※分析检测食品科学2009,Vol.30,No.；高效液相色谱－蒸发光散射法测定南瓜中；果糖、葡萄糖、及蔗糖含量；王培培，孙爱玲，李爱峰，曾庆华，柳仁民*；(聊城大学化学化工学院，山东聊城252059)；摘要：目的：建立简便、准确、灵敏的测定南瓜中果糖；关键词：高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC；DeterminationofFructoes,；WAN
※分析检测食品科学2009, Vol. 30, No. 10179高效液相色谱－蒸发光散射法测定南瓜中果糖、葡萄糖、及蔗糖含量王培培，孙爱玲，李爱峰，曾庆华，柳仁民*(聊城大学化学化工学院，山东 聊城
252059)摘　　要：目的：建立简便、准确、灵敏的测定南瓜中果糖、葡萄糖及蔗糖含量的方法。方法：样品经热水提取后，使用Kromasil NH2(250mm×4.6mm，5 μm)柱分离，以乙腈-水(80:20，V/V)为流动相，使用蒸发光散射检测器检测。结果：果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖及乳糖的线性范围分别为0.5～3、0.75～5、0.5～5、1～10、1～10g/L，检出限分别为1.90、2.40、1.80 、2.50、2.60μg/L，样品的平均加标回收率分别为99.0%、97.1%、98.9%、99.5%、102.4%，相对标准偏差分别为1.02%、1.41% 、1.27%、1.72%、1.66%。市售5种南瓜中糖果、葡萄糖、蔗糖的实际测定结果分别为1.05%～3.80%、0.823%～4.49%、0.090%～5.19%结论：该方法操作简便、快速、准确，用于实际样品的测定，结果令人满意。关键词：高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)；南瓜；果糖；葡萄糖；蔗糖 Determination of Fructoes, Glucose and Sucrose in Pumpkin by High Performance Liquid Chromatography-Evaporative Light Scattering DetectionWANG Pei-pei，SUN Ai-ling，LI Ai-feng，ZENG Qing-hua，LIU Ren-min* (College of Chemistry and Chemical Engineering, Liaocheng University, Liaocheng
252059, China)Abstract ：Objective: To develop a simple, accurate and sensitive method for determination of fructose, glucose, sucrose, maltoseand lactose in pumpkin. Methods: The sugars in pumpkin were extracted with hot water, separated on Kromasil NH2 column (250mm × 4.6 mm, 5　 μm) using acetonitrile and water (80:20, V/V) as the mobile phase, and examined using an evaporative light scatteringdetector. Results: The linear ranges of fructose and glucose, sucrose, were maltose and lactose 0.5 to 3 g/L, 0.75 to 5 g/L, 0.5 to5 g/L, 1 to 10 g/L and 1 to 10 g/L respectively. Their detection limits were 1.90, 2.40, 1.80, 2.50 and 2.60 μg/L, respectively. Theaverage spike recoveries were 99.0%, 97.1%, 98.9%, 99.5% and 102.4%, respectively, and the relative standard deviations were1.02%, 1.41%, 1.27%, respectively. The determination results of fructose, glucose and sucrose in five saled