westernblot blot等生物学试验中的内参是什么意思

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内参是什么意思?
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内参是什么意思?
经常看到新闻说什么 记者内参什么的! 内参到底是什么,还有外参是什么?
希望能尽快得到妥善处理。  [编辑本段]新闻内参的内容  有人认为。广义的内参可指任何机构搜集的供内部人员参考的信息资料。在我国,新闻内参特指新闻媒体向各级党政机关专门呈送的一种新闻报道,其中以各党报、党刊和通讯社的采编人员为主。他们在采集到某些新闻信息后,经斟酌认为,事实本身具有较高的社会影响力。  [编辑本段]新闻内参的呈送  新闻内参呈送的对象为各级党组织和政府机关,或亟待进行解决。目前,我们所说的“内参”通常即指新闻内参。  [编辑本段]新闻内参的性质  在我国,供有关领导参考,新闻内参呈送到有关部门后,相关人员会进行初步的筛选后,再呈请有关领导同志进行审阅。如领导同志认为某篇内参所报道的事实值得引起重视或应尽快进行处理,将对该内参进行批示,指示相关部门,希望得到有关部门的整治,新闻内参就是“告状”。这种说法是片面的,是新闻的一种特殊形式。与普通的新闻不同的是。  [编辑本段]新闻内参的采集  新闻内参的采集者为国内各新闻媒体的新闻工作者、人员进行办理,甚至亲自挂帅,以保持倾向的中立,方便领导同志作出准确的判断和批示。通常,媒体会根据自身的级别来选择内参呈送的对象,都是对新近发生的事实的报道。在写作手法上,内参通常采用平铺直述的手法,不宜采取过多的写作技巧。写作语言尽量减少感情色彩。内参通常有三种不同的内容:第一种是对社会不良现象的报道。如党中央机关报《人民日报》的内参通常会呈送给中央办公室或国务院办公厅,广东省委机关报《解放日报》的内参则通常会呈送给广东省委办公厅或广东省政府办公厅,以此类推,新闻内参是一种不进行公开发布的报道,希望进行推广。  [编辑本段]新闻内参的处理  通常情况下;第二种是对亟待解决的事件的报道,新闻媒体是党和人民的喉舌,而新闻内参的作用更接近于党和人民的“耳目”。在有关领导批示允许公开前  [编辑本段]什么是新闻内参  内参,顾名思义就是内部参考,内参的内容必须进行严格保密。  [编辑本段]新闻内参的写作  新闻内参和普通的新闻一样;第三种是对有价值的经验或有益探索的报道,需要领导同志引起重视,但不适宜进行公开报道的,则以内参的形式呈送给各级党政机关
老百姓知道的事就是外参,只有一定级别的人知道的交内参,就是内部参考
内参 拼音: 解释: 1.太监。 2.供领导者或一定范围内的同志阅读参考的内部情况报道。
内参,内部参考文件~,只对系统内部人发行~
内参是什么意思?:
[编辑本段]什么是新闻内参 内参,顾名思义就是内部参考。广义的内参可指任何机构搜集的供内部人员参考的...
卖家内参是什么意思?:
教你如何成功,这世界不缺项目,不缺钱,不缺人,缺的就是最新内幕资讯
western blot等生物学试验中的内参是什么意思:
  内参即是内部参照(Internal Control),对于哺乳动物(mammali...
美国内参微信美国内参是什么意思:
股票机构内参 股票池是什么意思:
股票机构内参是指券商内部参考,一般是指导内参针对人群操作的,股票池是指券商会仔细研究的一揽子股票,这...
私募内参股票是什么意思:
字面意思,就是给他们私募的高端客户推荐的股票。反正就是玩有诱惑,忽悠你加入他们和他们一起做股票。 国...
western blot等生物学试验中的内参是什么意思:
就是所有的细胞中几乎都表达的一种蛋白,就叫做内参,我理解的 设内参的目的就是为了看一下你的目的蛋白和...
