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【求助】总黄酮的含量测定问题
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这个帖子发布于12年零329天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
芦丁标准曲线做的很好，可是，为什么总黄酮药液，加入显色剂之后，不变成红色呢，而且紫外检测也无法红移到500nm，怎么回事？求助各位大侠，谢谢！
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保健食品中总黄酮的测定Determination of total flavonoid in health food
1试剂1.1 聚酰胺粉1.2
芦丁标准溶液：
称取5.0mg芦丁，加甲醇溶解并定容至100mL，即得50mg/mL。1.3
乙醇:分析纯。1.4
甲醇:分析纯。2 分析步骤2.1 试样处理：称取一定量的试样，加乙醇定容至25mL，摇匀后，超声提取20min，放置，吸取上清液1.0mL，于蒸发皿中，加1g聚酰胺粉吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转入层析柱。先用20mL苯洗，苯液弃去，然后用甲醇洗脱黄酮，定容至25mL。此液于波长360nm测定吸收值。同时以芦丁为标准品，测定标准曲线，求回归方程，计算试样中总黄酮含量。2.2 芦丁标准曲线：
吸取芦丁标准溶液：0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于10mL比色管中，加甲醇至刻度，摇匀，于波长360nm比色。求回归方程，计算试样中总黄酮含量。3 计算和结果表示：
_____________________________
V1× M× 1000
X ___ 试样中总黄酮的含量, mg/100g ；
A ___ 由标准曲线算得被测液中黄酮量,mg ；
M ___ 试样质量 , g；
V1____ 测定用试样体积, mL；
V2 ___ 试样定容总体积, mL 。
计算结果保留二位有效数字。
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【讨论】总黄酮的测定我认为不能一概而论的都与芦丁挂钩。不可否认绝大部分植物提取物中的黄酮类成分中芦丁的含量相对较多，但我们都以芦丁作为我们的测试对象可能会造成总黄酮含量结果偏差。我提议，在决定测试方法前先作调查研究，确定要测定的黄酮主要有那几个，它们的紫外吸收图形是否接近，然后综合考虑决定用什么波长，用那个对照品较为合适。至于方法的建立，那时常规的做法。虽说是常规，做分析的最头痛的莫过于前处理方法的建立，前处理方法建立好了将是一半路程走完了，胜利在望。黄酮的前处理富集方法很多，除了聚酰胺外还可以用DEAE LH20、C-18反相硅胶以及大孔树脂等。必须进过方法研究后才能决定。紫外分光光度计测定的精度不是很高，用HPLC测定则对照品的数量则是一个难点。仅供参考。
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大鹰 edited on
你是不是用的NaNO2、Alcl3、NaOH方法显色？如果是，应该在500nm以下有最大吸收，以前我做的是490nm。
1. 如果加入没有吸收，你可以先考虑一下浓度，加大浓度看有没有出现红色或者粉红色。加大浓度没有反应，请继续往下看-----------------
2.仍没有的话，建议看看你用的试剂是不是有问题，是不是货真价实。你可以用标准品来实验，比如芦丁，若没反应问题就找到了；如果芦丁反应正常，说明另有蹊跷，再向下看--------------------
3.另外是你的总黄酮在固体中含量高不高？如果总黄酮含量不高，只是粗提物，其他成分会影响，未必会在500nm左右出现最大吸收。因为测黄酮的反应比较粗糙，它可以和具有邻二羟基、a-羟基醛酮等化合物反应，并不专一和黄酮作用。那么就是其它成分的干扰了，建议进一步纯化后检测。
希望能有所帮助！
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很多文献中报道确实用芦丁作为总黄酮的含量测定的标准品。但我要说的是，黄酮类药物很多，结构也相差很多，不一定和芦丁的基本结构一致，如查耳酮，二氢黄酮，异黄酮，黄酮醇，花色素，橙酮类等。芦丁为黄酮醇甙，如果你的黄酮结构和芦丁有差异，则可能在显色上有区别。结构中具有邻二酚羟基兼有3-羟基、4-酮基或5-羟基，4-酮基的化合物才能和金属离子络合产生颜色。并且不同化合物产生的颜色也有差别，因此，芦丁会显红色，你的黄酮则不一定会显红色，并且波长不一定在500nm。仅供参考。
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恩，谢谢各位了，你们的回答对我有很大的帮助，含量测定的问题现在我经过总黄铜的纯化在500nm已经有吸收了，我看过一篇文献讲只有邻二酚羟基的黄铜才能在500nm有吸收（一作：郭亚健）还有三个问题1 到500nm以后，吸收不是很稳定，会逐步下降，一个小时以后就降到原来的一半了，这在做质量标准会不会有影响呢2 含量测定的作用是什么呢？在整个药物研发的过程中扮演什么角色呢？3 显色剂的用量（如NaNO2、Alcl3、NaOH）还用不用摸索最佳的条件呢，是否照文献上就可以了呢？（我用的是0.3 0.3 4ml,)
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1、NaNO2、Alcl3、NaOH方法很成熟，是药典上有的，你不必再摸索方法了。2、这个反应应该是在最后一个试剂NaOH加入后15分钟时，去检测。它是吸收随时间会变化的，这个俺做过，也做过稳定性实验，如果你做质量标准，你需要也做一份说明在什么时间，或者什么时间范围内测量是可取的。3、质量标准的作用是为了实现药物的可控，控制药物剂量。4、另外NaNO2、Alcl3、NaOH的量，是根据你所反应的容量瓶的大小，还有你的试剂浓度而定啊，最好使用现有的浓度和体积，免得劳神费力了！！