pumpkin sampleswere 1.05% to 3.80%, 0.823% to 4.49%, and 0.090% to 5.19%, respectively, while no maltose and lactose were found in thesepumpkin samples. Conclusion: This method is simple, fast and accurate, and can be applied to the determination of fructose,glucose and sucrose in pumpkin with satisfactory results.Key words：high performance liquid chromatography-evaporative light scattering detection (HPLC-ELSD)；pumpkin；fructose；glucose；sucrose中图分类号：O657.7
文献标识码：A
文章编号：09)10-0179-03南瓜(Cucurbita spp)是葫芦科南瓜属一年生蔓性草本植物，含有丰富的VE、β-胡萝卜素、南瓜多糖、果胶、膳食纤维、瓜氨酸、环丙基氨基酸、微量元素铬、酶类、南瓜籽碱和葫芦巴碱及金属元素等功效成分，这使得南瓜表现出各种功能特性，可作为开发许多功能性食品的原料或作为功能性食品直接食用。我收稿日期：国古代就有对南瓜食疗保健作用的记载，在《本草纲目》中，李时珍将南瓜与灵芝放在一起，说它有“补中，补肝气，益心气，益肺气，益精气”的作用。近年来的研究亦表明，南瓜多糖有非常显著的降血糖作用，具有治疗糖尿病的功效[1-3]，因此南瓜作为一种防治糖尿病的营养保健食品倍受人们的重视[4]。南瓜中同作者简介：王培培(1984-)，女，硕士研究生，研究方向为分离科学。E-mail：*通讯作者：柳仁民(1963-)，男，教授，博士，研究方向为分离科学。E-mail：180
2009, Vol. 30, No. 10食品科学※分析检测样含有水溶性的单糖及双糖，且不同品种、不同产地的南瓜中单糖含量不同，很多糖尿病患者往往会误食大量的南瓜，造成病情的加重，所以建立一种准确、快速测定南瓜中单糖及双糖含量的方法很有必要。本研究首次采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法来测定南瓜中果糖、葡萄糖和蔗糖含量，以期为南瓜中这几种糖含量的测定提供一种准确、灵敏、快速的分析方法。１1.1材料与方法材料与试剂南瓜购于当地龙山菜市场。流动相考察了糖类化合物在氨基柱上的分离情况，结果表明，提高流动相中水的比例可以缩短分离时间，但会使分离度下降，果糖与葡萄糖的峰部分重叠，而且水的比例过大会造成氨基柱的损伤；降低流动相中水的比例可以使分离度变大，但分离时间延长，峰展宽严重。综合考虑以上因素，当乙腈和水的体积比为80:20(V/V)，流速为1.5ml/min时，分离效果令人满意，在此条件下标准品与样品的色谱图如图1所示。2.3ELSD参数的选择A020000果糖、麦芽糖
上海蓝季科技发展有限公司；葡萄糖
天津市科密欧化学试剂开发中心；蔗糖
天津市化学试剂三厂；乳糖
天津市大茂化学试剂厂；各种糖标样均为分析纯纯度均大于99%；乙腈(色谱纯)
山东禹王实业有限公司禹城化工厂；实验用水为二次重蒸水。1.2仪器与设备Unimicro HPLC泵、Unimicro色谱工作站
通微(上果糖葡萄糖蔗糖麦乳芽糖糖5101520时间(min)253035mV海)技术有限公司；Kromasil NH2色谱柱
大连江申分离科学技术公司；Alltech ELSD2000ES蒸发光散射检测器美国奥泰公司；RE-3000旋转蒸发器
上海亚荣生化仪器厂。1.31.3.1方法色谱条件和ELSD参数Kromasil NH2色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流B果糖葡萄糖510蔗糖1520时间(min)2530动相：乙腈-水(80:20，V/V)；流速1.5ml/min；柱温为室温；进样量20μl。ELSD条件：漂移管温度为85℃；空气做载气；载气流速2.4L/min；分流阀状态：开。1.3.2样品溶液的制备南瓜去皮、去芯后，切碎、研磨，准确称取研图１　　　五种糖标准品（Ａ）及南瓜样品（Ｂ）的ＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ色谱图Fig.1
