的明确诊断AD的方法是在个体死后的尸体解剖中鉴别脑组织中的斑块和缠结。因此当人仍活着的时候，医生只能作出"可能"或"很可能"患有AD的诊断应用目前的方法，内科医生利用数种诊断"很可能，AD的工具可以至多在卯％的时间准确地诊断AD内科医师询问人的一般健康、过去的医疗问题和此人完成日常活动的任何困难的历史。记忆、问题求解、注意力、计算和语言的行为测试提供认知退化的有关信息医疗检验诸如血、尿或脊髓液的检验和脑部扫描可以提供一些其它信息。AD的管理由基于药物的和不基于药物的治疗组成以改变疾病潜茬的过程(延緩或逆转进程)为目的的治疗目前大部分是不成功的。恢复神经细胞的化学信使(神经递质)不足(缺陷)或功能障碍的药物特别是胆堿酯酶抑制剂(hEI)(诸如他克林和卡巴拉汀(rivastigmine))已显示出可改善症状。hEI阻碍神经递质的酶降解因此增加在脑中可用于传递神经信号的化学信使的量。对于某些在疾病早期和中期阶段的人们药物他克林(OGNEX⑧，MorrisPlains,NJ)、多奈哌齐(ARIEPT,Tokyo,JP)、卡巴拉汀(EXELON,EastHanover,NJ)或加兰他敏(REMINYL,NewBrunswik,NJ)可以在有限的时间内帮助防止某些症状变得哽严重另一种药物美金刚(NAMENDA,NewYork,NY)已被核准治疗中等至严重的AD。也有药物用于对付AD的精神病学表现有些药物也可以帮助控制AD的行为症状，诸如夨眠、兴奋、恍惚、焦虑和抑郁治疗这些症状通常橫j寻患者更舒服和使对于照顾者来说更容易照顾。不幸的是尽管显著地治疗进展显礻出这一类试剂可靠地比安慰剂好，但是疾病仍继续发展并且对精神功能的平均作用仅为有限的。很多用于AD药物治疗的药物例如，诸洳hEI也具有副作用，包括胃肠功能失调、肝脏毒性和体重减轻其它基于淀粉状蛋白样蛋白的聚集和沉积或与它们相关的疾病是轻度认知損害、路易体痴呆(LBD)、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、包涵体肌炎(IBM)和黄斑变性，特别是年龄相关性黄斑变性(AMD)轻度认知损害(MI)是一个笼统的术语，最经瑺被定义为不明显但可测量的记忆障碍具有MI的人比正常随变老所预期的体验到更严重的记忆问题，但是不会显示出其它的痴呆症状诸洳判断或推理损害。MI是通常反映出AD临床前阶段的症状P淀粉状蛋白在内嗅皮质(E)的沉积被认为在老年人轻度认知损害(MI)的发展过程中扮演了关鍵的角色。这与一旦AD变得临床明显则SF-AA卩(l-42)水平即显著下降的观察结果是一致的。与SF-A(5(l-42)相反SF-t的水平在MI阶段显著增加，并且这些值在此之后继續升高从而表明增加的SF-t水平有可能帮助检测预测将发展成AD的MI受检者。路易体痴呆(LBD)是可发生在65岁以上人群中的神经变性疾病其一般引起認知(思考)损伤和异常的行为改变的症状。症状可包括认知损害、神经迹象、睡眠失常和自主神经衰竭认知损害是在多数患者中LBD所呈现的特征。患者具有精神混乱的反复发作且日益严重。认知能力的波动通常与注意力和警觉性的转移程度相关认知损害和思考的波动可随汾钟、小时或天而不同。路易体是由磷酸化和未磷酸化的神经丝蛋白形成的它们包括突触蛋白a-突触核蛋白，以及参与损伤或异常蛋白消除的遍在蛋白除路易体之外，也可能存在路易轴突(Lewyneurites),其为神经细胞细胞突中的包涵体淀粉状蛋白斑可形成于患有DLB的患者的脑中，然而它們倾向于在数量上比在患有阿尔茨海默病的患者中所见到的要少AD的另一显微病理学标志，即神经原纤维缠结不是DLB的主要特征但是除存茬淀粉状蛋白斑外还经常存在神经原纤维缠结。肌萎缩性侧索硬化症(ALS)是以上位和下位运动神经元的变性为特征的在有些ALS患者中，可能存茬痴呆或失语症(ALS-D)痴呆最通常是额颞痴呆(FTD)，以及^艮多这些病例在齿状回以及额和颞叶浅层的神经元28中具有遍在蛋白阳性、T阴性包涵物包涵体肌炎(IBM)是通常发现于50岁以上人群中的致残疾病，其中肌纤维发展炎症并开始萎缩一一但是其中脑部不会受到损伤且患者保持完全的智力在患有这种老年人最普遍、进行性肌肉疾病的患者肌细胞中，发现参与淀粉状蛋白-p蛋白产生的两种酶增加其中淀粉状蛋白-p也增加。另外一种基于淀粉状蛋白样蛋白的聚集和沉积或与其相关的疾病是黄斑变性黄斑变性是引起视网膜(在眼睛后部的像纸一样薄的组织，在此感光细胞传送视觉信号至大脑)的中心区域即黄斑区变性的常见的疾病通过黄斑区处理产生清楚、明晰、"笔直向前"的视觉。损伤黄斑区导致盲点的产生和模糊不清或视物变形年龄相关性黄斑变性(AMD)在美国是引起视力损伤的主要原因，并且对于65岁以上的人来说其为高加索人Φ法定失明的主要原因。大约有180万40岁及以上的美国人患有晚期AMD以及其它730万患有中等AMD的人具有浮见力丧失的真实的危险。政府估计到2020年將会有2卯万人患有晚期AMD。AMD患者常常惊讶和沮丧的发现对这种盲症状的原因和治疗了解的是如此之少存在两种黄斑变性的形式干性黄斑变性和湿性黄斑变性。有百分之八十五的黄斑变性患者诊断为干性形式其中黄斑区的细胞緩慢的开始损坏。尽管一只眼睛可能丧失视力而叧外一只眼睛保持未受影响但两只眼睛通常都受到干性AMD的影响。视网膜下的黄色沉积物即脉络膜小疣是干性AMD的早期征兆。随着脉络膜尛疣的数目和大小的增加发展成晚期千性AMD或湿性AMD的危险也增加。千性AMD可能在不转变为疾病的湿性形式的情况下进一步发展并且导致视力嘚丧失；然而早期的干性AMD也有可能突然变为湿性形式。尽管只占到病例的百分之十五湿性形式导致了失明的百分之九十，并且被认为昰晚期的AMD(没有早期或中期阶段的湿性AMD)湿性AMD总是处于疾病的干性形式之后。当干性形式变得更严重一些人在黄斑区的后面开始有异常的血管生长。这些血管非常脆弱并且会泄漏液体和血液(因此是"湿性"黄斑变性)这导致了对黄斑区的快速损伤。干性形式的AMD开始会常常引起轻喥的视力模糊特别是视力的中心可能变得模糊不清，并且这一区域随着疾病的发展变得更大如果只有一只眼睛受到影响，则没有症状鈳以被注意到在湿性AMD中，直线可能看起来像波浪状并且中心视力的丧失可能很快出现。黄斑变性的诊断一般涉及扩张眼检查、视觉敏感度试验以及用称之为眼底检查的方法查看眼睛的后部以帮助诊断AMD,并且如果有湿性AMD的嫌疑，则也可能进行焚光素血管造影术如果干性AMD達到晚期阶段，没有预防^L力丧失的现行治疗然而，抗氧化剂和锌的特定高剂量配方可以延緩或预防中期AMD发展至晚期阶段Maugen(哌加他尼钠注射液)、激光光凝术和光动力学治疗可能可以控制黄斑区中的异常血管生长和流血，这可以对有些患有湿性AMD的患者有用；然而视力已经丧夨的则不能通过这些技术恢复。如果视力已经丧失存在可以帮助提高生活质量的低视力辅助器。年龄相关性黄斑变性(AMD)的最早的征兆之一昰称之为脉络膜小疣累近来由Anderson等进行的研究已证实脉络膜小疣包含淀粉状蛋白P(ExperimentalEyeResearh78()。进行中的研究继续探索可能促进AMD的环境、遗传和饮食因素也正在探索新的治疗策略，包括视网膜细胞移植物、能够预防或减緩疾病发展的药物、放射疗法、基因疗法、植入到视网膜的可帮助刺激视力的计算机芯片以及可预防黄斑区下新血管生长的药剂开发新药物时，需要考虑的重要因素是对目标患者来说使用的容易性由於对患者的4更利性，口服药物递送(特别是片剂、胶嚢剂和软胶剂)占所有消费剂型的70%药物开发者认同患者更喜欢口服递送，而不是接受注射或其它更具侵入性的药物给药方式导致短的给药间隔(即一天一次或持续释放)的制剂也是优选的。以口服剂型给药抗生素的容易性导致叻治疗期间患者顺从性的增加所需的是用于产生高特异性和高效性抗体的方法和组合物，如果要以口服剂型提供抗体的话这是先决条件。优选的这类抗体能识别在不同的抗原(诸如淀粉状蛋白)上的特异性表位。因此还需要的是处理并发症的有效组合物和方法，这些并發症与由淀粉状蛋白或淀粉状蛋白样蛋白引起的或与其相关的疾病相关所述疾病包括淀粉样变性，这是一组与淀粉状蛋白斑的形成相关嘚疾病和病症包括继发性淀粉样变性和年龄相关性淀粉样变性，包括但不限于神经疾病诸如阿尔茨海默病(AD),包括以认知记忆能力丧失为特征的疾病或病症例如，诸如轻度认知损害(MI)、路易体痴呆、唐氏综合征、遗传性脑出血伴淀粉样变性(荷兰型)、关岛帕金森-痴呆综合征；以忣其它基于淀粉状蛋白样蛋白或与其相关的疾病诸如进行性核上性麻痹、多发性硬化、克-雅二氏病、帕金森氏病、HIV-相关痴呆、ALS(肌萎缩性側索硬化症)、包涵体肌炎(IBM)、成年发病型糖尿病、老年性心脏淀粉样变性、内分泌胂瘤，以及其它疾病包括黄斑变性。具体而言需要的昰能消除疾病生理学表现，诸如消除与淀粉状蛋白或淀粉状蛋白样肽的纤维的聚集相关的斑块形成的特异和高效抗体对于人类阿尔茨海默病，已证明与弗氏完全或不完全佐剂混合的由A卩L42引起的抗淀粉状蛋白抗体能够减少转基因小鼠的淀粉状蛋白的负荷(Shenk等1999)。将在脂质体中偅构的四棕榈酰化APw6腹膜内接种到NORBA转基因小鼠引起显著的抗淀粉状蛋白抗体滴度这一抗体也能在体外和体内溶解淀粉状蛋白纤维和斑块(Niolau等，2002)Bard等(2000)首先提出了淀粉状蛋白斑和纤维分解发生的可能机制，他们基于他们的数据得出结论即抗体调理斑块，斑块随后被小神经M细胞的巨噬细胞毁坏DeMattos等(2001)指出抗P-淀粉状蛋白中心结构域的Mab可以结合和完全隔离血浆淀粉状蛋白。他们认为循环系统中这些mAbs的存在改变了脑和血浆Φ的AP平衡有利于外周的清除和分解代谢而不是在脑内沉积。本发明提供包含高特异性和高效抗体的新的方法和组合物所述抗体具有特異识别并结合一系列P-淀粉状蛋白抗原的特异表位的能力。通过本发明教导提供的抗体特别对治疗由淀粉状蛋白或淀粉状蛋白样蛋白引起的戓与其相关的疾病有用所述疾病包括淀粉样变性，这是一组与淀粉状蛋白斑的形成相关的疾病和病症包括继发性淀粉样变性和年龄相關性淀粉样变性，包括但不限于神经疾病诸如阿尔茨海默病(AD)包括以认知记忆能力丧失为特征的疾病或病症，例如诸如轻度认知损害(MI)、蕗易体痴呆、唐氏综合征、遗传性脑出血伴淀粉样变性(荷兰型)、关岛帕金森-痴呆综合征；以及其它基于淀粉状蛋白样蛋白或与其相关的疾疒，诸如进行性核上性麻痹、多发性硬化、克-雅二氏病、帕金森氏病、HIV-相关痴呆、ALS(肌萎缩性侧索硬化症)、包涵体肌炎(IBM)、成年发病型糖尿病、老年性心脏淀粉样变性、内分泌肿瘤以及其它疾病，包括黄斑变性；这些仅仅是其中的一些例子此外，本发明提供在表现出淀粉状疍白相关疾病或病症的哺乳动物中保持或提高认知记忆能力的新方法和组合物包括给需要这一治疗的动物，特别是哺乳动物更特别是囚类施用治疗有效量的根据本发明的单克隆抗体。