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谢谢passion666了含量测定的作用是什么呢？在整个药物研发的过程中扮演什么角色呢？
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passion_666 1、NaNO2、Alcl3、NaOH方法很成熟，是药典上有的，你不必再摸索方法了。2、这个反应应该是在最后一个试剂NaOH加入后15分钟时，去检测。它是吸收随时间会变化的，这个俺做过，也做过稳定性实验，如果你做质量标准，你需要也做一份说明在什么时间，或者什么时间范围内测量是可取的。3、质量标准的作用是为了实现药物的可控，控制药物剂量。4、另外NaNO2、Alcl3、NaOH的量，是根据你所反应的容量瓶的大小，还有你的试剂浓度而定啊，最好使用现有的浓度和体积，免得劳神费力了！！一定要15分钟后才测吗？还有我看到很多文献，上面说的NaNO2、Alcl3、NaOH的量都不一样，而且一定要先配到12.5mL才加NaNO2、Alcl3、NaOH吗？我现在做的样品实际浓度偏高不少，也不知道是为什么？
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理论上讲，你应该先做方法学考察，证明在多少分钟后检测吸收值最大，我做过大概在15分钟左右。如果你只是需要一个大概的结果，不必去考察是15还是17分钟更好一点。
2. 还有反应试剂应该加多少，也和上面一样，需要做一个考察，加入不同的量，然后看加多少吸收值最大，然后确定加多少。这也是方法学考察。而实际上，别人已经做乐很多乐，你不必费那么大劲去一个个考察。选一个现成的。
3. 12.5ml的问题，并不是你一定要配到12.5ml。它是另外一个问题，你要把所有待测的样品都要配到相同体积，使反应时加入的反应试剂的浓度相同，是为了是反映的条件相同。
4.测定值偏高是正常的，可能是你的样品纯化不够，并不是只有黄酮和这些试剂反应，还有色素杂质本身在可见光部分有吸收。再纯化纯化吧。希望对你有用，多交流吧。
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我用三种不同的芦丁做出的标准曲线差不多，不过这些芦丁都是对照品。我现在订了一个国外的标准品试一下。因为测定值偏差太大，别人测出来是24％，居然我测出来是32.238％，太奇怪了。色素杂质的问题我也有想过，但是我有用石油醚萃过，把样品含的叶绿素基本上都萃掉了。还有用极性大的有机溶剂萃过5遍以上，所以我只能考虑是芦丁本身的问题了。另外我想问一下passion_666 ，到底应该在500nm还是在510nm下吸收最大？还有，理论上溶液的浓度应该是要配在吸收值0.3～0.6附近最好对吧？能不能提供一个你觉得比较好的标准曲线公式，我想参考一下，谢谢！
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1.芦丁的纯度，你可以上液相解决。2.500nm还是510nm,你应该做一个可见光部分的扫描，看最大吸收在哪里？每台机器有一定的偏差，从这个角度，你也应该做一个扫描。3.理论上没有规定样品的浓度，是根据你做的线性范围来确定，你的样品浓度应该在线性范围内，这里浓度和吸收度才成直线关系。4.我的标准曲线肯定不适合你（不是我吝啬），因为我们配的溶液虽然大体浓度一样，但是还是有差别的。你做标准曲线的时候，就是在测线性范围。而你每次测样品的时候不必都做标准曲线，也不必每次都用一个标准曲线，你每次测样品的时候，选择一、两个浓度的标准品，用一点法或者两点法做曲线。
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cryecnu,你提供的这个方法是卫生部颁布的标准,但我觉得这个方法有问题,最根本的是我并没有在360nm处看到总黄酮的吸收峰,从总黄酮的结构来看,其吸收峰应该在270nm左右.
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2.1 测定方法与步骤2.1.1标准曲线的制备
精密称取芦丁对照品（已于105℃恒重）3.4mg，用无水乙醇溶解，并稀释至50ml，做为对照溶液。吸取对照品溶液0ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml于6支25×250mm试管中，分别加无水乙醇至5ml，摇匀。各精确加入0.1mol/L三氯化铝溶液3.0ml及1mol/L醋酸钠溶液5.0ml，摇匀，静置40min，于波长420nm处测定吸收度，以为芦丁的mg数为横坐标，以吸光度为纵坐标作回归处理，得回归方程为：Y=1.9　 R2=0.9989。2.1.2样品的测定
分析天平上精密称取样品1000mg，置于索氏提取器中，用石油醚加热回流至无色，取出干燥。然后再用无水乙醇加热回流至无色，将提取液移入25 ml容量瓶中并定容。吸取5 ml于试管中，加入0.1mol/L三氯化铝溶液3.0ml及1mol/L醋酸钠溶液5.0ml，摇匀，静置40min，于波长420nm处测定吸收度，计算样品中的黄酮的含量。
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NaNO2、Alcl3、NaOH这三者之间的量该怎么考虑， 显色原理是什么？假如我在做其他复方药， 也可以不做方法学试验吗（指显色时间，显色剂加的量等）
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我在扫描波长时， 样品与标准品的最大吸收波长不一致，一般会相差5nm左右，但不是在申报新药时， 相差波长范围在多少？
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用荧光试试!
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黄酮种类太多，要在测定中具体分析的，不能划一
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cryecnu 2.