HPLC－ELSD chromatograms of mixed five standard sugars(A) and three sugars from pumpkin (B)ELSD 检测器的参数主要有漂移管温度和载气流速。漂移管温度影响检测器的响应，温度低时流动相蒸发不完全，温度升高，流动相蒸发趋于完全，信噪比提高，但温度过高会使流动相沸腾，增加背景噪音，还可导致组分部分汽化，信号响应值变小，最优温度为在流动相基本蒸发完全的基础上，产生可以接受的噪音的最低温度，应根据流动相选择合适的漂移管温度。一般来说，载气流速越小，形成的溶质颗粒越大，散射光的强度越大，但是当载气流速太小时，流动相蒸发不完全，背景噪音大，最优的载气流速应是在产生可接受噪音的基础上，产生最大响应值的最低流速。以推荐值为起点，逐渐改变漂移管温度或载气流速，观察基线噪音和响应信号的大小。结果发现，当漂移管温度为85℃，空气流速为2.4L/min，分流阀开时，噪音最小，响应信号最强，故确定此条件为最佳条件。2.4分流阀状态的选择磨后的南瓜5.000g，加入少量蒸馏水，于95℃下提取2h，冷却，减压浓缩，定容至50ml容量瓶中。提取液先用干燥滤纸过滤，再用0.45μm水系滤膜过滤，滤液供HPLC分析。２2.1结果与分析样品前处理条件的选择由于糖易溶于水，在室温下溶解度小，升高温度可以加速糖的溶出，但温度过高会使多糖、蔗糖等水解，故实验选择提取温度为95℃，在此温度下提取2h可以使糖完全溶出。同时，还比较了不同提取方法得到的南瓜中糖的含量，发现超声提取效果不如热提，因此选取热提作为南瓜中糖的提取方法。2.2流动相的选择实验选择Kromasil NH2柱为分离柱，以乙腈-水为※分析检测食品科学2.9回收率实验2009, Vol. 30, No. 10181实验所使用的ELSD2000ES蒸发光检测器中带有分流阀装置，当分流阀处于“开”的位置时，气溶胶中较大液滴被旁路除去，使得漂移管温度在较低情况下就能使得流动相蒸发完全，因而样品能获得最佳检测灵敏度和基线稳定性。线性关系考察配制一系列不同浓度的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖的标准品混合溶液，其中，果糖、葡萄糖、蔗糖的浓度分别为1.0、1.5、2.0、2.5、3.0g/L，麦芽糖、乳糖的浓度分别为4.0、5.0、6.0、7.0、8.0g/L。各取20μl进样分析，以峰面积的对数对溶液浓度的对数进行线性回归，得五种标准品的线性回归方程和相关系数，并以信噪比等于3为标准，测得五种糖的检出限，结果见表1。表１　　　果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖的回归方程、线性范围和检出限Table 1
Regression equations, linear ranges and detection limitsof fructose, glucose, sucrose, maltose and lactose.标准品线性范围(g/L)果糖葡萄糖蔗糖麦芽糖乳糖0.5～30.75～50.5～51～101～10回归方程Y=1.534X+6.406Y=1.273X+6.441Y=1.346X+6.482Y=1.406X+6.228Y=1.344X+6.270相关系数0...9931最低检出限(μg/L)1.902.401.802.502.60在已知糖含量的南瓜样品中分别取5份，准确加入已知量的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖及乳糖标准溶液后，按照1.3.2的方法处理，在相同的色谱条件下平行测定5次，按照外标法定量并计算回收率，结果见表2。表２　　　果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖及乳糖的加标回收率Table 2
Spike recoveries of fructose, glucose, sucrose, maltoseand lactose名称本底值(mg)加入量(mg)测得量(mg)平均回收率(%)RSD(%, n=5)果糖葡萄糖蔗糖麦芽糖乳糖109.050.449.949.450.250.0159.9.9351.2099.097.198.999.5102.41.021.411.271.721.662.5如表2所示，各种糖的回收率比较理想，表明该方法准确可靠。2.10样品含量测定表　３　　　实际样品测定结果(%)Table3
Determination results of fructose, glucose, sucrose,maltose and lactose in five saled pumpkin
