山羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒使用说明书
&本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。
山羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒使用说明书
【山羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒&试剂盒名称】
山羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒
【山羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒&试剂盒用途】
定量检山羊血清、血浆及相关液体样本中褪黑素(MT)的含量。
【山羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒检测原理】
本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将标准品、待测样本加入到预先包被褪黑素(MT)透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中褪黑素(MT)浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中褪黑素(MT)含量。
【山羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒&试剂盒组成】
酶标包被板
标准品：200ng/ml
20倍浓缩洗涤液
标准品稀释液
样本稀释液
备注：标准品用标准品稀释液依次稀释为：200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml
【山羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒需要而未提供的试剂和器材】
1、37℃恒温箱
2、&标准规格酶标仪
3、&精密移液器及一次性吸头
4、&蒸馏水
5、&一次性试管
6、&吸水纸
【山羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒操作步骤】
1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。
2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50&L；待测样本孔中先加入待测样本10&L，再加样本稀释液40&L（即样本稀释5倍）；空白对照孔不加。
4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。
6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液50&L，空白对照孔不加。
7、温育：重复4的操作。
8、洗板：重复5的操作。
9、显色：每孔先加入显色剂A 液50&L，再加入显色剂B液 50&L，37℃避光显色15min。
10、终止：取出酶标板，每孔加终止液50&L，终止反应（颜色由蓝色立转黄色）。
11、测定：以空白孔调零，在终止后15分钟内，用450nm波长测量各孔的吸光值（OD值）。
12、计算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。
【山羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒&样本要求】
1、样本不能含叠氮钠（NaN3），因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。
2、标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能立即试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。
【山羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒注意事项】
1、实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
2、酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。
4、牢记样本已经稀释5倍，计算结果乘以5才是样本实际浓度。
5、本试剂盒定量范围为0.1-200ng/ml，超过此范围，为标准曲线延伸计算所得，不做为准确定量结果，请用特殊稀释液稀释后测定准确结果（0.1-200ng/ml范围内），乘以总稀释倍数即为样本最终浓度。
6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。
7、为避免交叉污染，标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头；酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分，要悬臂加样，不得碰到微孔；不得重复使用封板膜。
8、试剂盒保质期内使用，不同批号的试剂不得混用。
9、底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
【山羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒操作程序总结】
准备试剂，样品和标准品&
加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟
洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟
洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟
加入终止液
15分钟之内读OD值
【山羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒检测范围】
0.1-200ng/ml
【山羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒规格】
96T/盒、48T/盒
【山羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒贮藏】
2-8℃，避光防潮保存。
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不同的土壤微生物为什么稀释的倍数不同
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因为含菌量不一样,含菌量少的当然稀释倍数要小了,要不稀释倍数大了在平板上就没有菌落啊
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猪褪黑素(MT)ELISA 试剂盒
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所&在&地&址：上海上海
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产品详细说明
生物素/HRP
检测方法：
详见说明书
试剂盒名称：猪褪黑素(MT)ELISA 试剂盒联系方式&&& QQ : 全程提供技术指导 提供售后服务有质量问题包退换，免除您的实验后顾之忧 提供免费代测服务&猪褪黑素(MT)ELISA 试剂盒&需要而未提供的试剂和器材1.酶标仪(450nm检测波长滤光片，570nm或630nm校正波长滤光片) 。2.洗板机（可调注液量，保证每孔洗液加至0.35ml而不溢出）。3.超净工作台，生物安全柜，通风柜。4.高精度单道加液器（量程为0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl).5.高精度多道加液器（8道或12道，量程为50-300μl).6.37℃恒温箱。7.低温离心机。8.电冰箱（4℃,-20℃,-86℃）.9.& 漩涡混合仪，低频振荡器等猪褪黑素(MT)ELISA 试剂盒&注意事项1． 从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。3． 为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。4． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。5． 底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。6.&& 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按生物废弃物处理。终止液为2M硫酸，使用时必须注意安全。7.& 各步骤加样均应使用加样器，并经常校准其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。8.& 每次试验测定的同时做标准曲线，。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔最高浓度的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n）。9.& 配制试剂时，要用旋涡混合仪混匀。加入孔内的试剂，充分混匀对测试结果尤为重要，最好使用微量振荡器(使用最低频率)，如无微量振荡器，可在反应前手工轻轻晃动酶标板1分钟，例如做圆周动作，使加入孔中的反应液混匀。 10.& 实验用酶标仪应严格按使用说明书规范操作，并在使用前充分预热。11.& 手工洗板应注意：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。&猪褪黑素(MT)ELISA 试剂盒&样本要求1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存或根据存放，时间做相应温度调整，但应避免反复冻融，（由于样本种类过多，每个单位处理方式不一样，本说明书不做详细介绍）。&猪褪黑素(MT)ELISA 试剂盒&结果判断1.& 每个标准品和标本的OD值应减去零孔的OD值。（若不减零孔值，标准曲线的零孔应相交于Y轴）2. 根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种熟悉应用软件来计算。3．手工绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标，OD值作纵坐标，以平滑线连接各标准品的坐标点。通过标本的OD值可在标准曲线上查出其浓度。推荐使用专业制作曲线软件进行分析计算结果。4．若标本OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测，计算浓度时应乘以稀释倍数。
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