保健食品中总黄酮的测定Determination of total flavonoid in health food 1试剂1.1 聚酰胺粉1.2
芦丁标准溶液：
称取5.0mg芦丁，加甲醇溶解并定容至100mL，即得50mg/mL。1.3
乙醇:分析纯。1.4
甲醇:分析纯。2 分析步骤2.1 试样处理：称取一定量的试样，加乙醇定容至25mL，摇匀后，超声提取20min，放置，吸取上清液1.0mL，于蒸发皿中，加1g聚酰胺粉吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转入层析柱。先用20mL苯洗，苯液弃去，然后用甲醇洗脱黄酮，定容至25mL。此液于波长360nm测定吸收值。同时以芦丁为标准品，测定标准曲线，求回归方程，计算试样中总黄酮含量。2.2 芦丁标准曲线：
吸取芦丁标准溶液：0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于10mL比色管中，加甲醇至刻度，摇匀，于波长360nm比色。求回归方程，计算试样中总黄酮含量。3 计算和结果表示：
_____________________________
V1× M× 1000
X ___ 试样中总黄酮的含量, mg/100g ；
A ___ 由标准曲线算得被测液中黄酮量,mg ；
M ___ 试样质量 , g；
V1____ 测定用试样体积, mL；
V2 ___ 试样定容总体积, mL 。
计算结果保留二位有效数字。 我想知道这里面说的乙醇是多大浓度的 无水乙醇、95% 还是75% 还是70%
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黄酮类化合物有好多种，以芦丁为对照品去测定总黄酮很容易产生较大误差；而且无论你是用直接紫外法还是显色法，首先你得排除供试液中其他杂质对测定带来的干扰。
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关于丁香园查看: 32361|回复: 16
求助一个用芦丁标准曲线测黄酮含量的方法和具体步骤，急啊~
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最近我在做一个学生课题，要测定黄酮含量。对于芦丁标准曲线我是这样做的：称取0.010g芦丁，用30%乙醇溶解并定容至100ml 的容量瓶中，制成0.1mg/ml的芦丁标准溶液。
& & 分别吸取刚配制好的芦丁标液0.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0ml置于6个50ml的容量瓶中，依次编号0~5，用30%乙醇补至10ml后，加入0.8ml的5%的NaNO2摇匀，静置6分钟再加入0.8ml的10%的硝酸铝摇匀，静置6min，加入10ml的1mol/l的氢氧化钠，摇匀15min后显色置于510nm处分光光度计测吸光度。
& & 不知道是我试剂配得不准确还是什么原因，反正配的溶液有红色的絮状沉淀影响了我测定吸光度时的稳定性，吸光度一直时升时降的，不稳定，没法做标准曲线。我一直很困惑，也找不出什么原因造成的。我看我们师姐配的溶液没有絮状沉淀。她称的12mg芦丁用60%乙醇溶解定容的。
& & 还有氢氧化钠易于吸收空气中的二氧化碳，怎么去配制氢氧化钠溶液呢？我每次配的溶液或者刚刚配好的溶液都不清澈，静置一段时间后瓶底会有一些类似悬浮物的沉淀，是不是已经吸收了二氧化碳造成的呢？如何避免这种情况的发生？
& &谢谢了~
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别沉了，我自己捞起来
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这是卫生部的《保健食品检验与评价技术规范》2003版中的方法，我们一直在用:
芦丁标准溶液：称取5.0mg芦丁，加甲醇溶解并定容至100mL，即得50ug/mL。
准确吸取芦丁标准溶液0.0、0.50、1.00、2.00、4.00、5.00、7.00、9.00mL置于10mL容量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀， 在360nm波长处测定吸光值。求回归方程。
样品处理：称取一定量的样品，加乙醇定容至25mL，摇匀后，超声提取20min，放置，吸取上清液1mL，于蒸发皿中，加1g聚酰胺粉吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转入层析柱。先用20mL苯洗，苯液弃去， 然后用甲醇洗脱黄酮，定容至25mL。此液于360nm处测定吸收值，根据标准曲线计算样品中总黄酮的量。
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至于氢氧化钠配置，要求配置的水必须是煮沸的(就是为了赶二氧化碳)，至于二氧化碳配置后有类似悬浮物的沉淀，这是氢氧化钠试剂中带来的，与二氧化碳没有关系。正确的配置应该是先配置氢氧化钠饱和溶液，放置数日后，取上清液再稀释至所要的浓度，并标定。
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回复 3# luckzxy 的帖子
我老师说最好不用甲醇。我看好多杂志上也有用乙醇配的，至于黄酮的提取，我是加乙醇用超声波提取后，再旋转蒸发仪浓缩，水浴蒸干得黄酮样品
