请详细请回答1988剧情详细MCF-7细胞的背景,以及选用它做细胞实验的优势是什么

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人乳腺癌细胞MCF7[MCF-7]细胞
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&1元 RMB (人民币)
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英文名称:
&人乳腺癌细胞MCF7[MCF-7]细胞
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人乳腺癌细胞MCF7[MCF-7]细胞
细胞中文名称 人乳腺癌细胞
细胞英文名称 MCF7 [MCF-7]
细胞形态特征 上皮样
细胞生长特性 人乳腺癌细胞MCF7[MCF-7]细胞贴壁生长
细胞特种特性 该细胞是从一名69岁的白人女性乳腺癌患者的胸腔积液中分离建立的。该细胞保留了多个分化乳腺上皮的特性,包括:能通过胞质雌激素受体加工雌二醇并能形成隆突结构(domes);该细胞表达WNT7B癌基因;TNF-&可以抑制MCF-7细胞的生长;抗雌激素处理能调节细胞胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)的分泌
培养基 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)
血清 10%FBS
细胞传代方法 1:3~1:6传代;每周2~3次
细胞传代情况 C5
细胞冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
公司所售细胞均为原代细胞、传代细胞,非细胞系。细胞经过严格的控制(从组织来源、实验室条件等方面),人乳腺癌细胞MCF7[MCF-7]细胞纯度可达98%。不同的细胞传代次数不一。多数细胞种类是从胚胎提取,于原代(或二代)冻存在液氮中。细胞采用干冰运输,客户收到细胞后,从干冰中取出放入液氮中保存,待实验安排好后,解冻后即可以进行复苏培养。公司实验室的细胞、培养基都是经过严格检验,分离、配制而成,产品质量过硬。
运输与保存:本品使用10%DMSO冻存液冷冻,采用干冰保存运输,收到细胞后,如果不立即复苏,请将细胞放入液氮中保存待用。切勿置于室温下,以免造成DMSO损伤,避免反复冻融。
人乳腺癌细胞MCF7[MCF-7]细胞复苏方法:取出冻存管后,投入37&℃水浴中,震荡解冻2&min,酒精消毒管壁外侧后,将其转入超净台中,将管内细胞转移至离心管中,加入5&ml&37&℃预热的培养基,并清洗冻存管一次,将离心管离心(1000&rpm,5&min),弃去上清液,再加入2&ml培养基,转入培养瓶中培养。
注意事项:(1)&本产品只供科研使用,不可应用于临床;(2)&严格无菌操作。
预定时间:请至少提前一周预定,更多的订货信息请与我们联系。
白介素2(IL2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 2 (IL2) 48T/96T Y10516 S Porcine (Pig)
白介素4(IL4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 4 (IL4) 48T/96T Y10517 S Porcine (Pig)
白介素6(IL6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 6 (IL6) 48T/96T Y10518 S Porcine (Pig)
白介素8(IL8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 8 (IL8) 48T/96T Y10519 S Porcine (Pig)
表皮生长因子(EGF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Epidermal Growth Factor (EGF) 48T/96T Y10520 S Porcine (Pig)
促生长激素释放激素(GHRH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Hormone Releasing Hormone (GHRH) 48T/96T Y10521 S Porcine (Pig)
干扰素&(IFN&)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 48T/96T Y10522 S Porcine (Pig)
基质金属蛋白酶9(MMP9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9) 48T/96T Y10523 S Porcine (Pig)
内皮素1(EDN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Endothelin 1 (EDN1) 48T/96T Y10524 S Porcine (Pig)
脑钠素(BNP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Brain Natriuretic Peptide (BNP) 48T/96T Y10525 S Porcine (Pig)
生长激素(GH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Hormone (GH) 48T/96T Y10526 S Porcine (Pig)
生长抑素(SST)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Somatostatin (SST) 48T/96T Y10527 S Porcine (Pig)
瘦素(LEP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Leptin (LEP) 48T/96T Y10528 S Porcine (Pig)
&-内啡肽(&EP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Beta-Endorphin (bEP) 48T/96T Y10529 Homo sapiens (Human)
超氧化物歧化酶1(SOD1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Superoxide Dismutase 1, Soluble (SOD1) 48T/96T Y10530 Cavia (Guinea pig )
&-内啡肽(&EP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Beta-Endorphin (bEP) 48T/96T Y10531 Mus musculus (Mouse)
胰岛素(INS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Insulin (INS) 48T/96T Y10532 S Porcine (Pig)
胰岛素样生长因子1(IGF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 1 (IGF1) 48T/96T Y10533 S Porcine (Pig)
胰岛素样生长因子2(IGF2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 (IGF2) 48T/96T Y10534 S Porcine (Pig)
胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 3 (IGFBP3) 48T/96T Y10535 S Porcine (Pig)
载脂蛋白A2(APOA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Apolipoprotein A2 (APOA2) 48T/96T Y10536 S Porcine (Pig)
脂联素(ADP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adiponectin (ADP) 48T/96T Y10537 S Porcine (Pig)
肿瘤坏死因子&(TNF&)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa) 48T/96T Y10538 S Porcine (Pig)
脂质转运蛋白(CETP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cholesteryl Ester Transfer Protein (CETP) 48T/96T Y10539 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
神经型一氧化氮合酶(NOS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal (NOS1) 48T/96T Y10540 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
转化生长因子&1(TGF&1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 1 (TGFb1) 48T/96T Y10541 S Porcine (Pig)
丙酮酸脱氢酶磷酸酶(PDP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase (PDP) 48T/96T Y10542 Rattus norvegicus (Rat)
&2-纤溶酶抑制因子(&2PI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha-2-Plasmin Inhibitor (a2PI) 48T/96T Y10543 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
Ⅱ型前胶原羧基端原肽(PⅡCP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Procollagen II C-Terminal Propeptide (PIICP) 48T/96T Y10544 Rattus norvegicus (Rat)
60kD热休克蛋白(HSPD1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Heat Shock 60kD Protein 1, Chaperonin (HSPD1) 48T/96T Y10545 Chicken (Gallus)
90kDa热休克蛋白&1(HSP90&1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Heat Shock Protein 90kDa Beta 1 (HSP90b1) 48T/96T Y10546 Rhesus monkey (Simian)
B-淋巴细胞激活抗原B7-2(LAB7-2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for B-Lymphocyte Activation Antigen B7-2 (LAB7-2) 48T/96T Y10547 B Bovine (Cattle)
P选择素(SELP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Selectin, Platelet (SELP) 48T/96T Y10548 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
&-乳清蛋白(&LA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha-Lactalbumin (aLA) 48T/96T Y10549 Mus musculus (Mouse)
神经介素S(NMS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuromedin S (NMS) 48T/96T Y10550 S Porcine (Pig)
促卵泡素(FSH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Follicle Stimulating Hormone (FSH) 48T/96T Y10551 Homo sapiens (Human)
促肾上皮质激素释放激素(CRH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Corticotropin Releasing Hormone (CRH) 48T/96T Y10552 Homo sapiens (Human)
促肾上腺皮质激素(ACTH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adrenocorticotropic Hormone (ACTH) 48T/96T Y10553 Homo sapiens (Human)
促肾上腺皮质激素(ACTH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adrenocorticotropic Hormone (ACTH) 48T/96T Y10554 Mus musculus (Mouse)
促肾上腺皮质激素(ACTH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adrenocorticotropic Hormone (ACTH) 48T/96T Y10555 Rattus norvegicus (Rat)
促甲状腺素释放激素(TRH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thyrotropin Releasing Hormone (TRH) 48T/96T Y10556 S Porcine (Pig)
促生长激素释放激素(GHRH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Hormone Releasing Hormone (GHRH) 48T/96T Y10557 Rattus norvegicus (Rat)
促性腺激素释放激素(GnRH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Gonadotropin Releasing Hormone (GnRH) 48T/96T Y10558 Homo sapiens (Human)
催乳素(PRL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prolactin (PRL) 48T/96T Y10559 Rattus norvegicus (Rat)