附图和序列的简述图1:衍生自Ap序歹'J1-15、1-16和1醫16(A14)、22-35和29-40的肽图2:在蛋白质印迹法(Westernblot)和斑点印迹法中mAI-01-Ab72单克隆抗体与淀粉状蛋白种类的结合；图3:通过透射电子显微法的mAI-01-Ab72单克隆抗体与淀粉状蛋白纤维的结合；图4:U-13TyrlO及Val12标记的卩-淀粉状蛋白1-42肽的Th-T焚光测萣和固态NMR之间的并行实验结果。SEQIDNO:l:抗原肽Ap11SSEQIDNO:2:抗原肽APw6SEQIDNO:3:抗原肽ApW6(A14)SEQIDNO:4:抗原肽人卩2235SEQIDNO:5:抗原肽/bioventures//prodiits/PeakFit)通过应用〉、昆合Lorentzian/Gaussian拟合程序使线良好匹配，其结果显示于图4结果总结在表3中，但是最明显的差异是拟合30-33ppm周围的双峰所需的两群体的积分强度33ppm处的峰对应于纤维的p折叠，而30ppm处的峰是无规则巻曲构象的結果在PBS中孵育的样本显示出大部分在p折叠构象中的标记(81.7。/)(图2顶部)，当样本与mAI-01-Ab72孵育时卩折叠构象中的标记减少了(53.5%)(图4底部)如通过Val12卩研究測定的那样，就无规则巻曲构象而言的卩折叠构象总量的减少约35%并因此与使用荧光测量的减少总量接近一致。共振PBSmA卜01-Ab7-25ISO(ppm)FWHH(Hz)%积分强度5ISO(ppm)FWHH(Hz)%积分强度Val(3-拆叠32..Val(3-无规30..表3:Val12卩两种构象的拟合参数的比较两种构象的拟合化学位移非常类似但积分强度非常不同，这反映出原始p折叠构象减少了大约35%(l-(53.5/81.7))這与得自荧光测量的数值相当一致。如通过密度梯度超速离心实验和通过Th-T焚光测试法证实的那样总结这些结果，可以成功的证实革巴向澱粉状蛋白Ap肽的N末端1-16区域的单克隆抗体mAI-01-Ab72结合预形成纤维并能够在体外抑制单体A卩肽聚集成纤维和解聚预形成纤维此抗体除了结合预形成纖维外，还能诱导Val12的P折叠多数构象向无规则巻曲二级构象环境的转变这可能是通过结合单克隆mAI-01-Ab72抗体能够溶解纤维的可能机制，也因为Val12P峰嘚详细分析显示p折叠组分减少了35%,这与荧光数据(38%)接近一致实施例12:mAI-01-Ab72对淀粉状蛋白纤维的功能性"J在潜合肌47-W-z^72戎沐,，J//一2#维的#求攻义和>^覆W鼓为评估抗體能够解聚预形成p淀粉状蛋白(AP^2)纤维的机制进行了测量解聚的硫代黄素T(Th-T)荧光测试法和分析二级结构的U-13酪氨酸10和缬氨酸12标记的Api-42肽的固态核磁囲振(NMR)的并行比较。抗体溶解了35.4%的预形成Api-42纤维并同时诱导二级构象从p折叠向无规则巻曲的转变就无规则巻曲而言，P折叠构象总量的减少约為35%,并因此与用荧光Th-T测试法测量的减少总量接近一致这些数据表明抗体的结合引发二级结构的转变，其可能引起P折叠的平行分子间排列的鈈稳定导致延长的纤维断裂成较小的片段。".2Wv47-W"A7^^种沟秉^袭^潜合清和力由于在科学文献中公知部分抗体-抗原的结合能量可以用于抗原构象的能量依赖性改变6因此进行mAI-01-Ab72抗体结合到整个A^-"蛋白与结合到9个氨基酸长的包含抗体的表位的较小肽的结合亲和力的比较实验。为进行此比较通过ELISA使用生物素化的覆盖mAI-01-Ab72的表位全部氨基酸序列的肽(AP"2序列的氨基酸13-21,Mimot叩es生产，购自ANAWATradingSA)和生物素化的完整Api-42肽(Bahem)分析了抗体mAI-01-Ab72的亲和力根据制造商(Mimotopes)的說明进行分析。抗体与包含其特异表位(APw2序列的氨基酸13-21)的肽的结合亲和力比与整个Ap^2蛋白的结合亲和力高38.40%因此提示结合亲和力能力之差被用於淀粉状蛋白二级构象的能量消耗性转变，以在对于抗体相互作用而言更可接受的位置上呈现抗原这可以解释为什么抗体对天然抗原(整個淀粉状蛋白肽)的亲和力比对分离的亚单位的亲和力低。实施例13:mAI-01-Ab72与不同类的淀粉状蛋白的构象特异性结合为了评估mAI-01-Ab72对不同阶段聚合的淀粉狀蛋白即对单体和聚合的可溶淀粉状蛋白、特别是淀粉状蛋白P(AP)蛋白和原纤维淀粉状蛋白的特异性，进行了包被有这些不同阶段聚合的p淀粉状蛋白的ELISA根据修改的7公开的方法制备单体，根据8制备聚合的可溶淀粉状蛋白特别是淀粉状蛋白P(Ap)，且通过将淀粉状蛋白(Bahem瑞士)以在Tris/Hl(pH7.4)中嘚终疼度在37。孵育5天随后离心(IO，OOOrpm5分钟)来制备纤维。然后将淀粉状蛋白聚合物以55jig/ml的终浓度包被在ELISA板上并通过使用碱性裤酸盐标记的抗尛鼠IgG单克隆抗体(JaksonImmunoResearhLaboratories,In.)进行结合亲和力ELISA。抗体与聚合可溶的淀粉状蛋白p(Ap)蛋白的结合亲和力(I50=2.53nM)比与纤维的结合亲和力(I50-5.27nM)更高并且与单体的结合亲和力朂低(I50=8.3nM)。这些数据表明抗体的结合除受到其表位影响外，抗体的结合还受到不同淀粉状蛋白聚集物的构象的影响实施例14:单克隆抗体mAI-01-Ab72的表位作图通过ELISA使用三种不同的肽文库进行单克隆抗体mAI-01-Ab72的表位作图。一个文库包含总共33个生物素化的覆盖AP1-42的完整氨基酸(aa)序列(由Mimotopes制造购自ANAWATradingSA)的肽，第二个文库包含生物素化的使用来自第一肽文库的肽12(AP的aal2-20)并用丙氨酸替代序列中每一个氨基酸的肽(参见下表4),以及第三个文库包含生物素化嘚肽13、14或15(A卩的aa13-21、14-22或15-23)并在每种情况下将最后的氨基酸替代为丙氨酸或将已经是丙氨酸的aa21替代为甘氨酸(参见下表5)应用生物素化的完整Api-42肽作为陽性对照(Bahem)。根据制造商(Mimotopes)的说明进行表位作图简单的说，将经链亲和素包被的板(NUN)在4'用PBS中的0.1%BSA封闭过夜用PBS-0.05。/o吐温20洗涤后用来自文库的不同肽在室温下包#皮板1小时，肽在PBS中0.1%BSA、0.1%叠氮化纳中稀释至10jiM终浓度洗涤后，将培养板与mAI-01-Ab72抗体或同种型对照小鼠IgG2b抗体在室温下孵育1小时抗体在PBSΦ2%BSA、0.1%叠氮化纳中稀释至10jig/ml。再次洗涤板并用碱性磷酸酶偶联的山羊抗小鼠IgG在室温下孵育1小时。在最终洗涤后将板与磷酸酶底物(pNPP)孵育并用ELISA板读取器在405nm读数。显示单克隆抗体mAI-01-Ab72特异结合第一个肽文库的肽12、13、14和15这4个肽包含A卩l-42的aa12-20(VHHQKLVFF)、13-21(HHQKLVFFA)、14-22(HQKLVFFAE)和15-23(QKLVFFAED),这提示表位位于Ap的区域12-23。用丙氨酸替代的第②个文库用于测定结合肽12-20(VHHQKLVFF)的关键aa当aal6、17、19或20被丙氨酸替代后，mAI-01-Ab72抗体的结合完全丧失表明这些aa对于抗体与A卩的结合是绝对关键的。当aal5和18被替代时mAI-01-Ab72抗体的结合部分丧失。当aal4被替代为丙氨酸时结合也几乎完全丧失，表明aal4对结合也是非常重要的最后，使用第三个文库以测定氨基酸21、21或23对表位的结合是否是关键的当aa23被丙氨酸替代时，抗体与aa15-23的结合降低了表明aa23对结合也是重要的。当aa21被甘氨酸替代时结合部汾丧失，以及当aa22被丙氨酸替代时结合轻微丧失。表4:第二个文库所用肽的概述用斜体和下划线标记了对于结合重要的aa并且用斜体和粗体囷下划线标记了对结合绝对关键的aa。p12-20VHHQKLVf1A12AHHQKLVFA13VAHQKLVFFA14VHAQK匕VFFA15VHHAK匕VFFA16VHHQA匕VFFA17VHHQKAVFFA18VHHQKLAFFA19VHHQKLVAFA20VHHQKLVFAaa编号￡表5:第三个文库所用肽的概述用斜体和下划线标记了对于结合重要的aa,并且用斜体和粗体和丅划线标记了对结合绝对关键的aa106p13-21HHQKVFAp13-21G21HHQK匕VFFGp14-22HQK匕V1=Ap14-22A22HQK匕VAAp15-23QK匕VFADp15-23A23QK匕VAA13"，实施例15:用mAI-01-Ab72被动接种对单转基因hAPP小鼠脑中淀粉状蛋白负荷的影响为评估在体内mAI-01-Ab72单克隆抗体结匼可溶淀粉状蛋白及将其清除出脑的能力使用性别和年龄匹配的6个月龄的单hAPP小鼠9用于不同剂量的被动免疫研究。在研究结束时通过收集动物的脑及进行A卩1-40和Ap1-42特异性ELISA(TG，德国)分析可溶淀粉状蛋白负荷每组8-13只动物以一周的时间间隔接受两次在200^1PBS中100、300和lOOOng单克隆抗体的注射，而仅使用PBS注射作为对照在第二次注射一天后，处死动物用于可溶淀粉状蛋白部分的生物化学分析为了定量脑匀浆可溶部分和/或脑脊髓液(SF)中嘚人A卩1-40和人A(31-42的量，使用了酶联免疫吸附分析(ELISA)试剂盒(人淀粉状蛋白p40或p42ELISA,高敏感性TG，瑞士)根据制造商的方案进行ELISA。简单地说在没有蛋白结匼能力的96孔聚丙烯板(Greiner，德国)中制备标准品(合成的Ap1-40或Ap1-42的稀释液)和样本在样本稀释剂中制备终浓度为1000、500、250、125、62.5、31.3和15.6pg/ml的标准品稀释液和样本，裝配ELISA试剂盒达到60jil的终体积。由于淀粉状蛋白的水平随小鼠年龄的增加而增加以及由于实际评估要求样本的读数在标准曲线的线性部分內，因此用于A卩40分析的样本以2:3稀释用于A卩42分析的样本没有稀释。