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【求助】小分子片段做胶回收，电泳时条带很淡，切胶看不到怎么办？
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这个帖子发布于9年零283天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我要从3000bp的载体上切下约300bp的目的片段.一开始的时候100ul体积直接就上1%的胶， 90V跑了30Min，结果准备切胶的时候发现目的条带根本就看不到。后来用15ul体积上2%的胶试了试，80V跑了30min，目的条带淡淡的，但是能看到。如果做大量回收的话，怕切胶的时候还是看不到条带。大家做小片段回收的时候一般都怎么做的，如何能尽量提高小片段条带的亮度以方便胶回收？另外再问个问题：我的目的基因是让公司合成插入他们的载体中的，我当时在目的基因的一边设了BamH位点。后来发现在载体上与我的目的基因BamH1位点相隔6、7bp的地方也有一个BamH1位点，这样酶切的时候两个BamH1位点会不会相互有影响，我的目的基因的BamH1位点上能否切完全？
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wusky112 编辑于
片段比较小，只能在酶切时加大质粒的量，300bp的分子很小，连接不需要太多，跑胶能够看到就足够了。由于分子较小，在回收时，可以重复过柱，以提高吸附率。2个BamH I 位点相隔6、7bp，应该是不影响酶切的，为了保证正确性，连接好的重组质粒一定测序保证正确性。
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thank you 我加大了酶切的量，回收跑胶条带还不错
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以上网友发言只代表其个人观点，不代表新浪网的观点或立场。基于小分子胶凝剂的超分子凝胶—从偶然发现到设计制备--《全国第八届有机固体电子过程暨华人有机光电功能材料学术讨论会摘要集》2010年
基于小分子胶凝剂的超分子凝胶—从偶然发现到设计制备
【摘要】：正众所周知,与化学凝胶不同,依靠分子间弱相互作用维系的物理凝胶更容易发生刺激诱导可逆凝胶-溶胶相变。而在物理凝胶中,又以基于小分子胶凝剂(Low-Molecular Mass Gelators,LMGs)的超分子型凝胶的这一性质最为突出。几年来,本实验室从设计制备具有特定结构的LMOGs入手,致力于创制具有多重刺激响应性或其它特殊性质的超分子凝胶,探索它们在有关领域的可能应用。本文通过举例报道有关结果和所获得的一些认识。
【作者单位】：
【基金】：
【分类号】：O648.17
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【求助】求助求助。有谁跑过小分子胶，看看我这两张tricine-sds-page图吧。。。
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这个帖子发布于6年零71天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
为什么maker被压成这样了，最上面那层浓缩胶我切掉了。。中间那条出现很清晰的条带是上面的夹层胶和下面分离胶的界限，感觉到了这个位置，蛋白就跑不下去了。。目的条带是3KD。谁能帮忙分析一下。本人刚开始跑tricine-sds-page，没经验，请同仁们多多指教啊。。。
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谁能给我一个准确的tricine-sds-page 的配方啊。。。。**。。**。。。看了很多文献，说法各一啊。。。
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都没有人跑过这个胶？
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这是我做的结果 你在站内搜一下：Tricine-SDS-PAGE，有一篇很好的参考文献的，如果你不能下载我可以发给你。
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关于丁香园双酚芴小分子凝胶的制备和性能--《信阳师范学院学报(自然科学版)》2018年01期
双酚芴小分子凝胶的制备和性能
【摘要】：设计合成了基于双酚芴衍生物有机化合物1,该凝胶因子能够在甲苯中形成有机凝胶.分别用紫外可见吸收光谱、红外光谱、扫描电镜和接触角等技术对凝胶因子自组装过程进行了表征.结果表明,自组装过程形成了具有一定的疏水性的膜结构,其接触角为106°,氢键作用是该体系自组装的主要驱动力.
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【分类号】：O648.17
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