把未出口的“不可能”改成“我尽力”，“我争取”.....
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微量测定就是受试剂和操作的影响太大了
(yujiansp)
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请问芦丁与黄酮是否是同一物质，如不是怎么用芦丁做标准溶液，谢谢。
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可以参考下GBT 蜂胶中总黄酮的测定方法（分光光度法）
[ 本帖最后由 milya 于
10:56 编辑 ]
10:56 上传
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我也在做黄酮提取实验，我做的芦丁标准曲线很不准，不知道什么原因，我用乙醇溶解芦丁时，总感觉溶不了，好多漂浮的小颗粒，这是为什么？还有溶液提取后离心，在离心管底有好多黄绿色的东西，那是什么？求求各位帮个忙！！！急！！！！
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2003规范中保健食品总黄酮含量测定（360nm）根本就有问题，做得样品含量很低很低。这个标准肯定有问题
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回复 8# milya 的帖子
好人啊:) 正好我也急需。谢了
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回复 7# yujiansp 的帖子
黄酮是一类物质的总称，芦丁是其中的一种
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百科词条： （最后修订于 22:02:41）[共947字]摘要：水飞蓟宾说明书药品名称水飞蓟宾英文名称Silibinin别名水飞蓟素；西里马林；奶蓟素；利肝灵；利肝隆；利肝素；利加隆；西利马林；西利马灵；益肝灵；治肝快；水飞蓟总黄酮；Legalon；Silliver；Silybin；Silymarinum；Silymarin分类消化系统药物&肝脏疾病辅助治疗药物剂型片剂：每片35mg，38.5mg，70mg。水飞蓟宾的药理作用水飞蓟宾系从菊利植物水飞蓟（Silybummarianum）果实中提取分离而得的一种黄酮类化合物，具有明显的保护和稳定肝细胞膜的作用，可以改善肝功能，产生降酶效果，且不易发生酶反跳。水飞蓟宾能稳定肝细胞膜及保持其完整性，并可促进肝细胞超微结构复原，促进正常肝细胞的分裂及生长，提高肝细胞合成RNA及蛋白质的能力，提高网状内皮系统制造巨噬细胞的能力，并加强巨噬细胞的活性，加速病毒的清除。同时，水飞蓟宾可促进脂肪转移及抗氧化作用，防止脂肪过度氧化及浸润，减轻肝脏脂肪变性；并可促进肝脏的代谢功能，增强其解毒作用，降低毒物对肝细胞的损伤。因此，水飞蓟宾具有保护正常肝脏细胞、促进受损害细胞膜复原的功效。水飞蓟宾的药代动力学水飞蓟宾静......&&&
相关文献：摘要目的：建立一种用HPLC分离测定Legalon胶囊、益肝灵片、复方益肝灵片中水飞蓟宾、异水飞蓟宾、水飞蓟亭、水飞蓟宁含量的方法。方法：以Shim-PackVP-ODS(150mm×4.6mm，5μm）及预柱（10mm×4.6mm，5μm）为分析柱。甲醇与混合溶剂水-二氧六环(9∶1）按梯度洗脱为流动相，流速为1.5mL.min-1，检测波长为288nm，柱温为40℃。结果：样品中各组分的平均目的：建立测定人血浆中水飞蓟宾浓度的反相高效液相色谱法。方法：血样在pH8.5条件下经乙醚提取后，采用μBondapakC18(300mm×4.6mm)色谱柱，甲醇-乙腈-磷酸盐缓冲液(pH3.0)(29∶20∶51)为流动相，以萘酚为内标，检测波长288nm。结果：水飞蓟宾在3.695～236.5ng.mL-1范围内线性相关(r=0.9998)，方法回收率为96.5%，日内、日间RSD均小于2.【摘要】目的探讨虎杖与黄芪组方抗人疱疹病毒（HSV）时，其有效成分白藜芦醇与总黄酮之间的相互作用对药效的影响。方法以阿昔洛韦（ACV）为阳性对照，采用空斑减数实验，用中效作用原理对虎杖白藜芦醇与黄芪总黄酮合用抗Ⅱ型人疱疹病毒HSV-2333株的药效进行了分析。结果在Hep-2细胞系统中，ACV对HSV-2333株增殖抑制的ED50为10.85μg/ml。当虎杖白藜芦醇与总黄酮以1（Dm）白藜芦醇【摘要】目的利用三波长分光光度法测定银杏叶中总黄酮含量，并对4种不同溶剂超声提取银杏叶总黄酮的方法进行了比较研究。方法采用溶剂浸提同时辅以超声波处理的方法提取银杏叶总黄酮，根据AlCl3与黄酮类物质生成黄色化合物的反应原理，利用三波长法测定银杏叶总黄酮的含量。结果相同条件下甲醇、乙醇、丙酮和水的提取效率分别为0.22639%、0.24454%、0.24949%和0.18972%。黄酮显色液在1h水飞蓟宾是存在于牛奶蓟种子内的非毒性，潜在的化学预防剂。近日，来自科罗拉多大学的学者展示了最新的研究结果关于治疗结直肠癌的新潜力药物——口服水飞蓟宾（silibinin,从牛奶蓟中纯化提取），减慢结直肠癌干细胞生长的能力。水飞蓟宾治疗后采样的肿瘤干细胞重新注入到新模型上，细胞未能发展成具有同样侵袭性的肿瘤，即使在没有再服用水飞蓟宾的情况下。相关研究也在在美国癌症研究协会（AARC）上发表。