将样本、标准品和空白(50jil)添加到经抗Ap包被的聚苯乙烯板(俘获抗体选择性识別抗原的末端)另外添加选择性抗Ap抗体缀合物(生物素化的检测抗体)，并在4x:孵育过夜以允许形成抗体-淀粉状蛋白-抗体-复合物第二天，添加鏈亲和素-过氧化物酶-缀合物30分钟后添加TMB/过氧化物混合物，导致底物转变为有颜色的产物并通过光度测定法用具有450nm滤光片的ELISA读取器测量顏色强度。通过与用合成的A卩1-40或Ap1-42制作的标准曲线比较吸光度得到样本中AP含量的定量以相对平均对照值的分别改变表示结果(以相对对照的百分比)。当以300叫的剂量两次腹膜内注射单克隆抗体AI-01-Ab72对单hAPP小鼠被动免疫后其脑匀浆中A卩40的总量显著减少且AP42总量的减少大体上不显著(Ap40:-27.3±13.9%,p<0.05;A卩42:-8.6±22.4,p=0.56;非配对StudentT检验)，而100和lOOOjig没有达到显著性用lOOjig免疫导致脑匀浆中AP40和A卩42的增加(A卩40:32.3±36.8%;A卩42:38.3±51.4%),而用IOOO照处理引发淀粉状蛋白负荷降低的正确趋势，并且在每組动物数目增加时潜在有效(A卩40:-2.2±26.0%;A卩42:-9.3±15.9%)这些数据证实在急性免疫方案中，抗体mAI-01-Ab72能够降低这些鼠科AD模型的脑中可溶A卩的总量有趣的是，似乎剂量关系是瞬间的但是需要进行更多的更大组的研究以得到显著的数据。实施例16:慢性被动施与mAI-01-Ab72对双转基因hAPPxPSl小鼠斑块负荷的影响为评估體内mAI-01-Ab72单克隆抗体结合并降低脑中淀粉状蛋白斑的能力应用性别及年龄匹配的3.5月龄的双转基因hAPPxPSl小鼠1G用于4个月长的慢性被动免疫研究。在研究结束时通过硫代黄素S的结合由动物脑的组织化学来分析淀粉状蛋白斑。15只转基因动物接受16次500jig单克隆抗体的每周注射仅用PBS注射的15只动粅作为对照。所有注射均为腹膜内给予处死时，将小鼠麻醉并用生理血清在4匸经心脏冲洗以从脑血管中移除血液随后，从颅中移除脑并在冠/额平面切割分离前脑和后脑。通过^f吏用中线矢状切割将前脑均匀分为左和右半球将一个半球后固定于组织学使用的4%低聚甲^中。切割矢状振动切片机切片(40nm)用于自由漂浮孵育并储存在4t:直到在PBS中用1%叠氮化钠染色对于密集的斑块，用石克代黄素S染色五个不同水平的切片所有动物的切片随机染色并盲定量。用装备有SonyDX-9100P相机的LeiaDMR显微镜获得图像并使用LeiaQ-Win软件用计算机分析。在图像获取过程中显微镜的光强度囷聚光器设置保持为常数。所有获得的图像均经过相同计算机子程序处理以最小化研究者的偏差。在整个分析期间一致的应用密度分割閣值选择脑下脚区域用于在硫代黄素S染色中淀粉状蛋白负荷的自动定量。在如上面描述的那样对双hAPP/PSl小鼠被动免疫4个月时脑下脚区域中總的斑块负荷和斑块的数目能够显著的减少。在斑块负荷中可以达到310/o的显著降低(mAI-01-Ab72:1.11±0.21%,以及对照1.61±0.35%;p=0.003，Mann-WhitneyU-检验)而慢性被动免疫使斑块量显著减尐了19%(mAI-01-Ab72:8.73±1.36以及对照10.78±1.36;p=0.006,Mann-WhitneyU-Test)，表明斑块溶解的发生程度略孩史低于斑块裂解实施例17:用mAI-01-Ab72被动接种对单转基因hAPP小鼠记忆能力的影响为了分析体内mAI-01-Ab72抗体妀变或增加认知功能的能力，应用性别和年龄匹配的9个月龄的单hAPP小鼠进行被动免疫研究在免疫期结束时，通过新物体识别任务(ORT)测量非空間认知每组12只动物接受两次200plPBS中的400jig单克隆抗体的腹膜内注射，而以仅注射PBS作为对照第二次注射后一天，在新物体识别任务(ORT)1213中研究认知能力。对于ORT登记将小鼠置于行为场所中10分钟并面对新的未知物体。记录探索时间三小时后，将相同的小鼠重新置于相同的场所中经历苐二时期但面对先前已探索过的物体以及额外的新物体。再次记录探索两个物体的时间并以探索新物体的时间相对于总的探索时间的仳值计算，且以相对对照的比例变化来表示认知系数用mAI-01-Ab72被动接种导致单转基因AD小鼠认知记忆能力的显著增加(mAI國01画Ab72:131.6±9.1%,以及对照100.0±9.2%，p〈0.05;非配對StudentT检验且各组11=12)。保藏以下的杂交瘤细胞系根据布达佩斯条约保藏在位于德国布劳恩斯切魏格38124布劳恩斯切魏格，马斯切尔奥德尔韦格1B的"德意志微生物保藏中心(DeutsheSammlungvonMikroorganismenundZellkulturenGmbH;DSMZ)，杂交瘤林名称抗体名称保藏日保藏号FP12H3mAI-01-Ab72005年12月1日DSMA-2mAI-01-Ab722005年12月1日DSMA-G2mAI-01-Ab7G22005年12月1日DSMAmAI-02-Ab62005年12月8日DSMAmAI-24-Ab42005年12月8日DSMA2756参考文献BardF，annon,BarbourRBurkeRL，GamesDGrajedaH，GuidoT,HuKHuangJ，Johnson-WoodKKhanK，KholodenkoDLeeM，LieberburgIMotterR，NguyenMSorianoF，VasquezNWeissK，WelhBSeubertP，ShenkD,YednokT.(2000).NatureMed.6,916-919.BarghornSNimmrihV，StriebingerAKrantz，KellerPJansonB，BahrMShmidtM，BitnerRS,HarlanJBarlowE,EbertU，HillenH(2005)球状淀粉状蛋白p肽寡聚体-在阿尔茨海默病中均质和稳定的神经病理性蛋白，JNeurohem95:834-847.BashongWWrigleyNG(1990)，用于电子显孩i术嘚作为高分辨标记物的连接至Fab片段或免疫球蛋白G的小胶体金技术综述JEletronMirosTeh14:313-323.Blond和Goldberg,1987，PNAS,1987年3月1日84巻，5期页。ornilesuG,DelaglioF,BaxA.(1999)J.Biomol.NMR;13:289-302.Burdik.D.等人合成的阿尔茨海默A4/p淀粉状蛋白肽類似物的组装和聚集特性，J.Biol.hem.267546-554(1992).DeMattos,Bales,KR，ummins,DJDodart，JPaul,SM，HoltzmannD.M(2001).ProNatlAadSiUSA98，.DewahterIVanDJ，SmeijersLGiNsM，KuiperiLaenenI，al鼎aertsNMoeharsD，helerFVanderstiheleH，VanLF(2000),在老的APP/V717I转基因小鼠脑中随年龄增加的淀粉状蛋白肽和通过不同于突變的早老蛋白1的机制引起的淀粉状蛋白斑JNeurosi20:.DewahterI，ReverseDaluwaertsN,RisL，KuiperiVandenH，SpittaelsKUmansL，Ser匿lsLThiryE，MoeharsDMerkenM，GodauxEVanLeuvenF(2002)，早老蛋白1的神经元缺损抑制淀粉状蛋白前体蛋白[V717I转基因小鼠的澱粉状蛋白斑形成并校正海马的长期势差现象而不是认知缺陷JNeurosi22:.Glenner和Wong,BiohemBiophysResomml29，885-890(1984)Harlow和Lane(Antibodies:ALaboratoryManual(oldSpringHarborLaboratory,NewYork1988》HenekaMTSastreM，Dumitresu-OzimekLDewahterI—WalterJ，KlokgetherT,VanLF(2005)在APP[V717I转基因小鼠中中心神经歸活性与增加的BAE1活性一致並先于淀粉状蛋白斑沉淀，JNeuroinflammation2:22.Hodgson等人Bio/Tehnoloy，9:421(1991)IwadateM,AsakuraTWilliamsonMP.(1999)J.Biomol.NMR;13:199-211.Kirshner.DA，Abraham,&Selkoe.D.J.，在阿尔茨海默病中来自神经元内的成对螺旋状纤丝和神经元外的淀粉状蛋白纤维的x射线衍射表明交叉的卩构象Pro.Natl.Aad.Si.U.S.A83，503-507(1986).KhawB.A.等人，J.Nul.Med.23:82)Kennedy,J.H.等人1976(lin.him.Ata70:1-31)KleinWL(2002)，阿尔茨海默病中的Ap毒性球状寡聚体(ADDLs)作为新的疫苗和药物耙标Neurohemlnt41(5):345-352.Kohler和Milstein(Nature256:495-497(1975))LeVine，H.Ill,(2002).ArhBiohemBiophys404106-115.Lua等人，2001MGeer等人1994MoeharsD，DewahterI,LorentKReverseD，BaekelandtVNaiduA，TesseurI,SpittaelsKHauteV，helerFGodauxE，ordellBVanLF(1999)，在脑中过量表达淀粉状蛋白前体蛋白的不同突变体的转基因小鼠中的早期表型变化JBiolhem274:.Nelson,R.&Eisenberg.D.,淀粉状蛋白原纤维结构的近期原子才莫型，urr.Opin.Strut.Biol.(2006).Niolau,Greferath，R.Balaban，T.S.Lazarte,J，E.,和Hopkins,R.J.(2002).ProNatlAadSiUSA99，Queen等人Proe.NatlAadSiUSA,86:(1989)PearsonW.R.(19卯)，MethodsinEnzymology18363-98PetkovaAT，BuntkowskyGDydaF，LeapmanRDYauWM，TykoR.J.Mol.Biol.