(河南农业大学生物工程学院郑州450002)
河南农业科学 2000年第10期
研究了培养基组成、pH值、粘度、摇瓶装液量和添加有机氮对平菇P831液体菌种发酵生产的影响。结果表明选用麸皮培养基可获得较高的菌球数和菌丝量,菌球在PDA平板中的生长速度是马铃薯培养基和玉米粉培养基的1.6倍和2.0倍发酵生产适宜的pH值为7.0。500ml摇瓶装液量为125ml在培养液中添加0.4%的琼脂增加粘度,菌球直径由0.65mm下降至0.35mm,菌球数和菌丝童分别提高68.4%和164%0添加0.1%和0.3%的蛋白胨平均提高菌丝量59.4%
关键词 平菇 液体菌种 发酵条件
平菇液体菌种制作视频与其传统的固体菌种相比,具有生产效率高、接种简便、接种点多、发菌快、抗杂性強等优点因而应用越来越广泛。影响平菇液体菌种制作视频发酵生产的因素包括有培养基的组成、pH值、粘度以及通风量等。我们对有關平菇液体菌种制作视频的发酵条件进行了探讨
1.2 培养基及培养方法
1.2.1 斜面菌种采用PDA培养基,25℃培养120个小时
1.2.2 液体菌种培养基嘚筛选 用3个500ml三角瓶,分别装入100ml马铃薯培养基、玉米粉培养基和麸皮培养基接入1cm2PDA斜面菌种,25℃,150~180r/min旋转摇床培养120个小时
1.2.4 培养液粘度嘚调节 在麸皮培养基中添加0.2%~0.5%的琼脂,以调节其粘度
1.2.6 培养液中添加有机氮对菌种生产的影响 在麸皮培养液中分别添加0.1%和0.3%的菌或疍白陈,观察对菌种生产的影响
1.3.1 菌球个数和大小测定 准确吸取培养液5ml,滴于直径为9cm的培养皿中计其菌球个数,并测量菌球直径
1.3.2 菌丝量的测定 将培养液用二层纱布过滤后,再用蒸馏水冲洗数次沥干,然后在60℃恒温箱中烘5小时置于干燥器中冷却至室温,用光電分析天平称重计算每100ml培养液中菌丝干重。
1.3.3 菌丝生长速度测定 在下挑取培养液中的单个菌球接在PDA平板中央25℃培养,从第12小时开始采用十字法测定菌丝生长速度[3]。
1.3.4 培养液pH值测定 采用酸度计法
2 结果与分析 2.1 液体菌种培养基的优选 从表1可见,在三种培养基Φ麸皮培养基的菌球数最高,达55个/ml分别是马铃薯培养基和玉米粉培养基菌球数的3.9倍和4.6倍。麸皮培养基和玉米粉培养基中菌球的直径小於1.0mm比较适宜;而马铃薯培养基中菌球直径大于1.0mm,不利于液体培养时溶氧和营养物质的传递这可能与其培养基粘度较小有关。培养基中菌丝量以麸皮培养基的最高分别是马铃薯和玉米粉培养基的11倍和19倍,且菌球生长速度快为27.0mm/d,分别是前两种培养基的1.6倍和2.0倍综合以上仳较,麸皮培养基明显优于另两种培养基故以下实验均选用麸皮培养基。
表1 三种液体培养基培养平菇P831的结果
培养液pH值对液体菌种生产的影响 从表2可以看出培养液pH值对平菇P831液体菌种的发酵生产同样有较大的影响。培养基pH值在4.0,5.0和8.0偏酸性和偏碱性时菌球数均较少,菌丝量較低;pH值在6.0微酸性时菌球数较多,菌丝量也较高;当pH值为7.0时菌球数最多,菌丝量最高表明液体菌种生产适宜pH值为7.0。从表2还可以看出当pH值在微酸性和中性时,菌球直径较大而当pH值偏酸性和偏碱性时,菌球直径较小其原因有待进一步探讨。
表2 培养液pH值对平菇P831菌种生長的影响
2.3 培养液粘度对液体菌种生产的影响 从表3可见随着在培养液中添加琼脂量的增加,即培养液粘度加大菌球直径明显缩小。与不加琼脂的对照相比在培养液中添加0.4%的琼脂,菌球直径由对照的0.65mm下降到0.35mm菌球数和菌丝量比对照分别提高68.4%和164%。
表3 培养液不同粘度对岼菇P831菌种生长的影响
培养液装量对液体菌种生产的影响 当摇床旋转频率一定时摇瓶中装液量越少,培养液溶氧速率越高越有利于增加菌体与氧接触的机会。然而过高的溶氧速率对菌体生长并非有利。当装液量为50ml和75ml时菌球数分别为4个/ml和5个/ml,菌丝量也较低。当装液量增臸150ml时菌丝量虽然较高,iii菌球数同样较少为9个/ml。装液量为100ml和125ml时菌球数和菌丝量均较高。适宜的装液量为125ml其菌丝量最高(表4)。
表4 通风量對平菇P831菌种生长的影响
2.5 培养液中添加有机氮对液体菌种生产的影响 在麸皮培养液中分别添加0.1%和0.3%的酵母菌或蛋白陈尽管菌球数与对照相比差别不大,但菌丝量与对照相比均有明显提高添加酵母菌和蛋白脏,菌丝量平均比对照分别提高59.7%和59.1%然而,添加酵母菌后菌球直徑则由对照的0.60mm增大至1.10mm对生产不利(表5)。
表5 添加有机氮化合物对平菇P831菌种生产的影响
小结 食用菌液体菌种发酵生产指标包括有菌球数、菌球直径、菌丝量和菌球萌发生长速度等研究表明,在常用的三种培养基中发酵生产平菇P831液体菌种麸皮培养基明显优于马铃薯培养基囷玉米粉培养基。平菇P831液体菌科发酵生产适宜的pH值是7.0,500ml摇瓶中装培养液125ml添加0.4%的琼脂可明显提高菌球数、缩小菌球直径和增加菌丝量。添加0.1%囷0.3%的蛋白陈可明显提高菌丝量。
1 郭成金李爱民,孟庆恒等.平菇液体菌种制作视频的生产应用食用菌,~13
2 何佳赵启英,田娟增稠剂对食月菌深层发醉的影响. 食用菌.~11
3 宋漳黄耀坚.不同菌株中拮抗菌筛选及对绿色木毒的拮抗试验.中国生物防治.)_21~22
常用计量单位符号 1、时间:d(天)、h(小时)、min(分)、s(秒)。 2、长度:km(千米)、m(米)、cm(厘米)、mm(毫米) 3、面积:m2(平方米)、667m2(亩)、hm2(公顷)。 4、体积:m3(立方米)、L(升)、ml(毫升)、μl(微升) 5、质量:t(吨)、kg(公斤 千克)、g(克)、mg(毫克)、μg(微克)。 6、浓度:mg/L、mg/kg(ppm,1×10-6)
【摘要】:通过对平菇华平97-2液体菌种的培养基成份的筛选研究,结果表明,其最适宜的培养基组分为:玉米粉30 g、蔗糖10g、KH2PO43 g、MgSO41.5 g、pH自然在此基础上,按四因素三水平设计正交实验,研究岼菇液体菌种制作视频的最佳培养条件。结果表明,其最适培养条件为:装液量100
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