在去年的【摘要】目的研究草珊瑚总黄酮的提取工艺。方法以草珊瑚为原料，用乙醇为溶剂，利用超声波辅助提取和水浴法提取草珊瑚总黄酮，利用L9（33）正交实验方法优化总黄酮提取工艺，采用单因素实验，测定了乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度等单因素实验，考察总黄酮提取率与各因素的关系。根据单因素实验得出的显著条件进行正交设计，确定最佳工艺条件。结果超声波法的最佳工艺条件为乙醇浓度50%、料液比1∶15、提取时间【摘要】目的观察山楂叶总黄酮对小鼠组织细胞脂蛋白脂酶表达影响。方法将小鼠随机分为正常对照组、吡咯列酮组、山楂叶总黄酮组（n=10），给药8天后，ELISA法检测血液、脂肪组织、肌组织所含LPL。结果与对照组相比，各组鼠血液中LPL均无明显改变（P0.05）;肌组织中吡咯列酮组LPL增高（P0.05），山楂叶总黄酮高、中、低组的LPL增高（P0.001、P0.01）;而脂肪组织中吡咯列酮组的LPL【摘要】　　目的　利用聚酰胺柱层析分离蜂胶中总黄酮，并运用紫外分光光度法(UV)对其进行含量测定。方法　利用聚酰胺柱层析，干法上样，分别用30％、95％不同浓度的乙醇进行洗脱，盐酸—镁粉反应定性检测及分光光度法定量测定，并对分光光度法进行了改进。结果　经定性检测，30％乙醇洗脱液几无黄酮，紫外分光光度法测量95％洗脱液中总黄酮的含量为0.956mg/ml。结论　利用聚酰胺柱层析初步纯化蜂胶中总黄【摘要】目的建立当飞利肝宁胶囊（当药、水飞蓟）中水飞蓟宾含量的方法。方法采用C18-BDS柱;流动相为甲醇-水-冰醋酸（50∶50∶0.5），检测波长为288nm，流速为1ml/min。结果水飞蓟宾对照品线性范围10.6～74.2μg，r=0.9994，平均回收率99.1%，RSD%=0.68%。结论本方法操作简便、准确、重复性好，可作为该制剂的定量分析方法。　　关键词当飞利肝宁胶囊水飞蓟宾高效摘要：目的建立广金钱草中总黄酮的含量测定方法。方法选用测定波长272nm，以6-C-葡萄糖-8-C-木糖洋芹素(vicenin-2)为对照品，采用柱色谱-紫外分光光度法对不同来源的广金钱草进行了总黄酮的含量测定。结果vicenin-2在10.8～25.2μg／mL具有良好的线性关系，回归方程为Y=0.(r=0.9999)，平均回收率为100.82%，RSD为1.3O%。结论[中文名称]葛根总黄酮[英文名称][别　　名][化学名称][分子式][分子量][物理性质][成分分类][药理作用]1．对心血管系统的作用（1）降血压作用静脉注射葛根总黄酮5～30mｇ／kｇ后，可使正常麻醉犬的血压下降，剂量增加，作用增强。给不麻醉的高血压犬静脉注射总黄酮也有一定的降压效果。给麻醉犬静脉注射葛根总黄酮也有一定的降压效果。给麻醉犬静脉注射葛根总黄酮20mｇ／kｇ后，可使血压下降、心率【摘要】目的建立飞廉药材中总黄酮的含量测定方法。方法利用黄酮类与亚硝酸钠及硝酸铝，在碱性条件下显色，采用比色法对不同产地飞廉中总黄酮的含量进行测定。结果芦丁浓度在0.2mg/ml范围内与吸收度呈良好的线性关系，平均回收率为100.3%，RSD为0.71%。结论该法重复性好，结果准确可靠，可作为飞廉质量控制的方法。【关键词】飞廉;总黄酮;比色法　Determinationoft【摘要】　　目的银曲胶囊中银杏总黄酮醇苷的含量测定。方法用高效液相色谱法（HPLC）和DAD紫外检测器测定银曲胶囊中总黄酮醇苷的含量。结果槲皮素浓度在9.60～76.80μg/ml，山柰素在7.33～58.62μg/ml，异鼠李素在1.76～14.08μg/ml之间浓度与峰面积呈良好的线性关系。结论根据3批样品的检测结果，规定银曲胶囊中总黄酮醇苷的含量不低于6mg/粒。　　【关键词】银曲胶囊总黄【摘要】目的对鱼腥草进行微波辅助处理，考察微波作用对鱼腥草总黄酮提取的影响。方法实验中以总黄酮的提取量为考察指标，考察微波功率、微波作用时间、溶剂用量、水浸泡时间等因素的影响。结果鱼腥草用微波火力640w、微波作用时间5min、固液比1:40（g/ml)及浸泡时间60min，鱼腥草中总黄酮的提取效果最佳。结论本实验所用方法为鱼腥草总黄酮提取的最佳工艺条件。?　　【关键词】鱼腥草；总黄酮；微波；萃［摘要］目的比较四种黄酮类物质抗氧化能力和防止晚期糖化终末产物的形成能力。方法通过对黄连素，槲皮素，水飞蓟宾和水飞蓟素四种不同的黄酮类中药对肝匀浆中丙二醛（MDA）生成和晚期糖化终末产物（AGE）生成的抑制作用的研究，比较四种黄酮类物质预防糖尿病并发症的能力。结果水飞蓟素具有很好的抑制肝匀浆中丙二醛（MDA）生成和晚期糖化终末产物（AGE）生成作用，其IC50分别为2×10-10g.ml和5.6×【摘要】　　目的：探讨水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物(Silybin-PhosphatidylcholineCompound，SPC)对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤的保护作用。方法：采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型；以伪手术组做对照，观察两种剂量的SPC对大鼠脑缺血-再灌注损伤模型，脑组织含水量、病理学改变、细胞调亡的影响。结果：除伪手术组外各组受试大鼠均出现明显脑水肿改变。模型组脑组织含水量明显【关键词】桑白皮;总黄酮;正交设计;提取工艺桑白皮是桑科植物桑(MorusalbaL.)