-260.PetkovaAT,lshiiYBalbahJJ，AntzutkinON,LeapmanRDDelaglioF，TykoR.(2002)Pro.Nat..Aad.Si.U.S.A;99:.Rousseaux等人MethodsEnzymology,121:663-69，AademiPress,1986RzepekiP.，Nagel-StegerL.，FeuersteinS.，LinneU.，Molt,O.Zadmard，R.,Asherma叫K.Wehner，M.Shrader.T.和Riesner，D.(2004).JBiolhem279,.Sambrook等人在上述引文中。ShenkDBarbourR，DunnWGordonG，GrajedaHGuidoT，HuKHuangJ，Smith,S.O.和Bormann，B.J.(1995).ProNatlAadSiUSA92488-491.Shenk等人，1999ShursA.H.W.M"等人，1977(lin.himAta81:1-40SlotJWGeuzeHJ(1985)，制备用于多标记细胞化学的金探针的新方法EurJellBiol38:87-93.Smith和Waterman,AdvanesinAppliedMathematis2(1981)，482-489VandAI,WeraS，VanLFHendersonST(2005),在阿尔茨海默病小鼠模型中生酮饮食降低淀粉状蛋白(J40和42，NutrMetab(Lond)2:28.Wagner等人(2002)JournalofLiposomeResearhVol12(3),pp259-270YeJ.，Dave,U.P.Grishin，N.V.Goldstein,J.L.，和BrownM.S.(2000).ProNatlAadSiUSA97，.Zrein等人,(1998)ininalandDiagnostiLaboratoryImmunology,5(1):45-49.ExperimentalEyeResearh78(WOW096/05113与保藏的微生物或其它生物材料有关的声明_(PT细则第13条之2)_A.以下指示涉及说明书第39页第7行所指的保藏的微生物或其它生物材4_B.保藏鉴定_其它保藏物在另一页鉴定□_保藏机构名称DSMZ-德意志微生物保藏中心_保藏单位地址(包括邮政编码和国家)德國，38124布劳恩斯切魏格马斯切尔奥德尔韦格lb_保藏曰保藏号2005年12月1日_DSMA2750_.其它声明(如果没有可空出)此信息在另一页中续□申请人:利用了细则28(4)EP_D.声明适鼡的指定国(如果没有可空出)__E.声明的单独提供(如果没有可空出)下列声明之后将提交给国际局(说明了声明的总体特性，如"保藏物的保藏号")_仅用於接受机构仅用于国际局口该页连同国际申请一起收到□国际局在2006年12月23日收到此页授权官员授权官员威姆尔佩特PT/RO/134表(1998年7月；2004年1月重印)与保藏嘚^t生物或其它生物材料有关的声明_(PT细则第13条之2)_A.以下指示涉及说明书第39页第7行所指的保藏的微生物或其它生物材料_B.保藏鉴定其它保藏物在另┅页鉴定口保藏机构名称DSMZ一德意志;敞生物保藏中心_保藏单位地址(包括邮政编码和国家)德国38124布劳恩斯切魏格，马斯切尔奥德尔韦格lb_保藏日保藏号2005年12月1日_DSMA2751_.其它声明(如果没有可空出)此信息在另一页中续□申请人:利用了细则28(4)EP_D.声明适用的指定国(如果没有可空出)__E.声明的单独提供(如果没囿可空出)_下列声明之后将提交给国际局(说明了声明的总体特性如"保藏物的保藏号")_仅用于接受机构仅用于国际局口该页连同国际申请一起收到口国际局在2006年12月23日收到此页授权官员授权官员威姆尔佩特PT/RO/134表(1998年7月；2004年1月重印)1与保藏的微生物或其它生物材料有关的声明_(PT细则第13条之2)_<table>tableseeoriginaldoumentpage116</olumn></row><table>PT/RO/134表(1998姩7月；2004年1月重印)与保藏的孩炎生物或其它生物材料有关的声明_(PT细则第13条之2)_A.以下指示涉及说明书第39页第23行所指的保藏的^t生物或其它生物材料_B.保藏鉴定其它保藏物在另一页鉴定□保藏机构名称DSMZ—德意志微生物保藏中心_保藏单位地址(包括邮政编码和国家)德国，38124布劳恩斯切魏格马斯切尔奥德尔韦格lb_保藏曰保藏号2005年12月8曰_DSMA2755_.其它声明(如果没有可空出)此信息在另一页中续口申请人:利用了细则28(4)EP_D.声明适用的指定国(如果没有可空絀)_E.声明的单独提供(如果没有可空出)下列声明之后将提交给国际局(说明了声明的总体特性，如"保藏物的保藏号")_仅用于接受机构仅用于国际局ロ该页连同国际申请一起收到□国际局在2006年12月23日收到此页授权官员授权官员威姆尔佩特PT/RO/134表(1998年7月；2004年1月重印)117与保藏的微生物或其它生物材料囿关的声明_(PT细则第13条之2)_A.以下指示涉及说明书第40页第3行所指的保藏的微生物或其它生物材^_B.保藏鉴定_其它保藏物在另一页鉴定口_保藏机构名称DSMZ—德意志微生物保藏中心_保藏单位地址(包括邮政编码和国家)德国38124布劳恩斯切魏格，马斯切尔奥德尔韦格lb_保藏日保藏号2005年12月8日_DSMA2756_.其它声明(如果没有可空出)此信息在另一页中续□申请人:利用了细则28(4)EP_D.声明适用的指定国(如果没有可空出)_E.声明的单独提供(如果没有可空出)下列声明之后将提交给国际局(说明了声明的总体特性如"保藏物的保藏号")_仅用于接受机构仅用于国际局口该页连同国际申请一起收到□国际局在2006年12月23日收箌此页授权官员授权官员威姆尔佩特PT/RO/134表(1998年7月；2004年1月重印)权利要求1.包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，所述抗体在与淀粉状疍白单体肽特别是β-淀粉状蛋白单体肽，例如诸如Aβ单体肽1-39、1-40、1-41、1-42或1-43，但尤其是Aβ1-42单体肽共孵育后抑制Aβ单体聚集成高分子的聚合原纤维。2.根据权利要求1的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，与在緩冲液中孵育的分别的淀粉状蛋白肽单体(对照)相比较所述抗体对Ap单体聚集成高分子的聚合原纤维抑制了至少50%,特别地至少60%，特别地至少65%更特别地至少75%，甚至更特别地至少80%但尤其是至少85%-卯％，或者更多3.根据权利要求1或2的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，所述抗体以高达1:100的摩尔浓度比与淀粉状蛋白单体肽共孵育4.根据权利要求3的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，所述抗体在以1:30至1:100之间的摩尔浓度比与淀粉状蛋白单体肽共孵育後表现出它的聚集抑制特性。5.根据权利要求3或4的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体所述抗体在37。的温度与淀粉状蛋白單体肽共孵育48小时后表现出它的聚集抑制特性。6.根据权利要求5的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体所述抗体在以1:30至1:100之間的摩尔浓度比，特别是以1:100的摩尔浓度比与由淀粉状蛋白单体肽，特别是P-淀粉状蛋白单体肽例如，诸如A卩单体肽l-39、1-40、1-41、1-42或1-43,但尤其是Ap^2单體肽的聚集形成的预形成高分子聚合淀粉状蛋白原纤维或纤丝共孵育后能够使预形成的聚合原纤维或纤丝解聚至少35%，特别地至少40%更特別地至少50%，甚至特别地至少60%,但尤其是至少70%或更高7.根据权利要求1-6任一项所述的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，所述抗體的聚集抑制和解聚潜力分别通过密度梯度超速离心法接着通过在预先形成的梯度上的SDS-PAGE沉降分析法确定。8.根据权利要求1-6任一项所述的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体所述抗体的聚集抑制和解聚潜力分别通过硫代黄素T(Th-T)荧光测定法来确定。9.包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体所述抗体在与由淀粉状蛋白单体肽，特别是P-淀粉状蛋白单体肽例如，诸如A卩单体肽1-39、1-40、1-41、1-42或1-43但尤其是Ap,.42单体肽的聚集形成的预形成高分子聚合淀粉状蛋白原纤维或纤丝共孵育后，能够诱导p折叠构象向在分子内给定区域内的无规巻曲构象轉变这导致了以P折叠构象为代价的无规巻曲构象的增加以及预形成高分子聚合淀粉状蛋白原纤维或纤丝的改良的溶解。10.根据权利要求9的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体所述抗体能够诱导以p折叠构象为代价的无规巻曲构象的增加，当与在緩沖液中孵育的汾别的预形成淀粉状蛋白聚合原纤维或纤丝(对照)相比较时p折叠构象减少了至少30%，特别地至少35%以及更特别地至少40%及更多。11.根据权利要求9戓10所述的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体其中二级构象的转变发生在A(3蛋白的Val12环境中。12.根据权利要求6-11任一项所述的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体其中与预形成高分子聚合淀粉状蛋白原纤维或纤丝的共孵育是在37'的温度进行24小时。13.根据权利要求9-12任一项所述的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体其中抗体诱导二级结构转变的潜力通过固态NMR光谱学确定。14.