(%)样品号12345果糖(%)2.781.052.183.802.71葡萄糖(%)2.250..53蔗糖(%)1.420..19麦芽糖(%)―――――乳糖(%)―――――如表1所示，在线性范围内各种糖的含量与峰面积有很好的线性关系。精密度实验配制果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖的混合对照品溶液，其中果糖、葡萄糖、蔗糖的浓度均为2.00g/L，麦芽糖、乳糖的浓度均为6.00g/L。连续进样5次，每次20μl，在上述色谱条件下分别测得峰面积，按照外标法定量计算各组分浓度的相对标准偏差(RSD)分别为1.24%、1.03%、2.38%、0.824%和2.30%，表明该方法精密度良好。2.7稳定性实验取2.6中标准品供试液，每次20μl每隔4h进样分析一次，分别测得果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖的峰面积，按照外标法定量，计算各组分浓度的RSD值分别为3.87%、2.41%、0.423%、0.982%、1.46%，表明样品在24h内稳定。2.8重现性实验配制5份与2.6中浓度相同的混合对照品溶液，平行操作，每份样品取20μl进样分析，平行进样3次，分别测得果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖及乳糖的峰面积，按照外标法定量，计算各组分浓度的 RSD 分别为0.589%、0.637%、0.787%、0.674%和0.926%，表明本方法重现性良好。2.6注：“―”表示未检出。采用该实验方法对市售的5种南瓜样品进行测定，结果见表3。３结　　论实际样品的测定结果表明，南瓜中主要含有果糖、葡萄糖及蔗糖，且5份样品中果糖、葡萄糖及蔗糖含量存在差异，因此，糖尿病患者在食用南瓜时应选好南瓜的品种及产地，尽量选取含糖量小的样品食用。实验使用高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定了南瓜中果糖、葡萄糖及蔗糖的含量，结果表明，该法具有灵敏度高，重现性、稳定性好，简便、快速等优点，为测定南瓜中的三种糖分提供了准确、可靠的分析方法。参考文献：[1][2][3][4]叶盛英, 郭琪. 南瓜多糖的提取及其药理作用研究概况[J]. 天津药学, ): 58-60.彭红, 黄小茉, 欧阳友生, 等. 南瓜多糖的提取工艺及其降糖作用的研究[J]. 食品科学, ): 260-263.张拥军, 姚惠源. 南瓜多糖的分离、纯化及其降血糖作用[J]. 中国粮油学报, ):
59-62.周汉奎. 南瓜综合加工技术[J]. 食品科学, ): 59-62.三亿文库包含各类专业文献、中学教育、各类资格考试、生活休闲娱乐、应用写作文书、高等教育、专业论文、14(食品科学)高效液相色谱_蒸发光散射法测定南瓜中果糖_葡萄糖_及蔗糖含量等内容。　
　高效液相色谱检测器中除了最常用的 紫外检测器之外,...罗进[12]等人建立同时 测定食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖的高效液相色谱 - 蒸发光散射法... 　HPLC法测蔗糖,葡萄糖,果糖含量_化学_自然科学_专业资料。HPLC 法测蔓菁中果糖,...HPLC_ELSD法测定芒果中的... 3页 2下载券
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中医药大学高效液相色谱系统（含紫外检测器+蒸发光散射检测器）招标公告
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南京中医药大学高效液相色谱系统（含紫外检测器 + 蒸发光散射检测器）采购招标公告&&&&&&&&&&&南京中医药大学现就高效液相色谱系统（含紫外检测器 + 蒸发光散射检测器）进行公开招标，现将具体事宜通告如下：
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（3）报名需提供：
①单位介绍信或法人授权委托书及经办人身份证；企业营业执照；税务登记证；企业近三年财务报表或审计报告；近期业绩；
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④原件供现场核查并退还，复印件一律不予退还。
5、其他：招标人将通过投标人的实力、信誉、业绩以及考察等方面确定潜在投标人。对未通过资格预审的申请人，招标人将不作任何解释。
6、联系方式：
（1）地址：南京仙林大学城仙林大道138号行政楼117室
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