的干燥根皮，为一常用中药，性甘、寒，归肺经，具有泻肺平喘、利水消肿功能，主治肺热喘咳、水肿胀满尿少、面目肌肤浮肿。近年来，国内外学者对桑白皮的药理活性进行了大量研究，并找到了一系列有效成分。桑白皮主要含多种黄酮类成分，包括桑酮、桑酮醇、桑根酮、桑根酮醇、桑素、桑皮根素等。文献报道其总黄酮具有利尿、降压、降糖、本报北京讯记者马艳红报道记者日前从北京大学世佳研究中心了解到，针对近年来很多中药研究机构和生产企业在工艺研究和生产中发现《中国药典》所载淫羊藿总黄酮含量测定方法存在“假阳性”现象，从而导致淫羊藿总黄酮转移率过低的问题，该中心科研人员在2005年版《中国药典》所载方法的基础上进行了改进研究。研究发现，采用D-101大孔树脂对药材样品液进行除杂处理后，能有效地去除样品液中非黄酮类成分的干扰，从而使药蒙药地锦草总黄酮提取工艺研究地锦草为大戟科植物地锦Euphorbiaehumifusaewilld．的干燥全草。具有止血、燥湿“协日乌素“、愈伤、清脑、清脉热的功能。用于便血、创伤出血、衄血、吐血、肺脓疡、咯脓血痰、中风等。是蒙医常用药之一，如意至宝丸（额尔郭乌日勒）等方剂的主要药。地锦草主要含槲皮素甙及素、山奈素甙及素、地锦草素等黄酮类化合物。其煎剂、醇提液及地锦草素均有抗菌、止血等作用。我们【摘要】考察提取时间、加水量、浸泡时间、静置时间对总黄酮含量的影响，对溪黄草的提取工艺进行了优化研究。优化研究结果显示为浸泡6h,提取2次,第一次加10倍量水,第二次加8倍量水,醇沉24h。【关键词】溪黄草；提取工艺；优化；总黄酮溪黄草中含有重要的生理活性物质二萜类和黄酮类，能清热利湿、凉血散瘀，有抗炎、抗菌、抗病毒、抗肿瘤及护肝等作用，主要用于急性肝炎、胆囊炎、肠炎、痢疾、跌打瘀肿等［1］，是【摘要】目的优选葛花中总黄酮的提取方法。方法采用正交试验法，以提取物中总黄酮的含量为指标进行试验。结果优选出从葛花中提取总黄酮的最佳方法为:用40倍量的50%乙醇在80℃浸提1.5h。结论该方法提取总黄酮的含量较高，重现性好。　　关键词葛花黄酮正交试验　　Orthogonaltestforoptimizationoftotalflavonefromflospuerariae　　CaoXiaofa日《中华内分泌代谢杂志》-期-221-223页医学空间（）9月4日消息，该项研究目的是观察淫羊藿总黄酮对去卵巢大鼠骨组织核心结合因子α1（Cbfa1）表达的影响。方法采用将54只雌性SD大鼠分成6组：假手术组、模型组、尼尔雌醇组、淫羊藿总黄酮低、中、高剂量组。对尼尔雌醇组和淫羊藿总黄酮低、中、高剂量组分别给予尼尔雌醇（0．1mg·kg[中文名称]刺五加总黄酮[英文名称][别　　名][化学名称][分子式][分子量][物理性质][成分分类][药理作用]1．耐缺氧作用小鼠腹腔注射刺五加总黄酮水溶液0．2ml，1h时后移入密闭瓶内，与对照组比较可延长小鼠存活时间1．52％。减压缺氧试验表明，腹腔注射刺五加黄酮水溶液0.2ml对置于低压氧仓内的小鼠按每秒上升高1．60kPa观察lh后其存活率为61．1％，而对照组为26．6％。2．对心冠心病的发病率，可用于治疗高血压引起的颈项强痛、头痛、头晕及心绞痛，也可治疗早期神经性耳聋［12～14］。1提取方法讨论葛根中除了异黄酮化合物外还含有淀粉，约占15%～19%，其为主要杂质影响葛根总黄酮的含量。最早，柴田乘二等［15］提取纯化葛根总黄酮是采用甲醇热回流，醋酸铅沉淀法。Jun-eiKingjo等［5］采用甲醇热回流提取，水饱和正丁醇萃取法精制葛根总黄酮。郭建平等［16］比较了以甲醇脂质体iv后药物在血液中的滞留时间与喜树碱溶液相比显著延长，且在小鼠脑等器官中的分布显著增加。喜树碱固体脂质纳米粒有一定主动靶向作用，有助于对淋巴癌和脑肿瘤等疾病的治疗。水飞蓟宾(SLB)是从菊科植物水飞蓟果实中提取分离到的黄酮类化合物，具有明显的保护和稳定肝细胞的作用，对各种肝脏疾病都有不同程度的治疗，临床主要用于急慢性肝炎的治疗。余江南等制备了水飞蓟宾脂质纳米粒并建立了其在小鼠肝脏中药物浓度【摘要】目的建立复方益肝灵片中水飞蓟宾的含量测定方法。方法采用HPLC法，ODSC18（4.6mm×250mm，5μm），以甲醇-水-冰醋酸（48∶52∶1）为流动相，流速1.0ml·min-1，检测波长287nm。结果水飞蓟宾在13.75～110.00μg·ml-1的进样浓度范围内与其峰面积呈良好的线性关系（r=0.9998），平均回收率为97.10%（RSD=0.63%，n=6）。结论该方法操【摘要】目的：建立蒲公英中总黄酮的含量测定方法。方法：应用双波长薄层色谱扫描法，以芦丁为对照品，测定波长λs=278nm，参比波长λR=356nm，测定蒲公英中总黄酮的含量。结果：回归方程为Y=.593，r=0.999，RSD=2.6％，蒲公英总黄酮含量为4.236%。结论：用该方法测定蒲公英中总黄酮的含量，操作简便，结果可靠，重复性好。【关键词】双波长薄层色谱扫描法　总黄酮性减退，并具有各种神经症状和行为障碍。伴随社会老龄化的进程，AD的发病率逐年上升，已经成为严重的社会问题。中科院新疆理化技术研究所资源化学研究室科研人员从棉花的花瓣中提取纯化制成的有效部位——草花总黄酮，经研究发现该有效部位可用于抗老年痴呆的研究，目前该研究室已完成了草花有效部位抗老年痴呆临床前研究工作，包括草花药材指纹图谱、薄层鉴别项和含量测定项、草花总黄酮片剂的成型工艺研究、草花原料药、制剂【摘要】　　目的观察槐角总黄酮提取物对中老年女性骨质疏松症的临床疗效。