包括任哬功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体所述抗体与淀粉状蛋白单体肽，特别是p-淀粉状蛋白单体肽例如，诸如AP单体肽1-39、1-40、1-41、1-42或1-43但尤其是单体肽共孵育后，抑制了AP单体聚集成高分子的聚合原纤维或纤丝并且此外，在与由淀粉状蛋白单体肽特别是p-淀粉状蛋白单体肽，例如诸如Ap单体肽l-39、1-40、1-41、1-42或1-43，但尤其是A^—42单体肽的聚集形成的预形成高分子聚合淀粉状蛋白原纤维或纤丝共孵育后能够解聚预形成的聚合原纤维或纤丝。15.根据权利要求14的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体其中与淀粉状蛋白单体肽和预形成高分子聚合淀粉状蛋白原纤维或纤丝的共孵育分别以高达1:100的摩尔浓度比进行。16.根据权利要求15的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体其中與淀粉状蛋白单体肽和预形成高分子聚合淀粉状蛋白原纤维或纤丝的共孵育分别以1:30至1:100之间的摩尔浓度比，特别地以1:100的摩尔浓度比进行17.根據权利要求14-16任一项所述的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，其中与淀粉状蛋白单体肽和预形成高分子聚合淀粉状蛋白原纖维或纤丝的共孵育在37"的温度分别进行48小时和24小时18.根据权利要求14-17任一项所述的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，所迷忼体能够使预形成的聚合原纤维或纤丝解聚至少10%特别地至少25%，更特别地至少35%甚至更特别地至少50%，但尤其至少60-70%或更多19.根据权利要求14-17任┅项所述的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，与在緩冲液中孵育的分别的淀粉状蛋白肽单体(对照)相比较所述抗体对淀粉状蛋白单体肽，特别是P-淀粉状蛋白单体肽例如，诸如A卩单体肽1-39、1-40、1-41、1-42或1-43但尤其是AJ^单体肽的聚集抑制:r至少50%，特别地至少65%,更特别地至少75%甚至更特别地至少80%，但尤其是至少85%-卯％,或者更多20.包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，所述抗体并入了根据权利要求1-5和14-19任一项所述的聚集抑制特性和根据权利要求6-8、12和14-19任一项所述的解聚特性以及根据权利要求9-13任一项所述的破坏P折叠的特性。21.包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体所述抗体通过靶向由氨基酸残基aan-aam限制的A卩多肽的表位区，直接且特异地结合至A卩纤维；其中所述aan-aam中嘚n是13至15之间的整数但尤其是14;并且m是22至24之间的整数，但尤其是23;其中n和m不能是相同的数字并且n必须总是比m小的数字n和m之间的差>2。22.根据前述任一权利要求的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体其识别淀粉状蛋白的天然构象，因为它特异地结合至淀粉状蛋白寡聚體和纤维而不是结合至非线性化的淀粉状蛋白种类。23.根据前述任一权利要求的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体所述忼体或片段以至少约lxlO"至至少约lxl(T8，特別地至少约1x10"至至少约1xl(T7更特别地至少约1x10-7至至少约1xl(T8，甚至更特别地至少约lxl(T至至少约4xlO^的结合亲和力结合到Ap单體但是优选地不显示出任何显著的与淀粉状蛋白前体蛋白(APP)的交叉反应性。24.根据前述任一项权利要求的包括任何功能等效抗体或其功能部汾的单克隆抗体其中抗体或片段以至少约1x10-7至至少约1xl(T9，特别地至少约lxlO^至至少约lxl(T8更特别地至少约lxl(^至至少约lx10—9，甚至更特别地至少约lxlO-s至至少約5xlO-s的结合亲和力结合到Ap纤维、原纤维或纤丝但是优选地不显示出任何显著的与淀粉状蛋白前体蛋白(APP)的交叉反应性。25.根据前述任一项权利偠求的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体所述抗体或片段表现出比与AP单体的结合亲和力高至少5倍，特别地高至少10倍更特别地高至少15倍的与AP纤维、原纤维或纤丝的结合亲和力。26.包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体所迷抗体并入了至少一种根據权利要求1至25任一项所述的特性，即聚集抑制、解聚、诱导构象转变、识别并直接结合至Ap多肽的表位区但尤其是所述特性的两种或以上嘚组合。27.根据前述任一项权利要求的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体所述抗体对A^42单体肽表现出高特异性，但对APw8、APw9、A卩l40囷/或APl41单体肽显示出实质上没有交叉反应性28.根据权利要求27的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，所述抗体对淀粉状蛋白肽A卩l42比对APw8、A卩l39、A卩l40、AP^41更敏感高达100倍特别地50至100倍，更特别地80至100倍但尤其是100倍，并且能够在体外和体内抑制形成淀粉状蛋白的单体肽的聚集29.根据权利要求27或28的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，所述抗体具有对淀粉状蛋白肽A^-42的高结合敏感性并且能够检测高達0.01fig的浓度，但特别地在0.5ng至0.01jig之间更特别地在O.l照至O.Olng之间的浓度范围，但尤其是O.Oljig浓度的Apt"纤维30.根据前述权利要求任一项所述的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，所述抗体能够降低患有导致脑中可溶Ap浓度增加的疾病或病症的动物特别是哺乳动物，但尤其是人类嘚脑中可溶Ap的总量31.根据前述权利要求任一项所述的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，所述抗体能够破坏斑块因此减尐患有导致脑中斑块负荷增加的疾病或病症的动物，特别是哺乳动物但尤其是人类的脑中的斑块负荷。32.根据权利要求31的包括任何功能等效抗体或其功能部分的抗体所述抗体使脑中斑块负荷降低了至少20%,特别地至少25%，更特别地至少30%甚至更特别地30%以上。33.根据权利要求31的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆所述抗体能够溶解斑块，导致患有导致脑中斑块负荷增加的疾病或病症的动物特别是哺乳动粅，但尤其是人类的脑中斑块量的减少34.根据权利要求31的包括任何功能等效抗体或其功能部分的抗体，所述抗体使脑中斑块量减少了至少10%特别地至少15%，更特别地至少20%35.包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，所述抗体并入了选自下列特性中的至少一种特性聚集抑制、解聚、诱导构象转变、识别并直接结合到表位特别是在14-23，特别是在14-20区域的构象不连续表位、预防或减緩淀粉状蛋白斑的形成、减尐脑中可溶的AP总量、降低脑中斑块负荷、减少脑中斑块量、保持或提高认知记忆能力但尤其是所述特性的两种或以上的组合。36.根据权利偠求35的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体所述抗体并入了至少2种、特别地至少3种、更特别地至少4种、甚至更特别地至少5、6、7或8种，但尤其是所有上面提到的特性37.包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，所述抗体识别并结合至p-淀粉状蛋白上的至尐一个独特的结合部位特别是至少两个独特的结合部位，其中所述的至少一个或所述的至少两个独特的结合部位分别包含主要参与抗体結合的至少一个氨基酸残基和至少两个连续的氨基酸残基其中在本发明特定的实施方案中，构成第一个独特结合部位的至少一个残基是插在以下核心序列中的Leu并且构成第二个独特结合部位的至少两个连续的氨基酸残基是插在以下核心序列中的-Phe-Phe-:Xaaj一Xa狂2画Xaa3-Leu-Xaa4画Phe-Phe-Xaa5—Xaae-Xaa7-其中Xaai是选自His、Asn、Gln、Lys和Arg的氮基酸残基；Xaa2是选自Asn和Gin的氨基酸残基；Xaa3是选自Lys、His、Asn、Gln和Arg的氨基酸残基；Xaa4是选自Ala、Val、Leu、正亮氨酸、Met、Phe和Ile的氨基酸残基；Xaas是选自Ala、Val、Leu、Ser囷lie的氨基酸残基；Xaa6是选自Glu和Asp的氨基酸残基；Xaa7是选自Glu和Asp的氨基酸残基。38.包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体所述抗体识别并結合至P-淀粉状蛋白上的至少一个独特的结合部位，特别地至少两个独特的结合部位更特别地至少三个独特的结合部位，其中所述的独特嘚结合部位分别包含至少一个和至少两个连续的主要参与抗体结合的氨基酸残基其中被至少一个不参与抗体结合或与主要参与抗体结合嘚氨基酸残勤目比参与抗体结合程度显著较小的氨基酸残基隔开的至少一个和至少两个连续的氨基酸分别是插在以下核心序列中的-His-和-Lys-Leu-:-His國Xaa2-Lys-LeuXaa3-Xaa4-Xaa5—Xaa6—Xaa7-Xaag画其中Xaa2是选自Asn和Gin的氣基酸残基；Xaa3是选自Ala、Val、Leu、正亮氨酸、Met、Phe和lie的#^酸残基；Xaa4是选自Ala、Val、Leu、正亮氨酸、Met、Phe和lie的氨基酸残基；Xaas是选自Ala、Val、Leu、正煷氨酸、Met、Phe和lie的氨基酸残基；Xaa6是选自Ala、Val、Leu、Ser和lie的氨基酸残基；Xaa7是选自Glu和Asp的氨基酸残基；Xaa8是选自Glu和Asp的氨基酸残基；且其中所述的氨基酸残基Xaa2、Xaa3、Xaa6、Xaa7、Xaa8不参与抗体结合或与-His-和-Lys-Leu-结合部位相比参与抗体结合程度显著较小。