【摘要】:利用同源克隆方法从夶豆中克隆到一个耐盐基因是dna上的片段HAL3,命名为GmHAL3a,组织表达分析发现GmHAL3a基因是dna上的片段在大豆根中表达量最高,荚中次之,叶中表达量最低;非生物胁迫实验表明该基因是dna上的片段受NaCl、LiCl和山梨醇诱导表达;通过生物信息学的方法分析发现该基因是dna上的片段具有2个跨膜螺旋区域,可能定位于叶綠体中;同源序列比对证实该基因是dna上的片段氨基酸序列具有与其他物种相似的保守位点:黄素单核苷酸(FMN)结合位点和磷酸泛酰半胱氨酸(PPC)脱羧酶活性位点同时扩增了这个基因是dna上的片段的2个干扰片段,用Gateway技术将扩增的片段通过BP反应连接到入门载体pDONR221,测序后又通过LR反应分别将目的片段插入到RNAi载体pB7GWIWG2(Ⅱ),再转入根癌农杆菌EHA105中。这2个载体的构建对于进一步研究大豆中GmHAL3a基因是dna上的片段的功能具有重要意义
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