催乳素(PRL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prolactin&人乳腺癌细胞MCF7[MCF-7]细胞(PRL) 48T/96T Y10560 Mus musculus (Mouse)
催乳素(PRL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prolactin (PRL) 48T/96T Y10561 Homo sapiens (Human)
抵抗素(RETN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Resistin (RETN) 48T/96T Y10562 Homo sapiens (Human)
抵抗素(RETN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Resistin (RETN) 48T/96T Y10563 Rattus norvegicus (Rat)
抵抗素(RETN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Resistin (RETN) 48T/96T Y10564 Mus musculus (Mouse)
多巴胺(DA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dopamine (DA) 48T/96T Y10565 General
蛋白酶激活受体2(PAR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protease Activated Receptor 2 (PAR2) 48T/96T Y10566 Homo sapiens (Human)
胱天蛋白酶8(CASP8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Caspase 8 (CASP8) 48T/96T Y10567 Homo sapiens (Human)
S100钙结合蛋白A11(S100A11)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A11 (S100A11) 48T/96T Y10568 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
S100钙结合蛋白B(S100B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein B (S100B) 48T/96T Y10569 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
白介素10(IL10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 10 (IL10) 48T/96T Y10570 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
白介素1&(IL1&)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 1 Beta (IL1b) 48T/96T Y10571 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
白介素4(IL4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 4 (IL4) 48T/96T Y10572 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
白介素6(IL6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 6 (IL6) 48T/96T Y10573 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
白介素8(IL8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 8 (IL8) 48T/96T Y10574 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
白血病抑制因子受体(LIFR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Leukemia Inhibitory Factor Receptor (LIFR) 48T/96T Y10575 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
肾上腺素(EPI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Epinephrine (EPI) 48T/96T Y10576 General
表皮生长因子受体(EGFR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR) 48T/96T Y10577 Mus musculus (Mouse)
骨钙素(OC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Osteocalcin (OC) 48T/96T Y10578 S Porcine (Pig)
骨钙素(OC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Osteocalcin (OC) 48T/96T Y10579 Mus musculus (Mouse)
补体成分3(C3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Component 3 (C3) 48T/96T Y10580 S Porcine (Pig)
单核细胞趋化蛋白1(MCP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Monocyte Chemotactic Protein 1 (MCP1) 48T/96T Y10581 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
缓激肽(BK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Bradykinin (BK) 48T/96T Y10582 Rattus norvegicus (Rat)
干扰素&(IFN&)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 48T/96T Y10583 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
肝细胞生长因子(HGF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hepatocyte Growth Factor (HGF) 48T/96T Y10584 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶5(NOX5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 5 (NOX5) 48T/96T Y10585 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