方法随机选择40例原发性骨质疏松症中老年女性患者，给予槐角总黄酮提取物颗粒胶囊制剂治疗，每次1粒（每粒含异黄酮30mg），每日3次，连续服用6个月。同时选40例给予口服葡萄糖酸钙片每次500mg，每日3次，连续服用6个月做对照。结果治疗组疗效明显优于对照组（P<0.01）。结论槐角总黄酮提取物颗粒胶囊制剂治疗原发性骨质疏松症中摘　要　研究了从银杏叶中提取总黄酮甙和萜内酯等有效成分的4种方法，即(1)水提-醇沉-酯萃法；(2)丙酮-盐水-提取法；(3)醇提-酯萃法；(4)乙醇提取-树脂吸附法。其中方法(3)和(4)已经中试，提取物总黄酮质量分数分别为26.20%、31.62%。萜内酯质量分数为6%，达到德国同类产品质量要求.关键词　银杏叶；提取；总黄酮我国是银杏的故乡，拥有世界70%以上的储量，湖北、江苏、江西，浙江、日《中华中医药杂志》2008年第23卷第3期医学空间（）9月25日消息，中国研究者正积极探讨黄芪总黄酮对高糖培养下的牛视网膜血管周细胞凋亡的影响。他们采用以在体外培养3代融合的牛视网膜血管周细胞为对象，分为正常对照组、高糖组（25mmol／L）、干预组不同浓度黄芪总黄酮组（0．25、0．5、1．0、2．0mg／ml），孵育6d，采用TUNEL法检测培养型紫外可见分光光度计，测定波长272nm处吸光度。结果：方法重复性、稳定性、精密度、回收率试药均符合有关规定。结论：方法简单、快捷、精确，可作为石淋通片质量控制方法之一。【关键词】紫外分光光度法；总黄酮styracifolium(Osb.)Merr.的干燥地上部分，具有清热除湿、利尿通淋之功效。用于治疗各种淋证、水肿等疾病历史悠久，含黄酮类、生物碱类、皂苷类、酚类等成分。药理研究证明，广金钱草有【摘要】本文以总黄酮的含量为指标，对侧柏叶生品及不同炮制品进行比较，为寻求较合理的炮制工艺提供一个方面的实验依据。【关键词】侧柏叶；炮制；总黄酮侧柏叶性寒，味苦、涩，具凉血止血，生发乌发之功效。用于吐血衄血，咯血，便血，崩漏下血，血热脱发，须发早白。侧柏叶的炮制方法历代本草记载多种，现代临床主要用生品、烘品、炭品等。本文以侧柏叶中总黄酮含量为指标，对侧柏叶生品及不同炮制品进行了测定比较，结果报告贵州黄褐毛忍冬与红腺忍冬品质对比研究PDF　［摘要］目的贵州黄褐毛忍冬与不同产地红腺忍冬总黄酮含量比较研究。方法采用紫外分光光度法。结果贵州黄褐毛忍冬与不同产地红腺忍冬中总黄酮含量差异较大。结论贵州各产地黄褐毛忍冬总黄酮含量均高于红腺忍冬的含量。　　［关键词］黄褐毛忍冬；红腺忍冬；芦丁；紫外分光光度法　　ComparativestudyonthequalitybetweenLoniceraful目的建立霉茶缓释片的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱，更有效地监控其质量。方法采用梯度洗脱法,对霉茶缓释片进行HPLC测定,检测波长292nm，流动相为乙腈-0.2%磷酸线性梯度洗脱对霉茶缓释片中总黄酮进行指纹图谱测定。采用中国药典委员会推荐的中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(版本:2004A)进行比较计算。结果通过软件的比较,霉茶缓释片的指纹图谱相似度均大于0.90，建立霉茶缓释片中总黄酮的目的：制订肿节风片质量标准。方法：紫外分光光度法测定了总黄酮的含量，对肿节风药材进行了薄层色谱鉴别。结果：加标回收率平均98.1%(RSD=2.3%,n=6),r=0.99996，重复性RSD=1.23%(n=6),精密度RSD=1.14%([WTBX]n=6)结论：方法稳定、可靠，可作为该制剂的质量控制方法之一。关键词　总黄酮；含量测定；肿节风；薄层色谱鉴别Studyofqualitystan中国医药报讯　日前，吉林大学生命科学院与吉林省药品检验所首次从榛花中提取出总黄酮，并证实其对超导氧阴离子自由基（O2-·）和羟基自由基（·OH）均有较强的清除能力，表现出较强的抗氧化活性。　　榛花为榛子的雄花，是数种中成药中的主药，用于治疗糖尿病、肝病等。林大学生命科学院与吉林省药品检验所通过正交试验设计确定了榛花总黄酮的提取的最佳条件，并采用邻苯三酚自氧化法等方法，观察了榛花总黄酮清除O2-·差异有显著性，具体结果见表1、表2。另外治疗后两组患者的体重均有所下降。　　表1两组患者治疗前后TG、TC、ALT、AST值　略　　表2两组患者治疗前后疗效比较略　　3讨论　　水飞蓟素是从菊科植物水飞蓟种子中提取的一种黄酮类化合物，水飞蓟宾是水飞蓟素的主要成分，药理作用最强。研究表明它具有明显的保护和稳定肝细胞膜的作用，对四氯化碳、硫代乙酰胺、鬼笔碱、猪屎豆碱等肝脏毒物引起的各种类别肝损伤，均有海南亚洲制药有限公司研究出从三七叶中提取总黄酮的制备方法：将三七叶水煎煮提取，提取液过大孔吸附树脂吸附，碱溶液洗下黄酮从而将黄酮与皂昔分离，获得三七叶总皂苷，其中主要含有山奈酚－3－o－BD－半乳糖(2－1)葡萄糖昔、槲皮素－3－o－BD－半乳糖(2－1)葡萄糖苷、山奈酚－3－o－BD－半乳糖苷、山柰酚－7－o－a－L－鼠李糖苷。制备高效表达重组蜱抗凝肽北京华特森基因科技有限公司的研究人员研究出【摘要】建立了高效液相色谱化/电喷雾电离-质谱定性分析射干总黄酮的方法，通过质谱识别了其中的5种化学成分。结果表明射干的总离子流色谱图和紫外色谱图相比具有一定的特征性，以质谱作为检测器是一种很好的研究中药指纹图谱的方法。