39.包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体所述抗体識别并结合至P-淀粉状蛋白上的至少一个独特的结合部位，特别地至少两个独特的结合部位更特别地至少三个独特的结合部位，其中所述嘚独特的结合部位分别包含至少一个和至少两个连续的主要参与抗体结合的氨基酸残基其中代表第一个结合部位的至少两个连续的氨基酸残基是插在以下核心序列中的-Phe-Phe-以及至少一个氨基酸残基是插在以下核心序列中的画His画誦Xaai陽His-Xaa3-Xaa4隱Xaas—Xaa6國Phe■Phe■Xaa7-Xaas■Xaa9■其中，Xaat是选自His、Asn、Gln、Lys和Arg的氨基酸残基；Xaa3是选自Asn和Gin的氨基酸残基；Xaa4是选自His、Asn、Gln、Lys和Arg的氨基酸残基；Xaas是选自Ala、Val、Leu、Ser和lie的氨基酸残基；Xaa6是选自Ala、Val、Leu和lie的氨基酸残基；Xaa7是选自Ala、Val、Leu和lie的氨基酸残基；Xaa8是选自Glu和Asp的氨基酸残基；Xaa9是选自Glu和Asp的氨基酸残基；且其中所述的氨基酸残基Xaa"Xaa3、Xaa6、Xaa7、Xaas和Xaa9不参与抗体结合或与His和-Phe-Phe-结合部位楿比参与抗体结合程度显著较小40.包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，所述抗体识别并结合至p-淀粉状蛋白上的至少一个独特的结合部位特别地至少两个独特的结合部位，更特别地至少三个独特的结合部位其中所述的独特的结合部位分别包含至少一个和至尐两个连续的主要参与抗体结合的氨基酸残基，其中第一种至少两个连续的主要参与抗体结合的氨基酸残基是插在以下核心序列中的-Lys-和-Leu-苴第二种至少两个连续的氨基酸残基是插在以下核心序列中的-Phe-Phe-:Xaai曙Xaa2-Lys-Leu隱Xaa4-Phe-Phe-Xaa5--Xaa7-其中Xaa!是选自His、Asn、Gln、Lys和Arg的氨基酸残基；Xaa2是选自Asn和Gin的氨基酸残基；Xaa4是选自Ala、Val、Leu、正亮氨酸、Met、Phe和Ile的氨基酸残基；Xaas是选自Ala、Val、Leu、Ser和lie的氨基酸残基；Xaa6是选自Glu和Asp的氨基酸残基；Xaa是选自Glu和Asp的氨基酸残基；且其中所述的氨基酸残基Xaa2、Xaa3、Xaa4、Xaa5、Xaa《和Xaa7不参与抗体结合或与Lys-Leu和-Phe-Phe-结合部位相比参与抗体结合程度显著较小。41.包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体所述抗体识别并结合至p-淀粉状蛋白上的至少一个独特的结合部位，特别地至少两个独特的结合部位更特别地至少三个独特的结合部位，其中所述的独特的结合部位分别包含至少一个和至少两个连续的主要参与抗体结合的氨基酸残基其中第一种至少两个连续的主要参与忼体结合的氨基酸残基是插在以下核心序列中的-Lys-Leu-,且第二种至少两个连续的氨基酸残基是插在以下核心序列中的-Phe-Phe-;且第三种至少一个氨基酸残基是插在以下核心序列中的-His-:-His-Xaa2-Lys國Leu-Xaa4-Phe-Phe-Xaa5-Xaa6-Xaa7其中，Xaa2是选自Asn和Gin的氨基酸残基；Xaa4是选自Ala、Val、Leu、正亮氨酸、Met、Phe和He的氨基酸残基；Xaas是选自Ala、Val、Leu、Ser和lie的氨基酸残基；Xaa6是选自Glu和Asp的氨基酸残基；Xaa7是选自Glu和Asp的氨基酸残基；且其中所述的氨基酸残基Xaa2、Xaa3、Xaa4、Xaa5、Xaa6和Xaa不参与抗体结合或与-His-、-Lys-Leu和-Phe-Phe-结合部位相比参与抗体結合程度显著较小42.包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，所述抗体识别并结合至P-淀粉状蛋白上的至少一个独特的结合部位特别地至少两个独特的结合部位，更特别地至少三个独特的结合部位其中所述的独特的结合部位分别包含至少一个和至少两个连续的主要参与抗体结合的氨基酸残基，其中第一种至少两个连续的主要参与抗体结合的氨基酸残基是插在以下核心序列中的-Lys-Leu-,且笫二种至少两个連续的氨基酸残基是插在以下核心序列中的-Phe-Phe-;且笫三种至少一个氨基酸残基是插在以下核心序列中的-Asp-:■Xaat曙Xaa2-Lys—Leu-Xaa4-Phe-Phe-Xaa5—Xaa6-Asp.-其中Xaa!是选自His、Asn、Gln、Lys和Arg的氨基酸残基；Xaa2是选自Asn和Gin的氨基酸残基；Xaa4是选自Ala、Val、Leu、正亮氨酸、Met、Phe和lie的氨基酸残基；Xaas是选自Ala、Val、Leu、Ser和lie的氨基酸残基；Xaa6是选自Glu和Asp的氨基酸残基；苴其中所述的氨基酸残基Xaa2、Xaa3、Xaa4、Xaa5、Xaa6和Xaa不参与抗体结合或与-Asp-、-Lys-Leu和-Phe-Phe-结合部位相比参与抗体结合程度显著较小。43.包括任何功能等效抗体或其功能蔀分的单克隆抗体所述抗体结合至P-淀粉状蛋白上的4个独特的结合部位，其中所述的4个独特的结合部位分别包含一个氨基酸残基和两个连續的氨基酸残基所述残基主要参与抗体结合，其中所述的4个独特的结合部位在抗原上彼此密切接近地定位分别被至少一个不参与抗体結合或与4个独特的结合部位的所述的一个氨基酸残基及所述的两个连续的氨基酸残基相比参与抗体结合程度显著较小的氨基酸残基隔开，從而形成构象不连续的表位44.根据权利要求43的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，其中第一种两个连续的主要参与抗体结匼的氨基酸残基是插在以下核心序列中的-Lys-Leu-且第二种至少两个连续的氨基酸残基是插在以下核心序列中的-Phe-Phe-;第一种单氨基酸残基是插在以下核心序列中的-His-且第二种单氨基酸残基是插在以下核心序列中的-Asp-:曙His-Xaa2-Lys-Leu-Xaa4一Phe-Phe-Xaa5-Xaa6-Asp-其中，Xaa2是选自Asn和Gin的氨基酸残基；Xaa4是选自Ala、Val、Leu、正亮氨酸、Met、Phe和lie的氨基酸殘基；Xaas是选自Ala、Val、Leu、Ser和lie的氨基酸残基；Xaa6是选自Glu和Asp的氨基酸残基；且其中所述的氨基酸残基Xaa2、Xaa3、Xaa4、Xaa5、Xaa6、Xaa7不参与抗体结合或与-His-、-Asp-、-Lys-Leu和-Phe-Phe-结合部位楿比参与抗体结合程度显著较小45.根据权利要求37-44任一项所述的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，其中所述的主要参与P-淀粉状蛋白结合的连续氨基酸残基特别是在位置16和17的-Lys-Leu-和在位置19和20的-Phe-Phe-，,皮嵌入到以下核心序列内Val-His-His—Gln-Lys—Leu-Val-Phe~Phe~Ala-Glu-Asp46.根据权利要求1-36任一项所述的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体所述抗体识别并结合至权利要求37至45任一项定义的构象不连续的表位。47.包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体其包含SEQIDNO:7的轻链可变区(LVR)。48.包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体其包含SEQIDNO:8的重链可变区(HVR)。49.包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体其包含SEQIDNO:8的重链可变区(HVR)和SEQIDNO:7的轻链可变区(LVR)这两者。50.包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体其包含轻链可变区(LVR)或重链可变区(HVR)或轻链可变区(LVR)和重链可变区(HVR)这两者，轻链可变区(LVR)和重链可变区(HVR)分别与SEQIDNO:7和8提供的任一肽同源51.根据权利要求50嘚包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，其中轻链可变区(LVR)具有与SEQIDNO:7给出的序列90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一的氨基酸序列52.根据权利要求50的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，其中重链可变区(HVR)具有与SEQIDNO:8给出的序列90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一的氨基酸序列53.根据权利要求50的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，其中轻链可变区(LVR)和重链可变区(HVR)—起具有与SEQIDNO:7和8给出的序列85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96°/、97%、98%或99%同一的氨基紗列。54.根据权利要求47-53任一项所述的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体所述抗体识别并結合至权利要求37至45任一项定义的构象不连续的表位，并表现出根据权利要求l-36任一项所述的抗体的特异特性55.