实时荧光定量pcr内参是什么东西:
内参就是一个表达量在各个组基本保持不变的基因,又叫看家基因,比如常用的GAPDH, actin。或者...
林魁(年),字廷元,号白石山人,明龙溪县廿九都白石社(今龙海市角美镇埔尾村)人,明...
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你好,很高兴为你答题,希望我的回答对你有所帮助。古树:指树龄指生长百年以上的老树。参:高耸到空中的意...
射胶量 68(g):每注塑一次耗费胶68克 螺杆直径 28-32(mm)螺旋转杆的直径为正负30毫米...
形容坐不住,喜欢往家外面跑
女人心海底针男人心海底参 就是说想要参透男人也不容易
一个比较复杂的模型,相互之间的参数有关联,关联关系复杂。当需要更改模型时,可能会因为参数的关联而造成...关于WESTERN BLOT的内参
关于WESTERN BLOT的内参我的用的一抗是TGF BATA1,分子量是25.选B ACTIN做内参,那我可以将膜剪开两半,一边做TGF BATA1,一边做B ACTIN.请问BACTIN要加入二抗吗?加什么二抗?
肯定要加二抗啊,内参和你的目的蛋白是一样的,也是一个蛋白,只不过表达比你的目的蛋白在各个组织之间恒定许多,它是你的目的蛋白的一个参照,但是它的作用和mark还不一样,所以内参是一定要要的,否则,人家会质疑你实验的可信性.如果你的实验动物是大鼠,打个比方一抗是兔抗鼠吧或者其他的什么抗鼠的,二抗就是什么抗兔的,比如说羊抗兔之类,一抗最好买国外的,二抗国内的就可以了
与《关于WESTERN BLOT的内参》相关的作业问题
搞不太清楚你想说什么.内参抗体一般选择 β-actin,GAPDH.hsp90也OK.一般内参抗体都是鼠源的啊.既然一抗是鼠源,二抗是接HRP的羊抗鼠就很好理解啊. 再问: 大侠留步,请问目的蛋白的一抗为鼠源,二抗为羊抗鼠 内参的一抗为鼠源,二抗为羊抗鼠 那么,他俩可以共用二抗吗? 再答: 只要你的目的蛋白分子量和内参
1.protein - blot 之前 用Bradford 测一下总蛋白量,估摸一下2.做完第一次后,用photoshop 软件测一下 各个内参条带的 光密度值,这样可以给 第二次调整的时候 一个参考.
当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量大小相差比较明显情况下,可以在转膜后预染,根据蛋白质Marker的大小将膜剪为大分子量和小分子量两部分,使内参蛋白与目的蛋白分开.然后两块膜分别与内参蛋白抗体以及目的蛋白抗体进行温育,二抗温育以及显色.
我们一般都是用Actin,也就是肌动蛋白来做内参的.
western blot用来检测蛋白表达的变化,而检测表达变化的前提就是,你每个孔跑得总蛋白量是相同的,如果上样量都不同,还怎么检测不同组间目的蛋白量的区别,这样内参就可以作为检测蛋白上样量是否相同的标准.内参一般选那些表达水平比较固定的一些蛋白,比如说actin,这些蛋白的表达水平不会因为你的实验条件而改变,也就是说
朋友,简单的这么问没有意义. 答案取决于你的结果的成像方法.具体来说1如果用传统胶片做载体来显影,你的条带就是蓝色背景上更深的黑色,这时条带越黑反映蛋白量越大,相对灰度也越大,反之亦然.即相对灰度与蛋白量成正比.2如果用凝胶成像仪成像,条带是正片还是反转片是可以选择的, 如果你把条带设成白色,背景设成黑色那就应该是条带
用Tubulin或Actin的抗体.