基质金属蛋白酶9(MMP9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9) 48T/96T Y10586 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
甲状旁腺激素(PTH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Parathyroid Hormone (PTH) 48T/96T Y10587 Homo sapiens (Human)
组织金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1 (TIMP1) 48T/96T Y10588 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
脂蛋白关联磷脂酶A2(LpPLA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phospholipase A2, Lipoprotein Associated (LpPLA2) 48T/96T Y10589 C Canine (Dog)曲志博,刘连新,陈炜,郭化鑫,杨海彦,潘尚哈,
哈尔滨医科大学第一临床医学院普通外科,
医药、卫生
目的观察不同浓度的三氧化二砷(As2O3)作用不同时间后对乳腺癌细胞系MCF-7的影响及其作用机理。方法应用不同浓度的As2O3作用于乳腺癌细胞后,观察As2O3对乳腺癌细胞生长状态的影响;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察其对MCF-7细胞增殖的影响;应用琼脂糖凝胶电泳和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测As2O3对MCF-7细胞凋亡的诱导作用。结果不同浓度的As2O3作用于乳腺癌细胞有明显的时间和剂量依赖性,As2O3作用后细胞生长明显受抑制,并出现明显的凋亡特征性改变(细胞膜完整、染色质固缩、核碎裂、凋亡小体形成);经1、2、4及8μmol/L4个剂量的As2O3处理48h后,琼脂糖凝胶电泳检测到细胞发生凋亡时DNA降解形成梯形分子条带;4μmol/LAs2O3作用24、48及72h后TUNEL法可检测到细胞凋亡水平显着性升高。结论As2O3可明显抑制乳腺癌细胞的生长,其机理主要是诱导乳腺癌细胞凋亡。MCF-7人乳腺癌传代形式细胞株
MCF-7人乳腺癌传代形式细胞株[详细参数]
库存数量: 24
产品规格: 1*10(6)/ml
产品包装: 泡沫盒装
产&&&&地: 021-
发货地点: QQ
付款方式: 网上支付
运费说明: 买家承担
分类: 诊断试剂
品牌: ATCC、DSMZ等细胞库
用途范围: 细胞相关科研实验研究
级别: 超纯、高纯
含量: 90-95%
产品规格: 1*10(6)/ml
MCF-7人乳腺癌传代形式细胞株[详细内容]
MCF-7人乳腺癌传代形式细胞株
细胞编号: C4400 细胞缩写: MCF-7细胞 细胞名称: MCF-7(乳腺腺癌细胞) T25培养瓶发货形式是用T25细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后,拆开包装T25培养瓶的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用,如细胞密度高于80%,可以直接消化传代,相反则加入5-6ml培养基放回培养箱继续培养即可。背景资料: MCF-7细胞保留了多个分化了的乳腺上皮的特性,包括:能通过胞质雌激素受体加工雌二醇并能形成圆形复合物(domes)。该细胞含有Tx-4癌基因。肿瘤坏死因子α(TNF alpha)可以抑制MCF-7细胞的生长。抗雌激素处理细胞能调变IGFBP’S的分泌。 细胞来源: 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系 "购买细胞注意事项:1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,MCF-7人乳腺癌传代形式细胞株显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。" P4 包装规格: 复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管(两支) 细胞规格: 1*10(5)/ml――1*10(6)/ml 离心管发货形式是用15ml离心管发货的形式,只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用(如果实验室没有T25培养瓶,可以暂时T75 培养瓶,加入10-15ml培养基,,建议10ml培养基,也可以使用T175 培养瓶,加入50-60ml培养基,培养瓶越大,需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话,一般不用大瓶子,先用小瓶子养起来再换大的,不然会长得很慢,严重的,会导致细胞死亡等危险),平衡完成后,离心(1000rpm,3min)收集细胞,弃上清,用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中,放回培养箱继续培养。生物安全级别: 1 细胞种属: 人 组织来源: 腺癌,乳腺,胸水 细胞形态: 上皮细胞样 T25瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境,同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁,此步骤非常必要。T25瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞,可以收集上清后离心(1200rpm,5min)后,将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。 贴壁 细胞融合度: 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion),冻存液中含有DMSO请使用细胞级DMSO,同时浓度不要太高,部分细胞在10%DMSO条件下冻存会死亡,所以DMSO浓度5%-8%是比较推荐的浓度。细胞冻存及复苏遵循慢冻快融的原则,即取0.2-0.3ml的冻存液重悬的细胞于一个冻存管中,与正常体积冻存的细胞共同冻存,至液氮后复苏检查冻存结果。冻检合格前,留一部分细胞继续培养,以防万一。 细胞检测: 细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌 "细胞培养三不要:养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下:1. 不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子,觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑?知道为什么吗?烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸氢跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候,炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后,空气变冷,压力骤降,培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳,释放出来。