包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，所述抗体具有由分别于2005年12月1日和2005年12月9日以DSMA2752保藏的杂交瘤细胞系FP12H3产生的抗体的特征性特性56.包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，所述抗体具有由分别于2005年12月1日和2005年12月9日以DSMA2750保藏的杂交瘤细胞系FP12H3-2产生的抗体的特征性特性57.包括任何功能等效抗體或其功能部分的单克隆抗体，所述抗体具有由分别于2005年12月1日和2005年12月9日以DSMA2751保藏的杂交瘤细胞系FP12H3-G2产生的抗体的特征性特性58.包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，所述抗体具有由2005年12月8日以DSMA2755保藏的杂交瘤细胞系ET7E3产生的抗体的特征性特性59.包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，所述抗体具有由2005年12月8日以DSMA2756保藏的杂交瘤细胞系EJ7H3产生的抗体的特征性特性60.由分别于2005年12月1日和2005年12月9日以DSMA2752保藏的杂交瘤细胞系FP12H3产生的单克隆抗体，所述单克隆抗体包括任何功能等效抗体或其功能部分61.由分别于2005年12月1日和2005年12月9日以DSMA2750保藏的杂交瘤细胞系FP12H3-2产生嘚单克隆抗体，所述单克隆抗体包括任何功能等效抗体或其功能部分62.由分别于2005年12月1日和2005年12月9日以DSMA2751保藏的杂交瘤细胞系FP12H3-G2产生的单克隆抗体，所述单克隆抗体包括任何功能等效抗体或其功能部分63.由2005年12月8日以DSMA2755保藏的杂交瘤细胞系ET7E3产生的单克隆抗体，所述单克隆抗体包括任何功能等效抗体或其功能部分64.由2005年12月8日以DSMA2756保藏的杂交瘤细胞系EJ7H3产生的单克隆抗体，所述单克隆抗体包括任何功能等效抗体或其功能部分65.包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，所述抗体对抗超分子抗原构建体而产生所述超分子抗原构建体包含与P-淀粉状蛋白肽，特别是p-淀粉状蛋白肽Apws、APl16和A卩w6(A14)的氨基酸序列相对应的抗原肽所述抗原肽用疏水部分，例如诸如棕榈酸，或亲水部分例如，诸如聚乙二醇(PEG)或两者的组合进行修饰，其中所述疏水和亲水部分分别通过氨基酸例如，诸如赖氨酸或任何其它的能够用作连接分子的合适的氨基酸或氨基酸类似物而共价地连接到每一末端66.包含编码包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体的核苷酸序列的多核苷酸，其包含a)至少SEQIDNO:9的轻链可变区的核苷酸序列；b)由于遗传密码子的简并性在密码子序列上与(a)的核苷酸序列不同的核苷酸序列；)具有(a)和(b)的互补序列的核苷酸序列；或d)(a)、(b)或()的核苷酸序列的片段其包含选自以下的连续核苷酸段至少20个连续的核苷酸、至少25个连续的核苷酸、至少30个连续的核苷酸、至少35个连续的核苷酸、至少40个连续的核苷酸、至少45个连续的核苷酸和至少50个连续的核苷酸。67.包含编码包括任何功能等效抗体或其功能蔀分的单克隆抗体的核苷酸序列的多核苷酸其包含a)至少SEQIDNO:10的轻链的核苷^列；b)由于遗传密码子的筒并性在密码子序列上与(a)的核苷酸序列不同嘚核苷酸序列；)具有(a)和(b)的互补序列的核苷酸序列；或d)(a)、(b)或()的核苷酸序列的片段，其包含选自以下的连续核苷酸段至少20个连续的核苷酸、至尐25个连续的核苷酸、至少30个连续的核苷酸、至少35个连续的核苷酸、至少40个连续的核苷酸、至少45个连续的核苷酸和至少50个连续的核苷酸68.包含编码包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体的核苷酸序列的多核苷酸，其包含a)至少SEQIDNO:11的重链可变区的核苷酸序列；b)由于遗传密碼子的简并性在密码子序列上与(a)的核苷酸序列不同的核苷酸序列；)具有(a)和(b)的互补序列的核苷酸序列；或d)(a)、(b)或()的核苷酸序列的片段其包含選自以下的连续核苦酸段至少20个连续的核苷酸、至少25个连续的核苷酸、至少30个连续的核苷酸、至少35个连续的核苷酸、至少40个连续的核苷酸、至少45个连续的核苷酸和至少50个连续的核苷酸。69.包含编码包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体的核苷^列的多核苷酸其包含a)臸少SEQIDNO:12的重链的核苷酸序列；b)由于遗传密码子的简并性在密码子序列上与(a)的核苷酸序列不同的核苷酸序列；)具有(a)和(b)的互补序列的核苷酸序列；或d)(a)、(b)或()的核苷酸序列的片段，其包含选自以下的连续核苷酸段至少20个连续的核苷酸、至少25个连续的核苷酸、至少30个连续的核苷酸、至少35個连续的核苷酸、至少40个连续的核苷酸、至少45个连续的核苷酸和至少50个连续的核苷酸70.包含与权利要求66-69任一项所述的核苷酸序列杂交的核苷,列的多核苷酸。71.根据权利要求70的多核苷酸其中所述的核苷酸序列在常规杂交条件下，特别地在严格杂交条件下杂交至根据权利要求66-69任一项所述的核苷酸序列。72.SEQIDNO:7的轻链可变区(LVR)73.SEQIDNO:8的重链可变区(HVR)。74.编码SEQIDNO:7的轻链可变区(LVR)的多核苷酸75.编码SEQIDNO:8的重链可变区(HVR)的多核苷酸。76.组合物其包含治疗有效量的根据权利要求1至65任一项所述的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体。77.根据权利要求76的组合物其是任选地还包含可药用载体的药物组合物。78.根据权利要求77的组合物其包含治疗有效量的单克隆抗体。79.根据权利要求76至78任一项所述的组合物用于治療由淀粉状蛋白或淀粉状蛋白样蛋白引起的或与其相关的疾病和病症，所述疾病和病症包括淀粉样变性这是一组与淀粉状蛋白或淀粉状疍白样蛋白诸如与阿尔茨海默病有关的Ap蛋白相关的疾病和病症。80.混合物其包含治疗有效量的根据权利要求1至65任一项所述的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，以及任选地还包含其它的生物活性物质和/或可药用载体和/或稀释剂和/或赋形剂81.根据权利要求79的混匼物，其中其它的生物活性物质是用于治疗物所述疾病和病症包括淀粉样变性，这是一组与淀粉状蛋白或淀粉状蛋白样蛋白诸如与阿尔茨海默病有关的Ap蛋白相关的疾病和病症82.根据权利要求80或81的混合物，除了根据权利要求1至65任一项所述的包括任何功能等效抗体或其功能部汾的单克隆抗体之外还包含选自下列的化合物的至少一种抗氧化应激的化合物、抗细胞凋亡的化合物、金属螯合剂、DNA修复抑制剂诸如哌侖西平和代谢产物、3-氨基-1-丙磺酸(3APS)、1，3-丙二磺酸(l3PDS)、分泌酶活化剂、p-和，分泌酶抑制剂、t蛋白、神经递质、p折叠破坏剂、消炎分子、或胆碱酯酶抑制剂(hEI)诸如他克林、卡巴拉汀、多奈哌齐、和/或加兰他敏和其它药物和营养补充剂，与根据本发明的抗体一起以及任选的可药用載体和/或稀释剂和/或赋形剂。83.根据权利要求82的混合物其中化合物是胆碱酯酶抑制剂(hEI)。84.根据权利要求82的混合物其中化合物选自他克林、鉲巴拉汀、多奈哌齐、加兰他敏、烟酸、美金刚胺。85.根据权利要求80至84任一项所述的混合物其包含治疗有效量的单克隆抗体和/或生物活性粅质。86.产生根据权利要求1至65任一项所述的包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体的方法所述方法包括在合适的宿主生物体中產生抗超分子抗原构建体的抗体，但特别是单克隆抗体所述超分子抗原构建体包含与P-淀粉状蛋白肽，特别是P-淀粉状蛋白肽APws、APw6和Ah-16(A14)的氨基酸序列相对应的抗原肽所述抗原肽用疏水部分，例如诸如棕榈酸，或亲水部分例如，诸如聚乙二醇(PEG)或两者的组合进行修饰，其中所述疏水和亲水部分分别通过氨基酸例如，诸如赖氨酸或任何其它的能够用作连接分子的合适的氨基酸或氨基酸类似物而共价地连接到每┅末端；以及分离抗体87.根据权利要求1至65任一项所述的单克隆抗体和/或其功能部分和/或根据权利要求76至79任一项所述的药物组合物、或根据權利要求80至85任一项所述的混合物在制备治疗或减轻疾病和病症的效应的药物中的用途，其中所述疾病和病症由淀粉状蛋白或淀粉状蛋白样疍白引起或与其相关包括淀粉样变性，这是一组与淀粉状蛋白斑的形成相关的疾病和病症包括继发性淀粉样变性和年龄相关性淀粉样變性，诸如以下疾病包括但不限于神经疾病诸如阿尔茨海默病(AD)，以及以认知记忆能力丧失为特征的疾病或病症例如，诸如轻度认知损害(MI)、路易体痴呆、唐氏综合征、遗传性脑出血伴淀粉样变性(荷兰型)、关岛帕金森-痴呆综合征；以及其它基于淀粉状蛋白样蛋白或与其相关嘚疾病诸如进行性核上性麻痹、多发性硬化、克-雅二氏病、帕金森氏病、HIV-相关痴呆、ALS(肌萎缩性侧索硬化症)、包涵体肌炎(IBM)、成年发病型糖尿病、老年性心脏淀粉样变性、内分泌肿瘤，以及其它疾病包括黄斑变性。88.应用根据权利要求1至65任一项所述的单克隆抗体和/或其功能部汾制备根据权利要求76至79任一项所述的药物组合物、或根据权利要求80至85任一项所述的混合物的方法用于治疗或减轻由淀粉状蛋白或淀粉状疍白样蛋白引起的或与其相关的疾病和病症的影响，所述疾病和病症包括淀粉样变性这是一组与淀粉状蛋白斑的形成相关的疾病和病症，包括继发性淀粉样变性和年龄相关性淀粉样变性诸如以下疾病，包括但不限于神经疾病诸如阿尔茨海默病(AD),以及以认知记忆能力丧失为特征的疾病或病症例如，诸如轻度认知损害(MI)、路易体痴呆、唐氏综合征、遗传性脑出血伴淀粉样变性(荷兰型)、关岛帕金森-痴呆综合征；鉯及其它基于淀粉状蛋白样蛋白或与其相关的疾病诸如进行性核上性麻痹、多发性硬化、克-雅二氏病、帕金森氏病、HIV-相关痴呆、ALS(肌萎缩性侧索硬化症)、包涵体肌炎(IBM)、成年发病型糖尿病、老年性心脏淀粉样变性、内分泌肿瘤，以及其它疾病包括黄斑变性。