首先要确定你的样品没有降解,基本上看带型可以确定,条带要干净,没有拖尾,其次是你的一抗,这个需要跟别个同学做的对比,这两个问题排除后主要就是你的抗体稀释度了,浓度过高,显影底物过强都会出现杂带,而杂带跟你每次操作包括洗脱的时间 孵育的时间的不同,都可能出现在不同的位置
是的,β-actin 是管家基因编码的细胞骨架蛋白,表达量在细胞内相对稳定,很少受到其他因素的影响,因此常被选作实验内参
描述有问题.抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-Actin做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化(比如对某个细胞因子的反应),这时β-Actin起到几个作用:1、如果目的蛋白检测不到而且β-Actin也检测不到,那么你的体系有问题,因为β-Actin是看家基因编码
要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot.因为WesternBlot操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化.虽然,顺利的时候WesternBlot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条
你的内参也同样也没有条带?如果内参也做不出来的话,首先你确定你的蛋白没有降解吗?如果蛋白是好的没有降解,再一步一步分析你的实验过程,看是不是那一步出了问题:蛋白在转膜的时候是不是没有转过去?或者你的剪膜的时候不小心把你要的蛋白剪掉了?再或者你的抗体不行?这个可能的原因太多了哪一步出了问题都有可能导致你的结果没有的.
一般不用测 用内参来半定量就可以了缓冲液是为了帮助蛋白迁移呗 再问: 谢谢您!用相同浓度的样本点样是不是更好点 谢谢! 再答: 那肯定的 不过只要相差不大就没关系 因为最后定量的时候都要比上内参的
定量的话肯定是选ELISA.Western blot只是一个半定量的实验方法.检测误差的话.楼主一是一定要选好合适的内参,比如可以测目标蛋白/总蛋白,则内参是总蛋白量,如果使用目标蛋白/总组织重量,则很不准确,因为抽提过程的效率不稳定,即每克组织能够提取出来的蛋白量不固定,而且每个组织含水/含不相干的组织量也不同.建议
转膜有问题吗?转膜时那些条带有气泡产生吗?请问你做了这些样品对应的actin内参了吗?丽春红染色显示的条带怎样?若内参没问题,是不是你加底物没有弄均匀?你的一抗和二抗什么条件?
总蛋白定量是标准程序.由于跑胶的时候每个点样孔,每个跑道有一定的容量,加多了会堵塞,加太少则有可能检测不到,造成假阴性.所以有必要对总蛋白量有所控制.但是对有经验的人士来说,做到适量的加样确实不需要分光光度计测量那种精度.是否有必要定量还是取决于实验的目的.比如,如果不能够定量显示两个跑道加样量相同,则无法根据一粗一细
预先必须测定蛋白浓度,然后计算出来某个上样量(如100微升)所需的体积,保证每一个样上样的蛋白的质量相同,再去跑胶,根据内参结果调节上样量.
如果你从前没用错的时候最终结果一直不错的话(信号较强,条带清晰),这次用错了,影响不大,甚至看不出区别.我估计哦.你提到的“抗体稀释液”,既然只是个名字,没有提到成分,估计你是买的商品化的东东,你可以了解一下它的成分,一般也含BSA或donkey/goat serum,或者脱脂milk powder.原理上都是一样的都
因为Akt信号通路是通过 磷酸化而活化的,也就是所谓的P-Akt.所以想知道这个细胞的Akt信号通路是否活化就要比较在 总Akt 相当的情况下 p-Akt的含量,总Akt就算一个类似于内参的东西,当然并不能代替内参,如果总Akt条带差异很大的话,P-Akt条带有差异也就说明不了什么问题了!做western的gapdh用什么稀释 _ 土堆网 - 广州大学城最热闹网上社区!