【关键词】高效液相色谱/电喷雾电离-质谱;射干　Shegantotalflavonoidsinthehighperformanceliquidchromatography/ele蒙药地锦草总黄酮提取工艺研究地锦草为大戟科植物地锦Euphorbiaehumifusaewilld．的干燥全草。具有止血、燥湿“协日乌素“、愈伤、清脑、清脉热的功能。用于便血、创伤出血、衄血、吐血、肺脓疡、咯脓血痰、中风等。是蒙医常用药之一，如意至宝丸（额尔郭乌日勒）等方剂的主要药。地锦草主要含槲皮素甙及素、山奈素甙及素、地锦草素等黄酮类化合物。其煎剂、醇提液及地锦草素均有抗菌、止血等作用。我们中国医药报江苏讯　近年来，可活血调经的中药珍珠菜被发现具有一定的抗肿瘤功效。最近，苏州大学药学院的唐丽华副教授等人，以白血病H-60细胞为观察对象，证实该药的主要成分珍珠菜总黄酮苷能诱导白血病H-60细胞凋亡。该研究的完成有利于人们进一步认识珍珠菜的抗肿瘤机制。　　珍珠菜是报春花科植物虎尾珍珠菜的根或全草，具有清热利湿、活血散瘀、解毒消痈之功效，主要含有黄酮苷、皂苷、有机酸等化合物。近年来，有国用近年来得到很大发展。微波技术应用于植物细胞破壁，有效地提高了收率，取得了令人可喜的进展。我们首次运用微波技术辅助测定水罗伞(豆科植物干花豆FordiacaulifloraHemsl．的干燥根)中总黄酮的含量，现报道如下。　　1材料　　916型紫外可见分光光度计(澳大利亚GBC公司)；MAS—I型常压微波反应器(上海新仪微波化学科技有限公司产品)。水黄皮素对照品：水黄皮素(3一甲氧基水黄皮素)从ournalofResearchonChinese中文摘要】正中药指纹图谱是指中药所共有的特征性的某类化学成分的色谱或光谱的特征性图谱。目前,指纹图谱的测定多采用高效液相色谱法,评价指标一般为各共有色谱峰定量化表征参数,如保留时间、峰面积或峰高值,缺乏各共有色谱峰定性量化的表征参数,难以体现指纹图谱整体性。本文以葛根黄酮中有效成分【DOI】CNKI:SUN:003.0.作者：海南亚洲制药有限公司研究出从三七叶中提取总黄酮的制备方法：将三七叶水煎煮提取，提取液过大孔吸附树脂吸附，碱溶液洗下黄酮从而将黄酮与皂昔分离，获得三七叶总皂苷，其中主要含有山奈酚－3－o－BD－半乳糖(2－1)葡萄糖昔、槲皮素－3－o－BD－半乳糖(2－1)葡萄糖苷、山奈酚－3－o－BD－半乳糖苷、山柰酚－7－o－a－L－鼠李糖苷。制备高效表达重组蜱抗凝肽北京华特森基因科技有限公司的研究人员研究出日中华内分泌代谢杂志2006Vol.22No.3P.213-21712（上海）为了观察淫羊藿总黄酮(HEF)对去卵巢大鼠骨组织中Ⅰ型胶原蛋白代谢及组织蛋白酶K表达的影响。研究者将54只雌性SD大鼠随机分成6组.假手术组为阴性对照组，其余各组切除卵巢后分别不给予或给予HEF(每日40，80和160mg/kg)和尼尔雌醇(每日0.1mg/kg)治疗12周。测定大鼠全身骨密度和尿N。　　3讨论　　野西瓜是新疆地区作为治疗类风湿关节炎的常用民族药物。实践证明具有较好的疗效，但也具有较强的毒副作用，用药途径多为外敷。尽管国外对其化学、药理研究较多，国内研究有待深入。本文所建立的总黄酮含量测定方法，样品前处理简单，重复性好，可以作为野西瓜中总黄酮的含量测定方法。结果表明不同产地野西瓜中总黄酮含量有较大差别，这从一方面说明其内在品质存在较大差异。应加强对野西瓜化学、药理研究，完善由棉花制成的各种纺织品无处不在，而我区科研人员最新发现棉花的新功用：棉花花瓣内含有丰富的黄酮类化合物，在对抗老年痴呆症方面有奇效。日前，中科院新疆理化技术研究所与新疆维吾尔药业有限责任公司举行我区首个国家五类新药——“棉花花总黄酮片”药物临床试验批件成果转让仪式，标志着棉花花瓣变废为宝成为现实。　　此次，中科院新疆理化所与该公司就开发五类重要新药棉花花总黄酮（原料）、棉花花总黄酮片达成转让协议，搅拌作用等，可加速植物材料中的有效成分进入溶剂，从而增加有效成分的提取率，缩短提取时间，并且还可避免高温对提取成分的影响。超声技术应用于提取大蒜中黄酮类物质的研究尚未见报道，本文报道用超声波提取大蒜总黄酮及鉴别。1仪器与试剂1．1仪器KQ5200DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；UV-755B紫外可见分光光度计(上海分析仪器总厂)；ZF-I型三用紫外分析仪(上海顾村光电仪器厂)；【摘要】目的应用溶出度测定法测定不同成型方法制备的茱萸胶囊剂中总黄酮含量，根据测定的总黄酮含量优选茱萸胶囊应采用的成型方法及建立相应的质量标准。方法应用ZRS-8智能溶出试验仪配合752-紫外光栅分光光度计测定黄酮的溶出度。结果实验测定每克茱萸汤胶囊在30min溶出度为:全粉末法:102.54010mg,颗粒法:103.928mg,颗粒法(加淀粉)101.5477mg,固体分散法:100.842银杏叶片为银杏叶提取物经加工制成的片。2005版《中国药典》含量测定项下：总黄酮醇苷色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4%磷酸溶液（50：50）为流动相；检测波长为360nm。理论板数按槲皮素峰计应不低于2500。供试品溶液的制备：取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约相当于总黄酮苷19.2mg的粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，密塞
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