89.应用根据权利要求1至65任一项所述的单克隆抗体和/或其功能部分或功能等效抗体、根据权利要求76至79任一项所述的药物组合物、或根据权利要求80至85任一项所述嘚混合物制备用于预防或治疗或减轻的药物的方法所述疾病和病症包括淀粉样变性，这是一组与淀粉状蛋白斑的形成相关的疾病和病症包括继发性淀粉样变性和年龄相关性淀粉样变性，诸如以下疾病包括但不限于神经疾病诸如阿尔茨海默病(AD)，以及以认知记忆能力丧失為特征的疾病或病症例如，诸如轻度认知损害(MI)、路易体痴呆、唐氏综合征、遗传性脑出血伴淀粉样变性(荷兰型)、关岛帕金森-痴呆综合征；以及其它基于淀粉状蛋白样蛋白或与其相关的疾病诸如进行性核上性麻痹、多发性硬化、克-雅二氏病、帕金森氏病、HIV-相关痴呆、ALS(肌萎縮性侧索硬化症)、包涵体肌炎(IBM)、成年发病型糖尿病、老年性心脏淀粉样变性、内分泌肿瘤，以及其它疾病包括黄斑变性。90.应用根据权利偠求1至65任一项所述的单克隆抗体和/或其功能部分或功能等效抗体制备根据权利要求76至79任一项所述的药物组合物的方法包括以药学可接受嘚形式制剂所述抗体。91.根据权利要求卯的方法其中抗体以治疗有效量包含于组合物中。92.减少患有导致脑中斑块负荷增加的疾病或病症的動物特别是哺乳动物，但尤其是人类的脑中斑块负荷的方法包括给需要该治疗的动物、特别是哺乳动物、更特别是人类施与治疗有效量的根据权利要求1至65任一项所述的单克隆抗体，或根据权利要求76至79任一项所述的组合物或根据权利要求80至85任一项所述的混合物。93.根据权利要求92的方法其中脑中斑块负荷减少了至少20%，特别地至少25%,更特别地至少30%甚至更特别地30%以上。94.减少患有导致脑中斑块负荷增加的疾病或疒症的动物特别是哺乳动物，但尤其是人类的脑中斑块量的方法包括给需要该治疗的动物、特别是哺乳动物、更特别是人类施与治疗囿效量的根据权利要求1至65任一项所述的单克隆抗体，或根据权利要求76至79任一项所述的组合物或根据权利要求別至85任一项所述的混合物。95.根据4又利要求94的方法其中脑中的斑块量减少了至少10%，特别地至少15%更特别地至少20%。96.降低患有导致脑中可溶解的AP浓度增加的疾病或病症的動物特别是哺乳动物，但尤其是人类的脑中可溶解的Ap总量的方法包括给需要该治疗的动物、特别是哺乳动物、更特别是人类施与治疗囿效量的根据权利要求1至65任一项所述的单克隆抗体，或根据权利要求76至79任一项所述的组合物或根据权利要求80至85任一项所述的混合物。97.通過施与抗体但特别是单克隆抗体或包含根据权利要求1至39任一项所述抗体的组合物或混合物给受到疾病影响的动物或人类来预防、病症的效应的方法，其中所述疾病和病症包括淀粉样变性这是一组与淀粉状蛋白斑的形成相关的疾病和病症，包括继发性淀粉样变性和年龄相關性淀粉样变性诸如以下疾病，包括但不限于神经疾病诸如阿尔茨海默病(AD)包括以认知记忆能力丧失为特征的疾病或病症，例如诸如輕度认知损害(MI)、路易体痴呆、唐氏综合征、遗传性脑出血伴淀粉样变性(荷兰型)、关岛帕金森-痴呆综合征；以及其它基于淀粉状蛋白样蛋白戓与其相关的疾病，诸如进行性核上性麻痹、多发性硬化、克-雅二氏病、帕金森氏病、HIV-相关痴呆、ALS(肌萎缩性侧索硬化症)、包涵体肌炎(IBM)、成姩发病型糖尿病、老年性心脏淀粉样变性、内分泌胂瘤以及其它疾病，包括黄斑变性；所述方法包括给需要该治疗的动物、特别是哺乳動物、更特别是人类施与治疗有效量的根据权利要求1至65任一项所述的单克隆抗体或根据权利要求76至79任一项所述的组合物，或根据权利要求80至85任一项所述的混合物记忆能力的方法，包括给需要该治疗的动物、特别是哺乳动物、更特别是人类施与治疗有效量的根据权利要求1臸65任一项所述的单克隆抗体或98.根据权利要求76至79任一项所述的组合物，或根据权利要求80至85任一项所述的混合物99.根据权利要求98的方法，其Φ单克隆抗体或包含单克隆抗体的组合物以治疗有效量施与100.杂交瘤细胞系，特征在于其产生根据权利要求1-65任一项所述的单克隆抗体101.杂茭瘤细胞系，特征在于其产生包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体所述抗体具有由2005年12月1日以DSMA2752保藏的杂交瘤细胞系FP12H3产生的抗體的特征性特性。102.杂交瘤细胞系特征在于其产生包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体，所述抗体具有由2005年12月1日以DSMA2750保藏的杂茭瘤细胞系FP12H3-2产生的抗体的特征性特性103.杂交瘤细胞系，特征在于其产生包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆抗体所述抗体具有甴2005年12月1日以DSMA2751保藏的杂交瘤细胞系FP12H3-G2产生的抗体的特征性特性。104.杂交瘤细胞系特征在于其产生包括任何功能等效抗体或其功能部分的单克隆忼体，所述抗体具有由2005年12月8日以DSMA2755保藏的杂交瘤细胞系ET7E3产生的抗体的特征性特性105.杂交瘤细胞系，特征在于其产生包括任何功能等效抗体或其功能部分的'单克隆抗体所述抗体具有由2005年12月8日以DSMA2756保藏的杂交瘤细胞系EJ7H3产生的抗体的特征性特性。106.杂交瘤细胞系2005年12月1日以DSMA2752保藏的杂交瘤细胞系FP12H3。107.杂交瘤细胞系2005年12月1日以DSMA2750保藏的杂交瘤细胞系FP12H3-2。108.杂交瘤细胞系2005年12月1日以DSMA2751保藏的杂交瘤细胞系FP12H3-G2。109.杂交瘤细胞系2005年12月8日以DSMA2755保藏嘚杂交瘤细胞系ET7E3。110.杂交瘤细胞系2005年12月8日以DSMA2756保藏的杂交瘤细胞系EJ7H3。111.在患者中诊断淀粉状蛋白相关疾病或病症的方法包括检测单克隆抗体戓其活性片段对样本中或原位的淀粉状蛋白表位的免疫特异性结合，所述方法包括以下步骤a)使怀疑含有淀粉状蛋白抗原的样本或特定身体蔀分或身体区域与根据本发明和在上文中描述的抗体接触所述抗体结合淀粉状蛋白表位；b)允许抗体结合至淀粉状蛋白抗原以形成免疫复匼物；)检测免疫复合物的形成；以及d)将免疫复合物的存在或不存在与样本或特定身体部分或区域中淀粉状蛋白抗原的存在或不存在相关联。112.确定组织中产生淀粉状蛋白的斑块负荷的程度的方法包括(a)获得代表所研究的组织的样本；(b)用根据权利要求1-65任一项所述的抗体测试所述樣本中淀粉状蛋白抗原的存在；()确定结合到抗原的抗体的量；以及(d)计算组织中的斑块负荷。113.根据权利要求112的方法其中确定在步骤)中的免疫复合物的形成，从而使免疫复合物的存在或不存在与淀粉状蛋白抗原的存在或不存在相关联114.在患者中诊断对淀粉状蛋白相关疾病或病症的素质的方法，包特^性结合其包t以下步骤J、"、、、'(a)使怀疑含有淀粉状蛋白抗原的样本或特定身体部分或身体区域与根据本发明和在上攵中描述的抗体接触，所述抗体结合淀粉状蛋白表位；(b)允许抗体结合至淀粉状蛋白抗原以形成免疫复合物；()检测免疫复合物的形成；以及(d)將免疫复合物的存在或不存在与样本或特定身体部分或区域中淀粉状蛋白抗原的存在或不存在相关联(e)将所述免疫复合物的量与正常对照徝相比较，其中所述聚集体的量与正常对照值相比的增加表明所述的患者患有或有发展成淀粉状蛋白相关疾病或病症的风险115.监测用根据湔述任一项权利要求的抗体或疫苗组合物治疗后的患者的微小残留疾病的方法，其中所述方法包括(a)使怀疑含有淀粉状蛋白抗原的样本或特萣身体部分或身体区域与根据本发明和在上文中描述的抗体接触所述抗体结合淀粉状蛋白表位；(b)允许抗体结合至淀粉状蛋白抗原以形成免疫复合物；()检测免疫复合物的形成；以及(d)将免疫复合物的存在或不存在与样本或特定身体部分或区域中淀粉状蛋白抗原的存在或不存在楿关联；(e)将所述免疫复合物的量与正常对照值比较，其中所述聚集体的量与正常对照值相比的增加表明所述患者仍然患有微小残留疾病116.預测用根据前述任一项权利要求的抗体或疫苗组合物治疗的患者的反应性的方法，包括(a)使怀疑含有淀粉状蛋白抗原的样本或特定身体部分戓身体区域与根据本发明和在上文中描述的抗体接触所述抗体结合淀粉状蛋白表位；(b)允许抗体结合至淀粉状蛋白抗原以形成免疫复合物；()检测免疫复合物的形成；以及(d)将免疫复合物的存在或不存在与样本或特定身体部分或区域中淀粉状蛋白抗原的存在或不存在相关联；(e)比較治疗开始前和治疗开始后的所述免疫复合物的量，其中所述聚集体的量的减少表明所述患者具有对治疗产生反应的高潜力117.用于检测和診断淀粉状蛋白相关疾病和病症的测试试剂盒，包含根据权利要求1-65任一项所述的抗体118.根据权利要求114的测试试剂盒，包含容纳一种或多种根据本发明的抗体的容器以及使用抗体用于结合淀粉状蛋白抗原以形成免疫复合物，以及检测免疫复合物的形成从而使免疫复合物的存在或不存在与淀粉状蛋白抗原存在或不存在相关联的说明书。全文摘要本发明涉及用于治疗由淀粉状蛋白或淀粉状蛋白样蛋白引起的或與其相关的疾病和病症的治疗和诊断的方法和组合物所述疾病和病症包括淀粉样变性，这是一组与淀粉状蛋白质相关的疾病和异常诸洳阿尔茨海默病。本发明提供包含了高特异性和高效抗体的新的方法和组合物所述抗体具有特异性识别并结合至一系列β淀粉状蛋白的特异表位的能力。通过本发明的教导而可得到的抗体对于治疗由淀粉状蛋白或淀粉状蛋白样蛋白引起的或与其相关的疾病和病症特别有用，所述疾病和病症包括淀粉样变性这是一组与淀粉状蛋白斑的形成相关的疾病和病症，包括继发性淀粉样变性和年龄相关的淀粉样变性包括但不限于神经疾病诸如阿尔茨海默病(AD)。文档编号A61K39/395GKSQ公开日2008年12月17日申请日期2006年12月8日优先权日2005年12月12日发明者A·普法伊费尔,A·穆斯,·尼古劳,D·希克曼,R·格里佛拉特申请人:A免疫有限公司