激光共聚焦培养皿小皿可以重复使用吗?

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激光共聚焦培养皿使用方法
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【求助】激光共聚焦培养皿神经元不贴壁
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这个帖子发布于3年零85天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
实验要用激光共聚焦显微镜测定神经元的[Ca2+]i, 用激光共聚焦培养皿接种细胞,却很难贴壁。做的细胞是E14d的胎鼠脊髓神经元,做之前有用索莱宝购置的多聚赖氨酸包被,都是按原来方法做的,多大的玻片或者96孔板包被后细胞都能贴壁,可是已经做了两次,激光共聚焦培养皿却很少甚至没有神经元贴壁。包被过程是,在皿里加入PLL,保证覆盖住底部玻片,至于37℃培养箱中30min,抽净PLL,在超净台抽干,隔天做原代。接种细胞数是4*10^5/ml,只在底片上加了500ul。求助是否有前辈遇到类似情况,怎么解决的?
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请问之后解决了没有?是什么原因?
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是不是已经预先包被了,不需要再包被了?
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遇到同样的问题,同样条件包被,神经元就是不贴壁,贴壁也会聚团,请问楼主问题解决了么,怎么解决的?谢谢解答!!
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yuanjinxian 遇到同样的问题,同样条件包被,神经元就是不贴壁,贴壁也会聚团,请问楼主问题解决了么,怎么解决的?谢谢解答!!亲,你的问题解决了么?求指教?
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yj1984ren edited on
sophia2lele 亲,你的问题解决了么?求指教?你好,问题只能说解决了一点。之前在Jove上看到一个视频,不过找了蛮久的现在找不到了,当初可能也没保存。。。这个视频具体做法是将小培养皿底部用专业器械锯出一个圆形的洞,相当于我们共聚焦培养皿没有底层玻璃,置于紫外30min,将凡士林和石蜡以1比3的比例在80℃混合融化成液体,无菌玻片(比洞要大)多聚包被晾干备用。在紫外后的培养皿外侧底部用画笔涂一层液体的凡士林石蜡混合物,马上就会干掉。将包被好的玻片置于上面,转移到80℃水箱(注意无菌,将数个培养皿放置在一个大饭盒中或其他无菌器皿中,便于转移)放置10min,拿出置于层流柜,液体很快凝固,再紫外30min,确保无菌。然后进行接下来的细胞培养。这样细胞可见,但工序比较繁琐,液体需要控制得当,多了干后在内圈会有一圈蜡。我是用用过没成功的共聚焦培养皿,泡到纯乙醇中多天,用小刀将玻片翘掉,继续酒精,做前紫外。不过,只做过几次,后来没做这部分实验了。
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【细胞培养】J40101晶安激光共聚焦专用细胞培养皿显微镜倒置小皿收藏
晶安生物荧光/激光共聚焦专用玻璃底细胞培养皿概况和特点:标准细胞培养皿、板和高质量玻璃底的完美结合。革新设计提供了一个独立、平整的底部。在体外培养环境下,为高分辨率显微镜提供更清晰的视野。共聚焦培养皿由高质量的聚苯乙烯和高透明度硼硅酸盐玻璃制成。具有高光学性能的玻璃材料保证了底部的最佳平整度,从而避免了光的去偏振化。 高透明度硼硅酸盐玻璃,玻璃底厚度:0.17mm+-0.02mm,最大的光透过范围,超平界面。应用范围:相差显微镜 荧光显微镜 激光共聚焦显微镜 活细胞成像相差干涉显微镜 激光发射显微镜 荧光原味杂交技术(FISH)规格参数:目录编号 玻底直径 形状 共聚焦器皿 表面处理 灭菌 包装规格 J40101 φ10mm 圆形 35mm皿 TC处理 伽马辐照 10个/包,100个/盒 J40141 φ14mm 圆形 35mm皿 10个/包,100个/盒 J40201 φ20mm 圆形 35mm皿 10个/包,100个/盒 J40301 φ30mm 圆形 35mm皿 10个/包,100个/盒 J04201 φ20mm 圆形 6孔板 1个/包,5个/盒 J04201-B φ20mm 圆形 全黑6孔板,避光 1个/包,5个/盒
楼主介绍的很详细,了解不少,谢谢了
感谢楼楼分享~
很高大上的样子,又学到了不少知识
写的很详细,楼主分享的很好
以前没有了解过,收藏看看。
不错的冻得很多啊,谢谢楼主
是啊,高科技就是不同
看起来很不一样的感觉,进口产品质量不错
第一次了解这个哎,不错
感谢楼主科普~
谢谢楼主分享
我们是经销商,价格能优惠多少呢?
谢谢楼主分享,学到恨多东西
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