做western的gapdh用什么稀释
【GAPDH的作用】广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参,即将每个样品测得的目的蛋白含量与本样品的GAPDH含量相除,得到每个样品目的蛋白的相对含量,然后才进行样品与样品之间的比较。【GAPDH】或G3PDH是甘油醛-3-磷酸脱氢酶( glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase )的英文缩写。GAPDH是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,且GAPDH 作为管家基因在同种细胞或者组织中的蛋白质表达量一般是恒定的。【Western Blot】蛋白质印迹法(免疫印迹试验)。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。
GADPH是作为实验的内参而使用的。GAPDH是常用的蛋白质内参。GAPDH或G3PDH是甘油醛-3-磷酸脱氢酶( glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase )的英文缩写。GAPDH是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。因为GAPDH 作为管家基因在同种细胞或者组织中的蛋白质表达量一般是恒定的,因此在使用GAPDH内参抗体时,将每个样品测得的目的蛋白含量与本样品的GAPDH含量相除,得到每个样品目的蛋白的相对含量,然后才进行样品与样品之间的比较。GADPH是作为实验的内参而使用的。1.内参即是内部参照(Internal Control),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白(Housekeeping Proteins),它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。在Western Blotting 实验中,除了需要进行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上样电泳、转膜、靶蛋白抗体孵育、显色等步骤以外,还需要进行内参的检测,以校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差,保证实验结果的准确性。2.常用的蛋白质内参有GAPDH(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)和细胞骨架蛋白beta-actin或beta-tubulin。
内参作为一个参考物选用一个表达量相对稳定的蛋白,如actin,GAPDH等。不同方法处理细胞时内参的表达量不变,目的蛋白有可能会有变化。western中各泳道的内参的条带一样,那说明蛋白浓度一样。总蛋白浓度一样,目的蛋白条带宽度差异才能体现出目...
看到你的目的蛋白条带在30和35kD之间,就可以初步断定是你的目的蛋白。2. 内参呢,内参也叫看家基因,在组织或细胞中都会表达,且表达量在不同组织或细胞中几乎是相同的,一般有β-ACTIN,GAPDH等。其作用有二,1. 是看提取蛋白质量的好坏。如果...
血清的Western blot上样量的问题: 1)是等体积上样呢?还是等质量上样,我见都有,哪个比较科学些?为什么? 2)用什么方法保证上样量一致呢? 3)血清内参,到底如何选择? 没有解决这个问题,请高手帮忙解决 谢谢 1、等体积、等量 2、测定蛋...
网络搜索了解到: 由于血浆或血清中很难找到一个稳定表达的蛋白,常见的在组织中比较常用的内参蛋白如肌动蛋白,GAPDH等,严格讲并不适合血浆或血清; 可以考虑用立春红染色 或考染做loading control(这种方法在不少文献中都有报道,是大家认可...
常用的蛋白内参有 beta actin 和 GAPDH,它们是有区别的 GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,beta actin分子量为42KD。一般选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上 另外,细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用 beta acti...
【GAPDH的作用】广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参,即将每个样品测得的目的蛋白含量与本样品的GAPDH含量相除,得到每个样品目的蛋白的相对含量,然后才进行样品与样品之间的比较。 【GAPDH】或G3PDH是甘油醛-3-磷酸脱氢酶( glyceraldehy...
一般都是β-tubulin吧。另外GAPDH和actin也可以。
GADPH是作为实验的内参而使用的。GAPDH是常用的蛋白质内参。 GAPDH或G3PDH是甘油醛-3-磷酸脱氢酶( glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase )的英文缩写。 GAPDH是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带...
1、哺乳动物的组织或者细胞样本,通常选择β-actin、β-tubulin、GAPDH、Lamin B、Histone H3、Na,K atpase等。 2、植物来源实验样本,则可以选择plantactin、Rubisco等。 3、其他来源样本研究较少,所以就应该参照文献报导,选择合适的蛋白作为内...
百度了一下,推荐了解了解:大肠杆菌gapA基因转录翻译的GAPDH蛋白的高度保守性,为制备大肠杆菌专用内参蛋白抗体提供可能,
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