培养基中的碳酸少了,当然会变碱。如果不烧瓶口的话,你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱,因为室温还是比冰箱内的温度高)其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下,你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话,这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌,除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来美国以后发现这里更彻底,超净台内根本就不点酒精灯。2. 不要频繁看细胞。对于初学者而言,养细胞就像养孩子一样,有空就要去看看。细胞越是养不好,就越是经常去看。MCF-7人乳腺癌传代形式细胞株实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处,特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后,密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围,形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞,培养瓶这么一晃,把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞,细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管,细胞疯长。3. 不要怕消化。在传代的时候,初学者往往生怕细胞消化过度,早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯,吹得满瓶子都是气泡。在我看来,用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候,37度消化过夜,细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有,动作要轻柔,尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大,对细胞的伤害也是很大的。" 选择此细胞合适的培养基(DMEM低糖、DMEM高糖、RPMI-1640、McCoy's 5A等培养基)89%和10%PBS及1%双抗(防止污染)或者此细胞的完全培养基或者此细胞的专用培养基;生长条件:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃(模拟人体正常温度培养,这也是体外培养合适的温度) 传代比例建议1:2-1:3,长得比较快的细胞可以1:3,比较慢的按1:2传代。传代后,建议不要使用传代前培养所使用的培养基,会有大量细胞碎片甚至导致细胞死亡的风险。细胞状态不好或者生长极慢的时候,可以通过增加血清浓度调整细胞状态及生长速度。请不要随意更换培养基,因实验需要,可以逐步驯化(让它们慢慢适应)。传代方法: 建议1:2-1:3 两天换液一次 冻存条件: 详见细胞说明书 冻存液配方:建议使用92%PBS+8%DMSO,客户自身实验室所使用的冻存液也可以适用,血清浓度不低于30%,DSMO含量不高于12%即可。细胞请于细胞培养箱中培养,大部分细胞是37℃,5%CO2,湿度100%环境下培养的。有极少部分细胞培养条件不一致,请仔细阅读相应的细胞说明书,使用正确的培养基及培养条件;细胞于培养瓶或皿中培养,加入适量说明书上标注的细胞相应完全培养基(一般液面高度2-3mm即可)。主要文献: "请具体查阅相关发表文章,接收细胞相关问题:如不能在收到细胞后及时操作细胞,T25及离心管发货的细胞将可以消毒后在37度过夜,血清发货的细胞在室温下静置1-2天(注意不要放冰箱),干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰完全升华,请即刻复苏细胞。T25瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境,同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁,此步骤非常必要。T25瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞,可以收集上清后离心(1200rpm,5min)后,将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。部分细胞在运输过程中,由于不断震荡及环境不适,可能导致细胞破碎死亡,从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下,平衡后,贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可;悬浮细胞可以离心(1000rpm,3min)收集细胞,并用PBS重悬后再离心一次,再用新的培养基重悬并接种细胞。"常见培养细胞预防污染的有效措施:体外培养的细胞受到严重污染时,有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此,防止污染,预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终,才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手:(1)添加抗生素:各种抗生素性质不同,对各种微生物的作用也不同,联合应用比单用效果好,预防性应用比污染后使用好(但迄今尚无对抗支原体特效抗生素)。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性,且对细胞本身也有一定影响,因此为避免诱导抗药细菌,应定期更换培养系统中的抗生素,或尽可能不用抗生素处理。(2)从物品、用品消毒灭菌着手:细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌要仔细,并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时,在无菌过滤操作中,随着滤过体积的增大,滤膜破损的可能性增加,故应选择过滤的液体进行检测。定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作:75%的酒精搽拭培养箱后,使用可移动的紫外灯至少消毒30min,加入高压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度。也可配制300ml的饱和硫酸铜加3L 灭菌超纯水混合成硫酸铜溶液加入水槽中。(3)MCF-7人乳腺癌传代形式细胞株从操作者做起:①进无菌室前要彻底洗手,按规定穿隔离衣。开始操作前要用 75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻,安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意,金属器械不能在火焰中长时间烧灼,以防退火;烧过的器械要冷却后才能使用;已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼,因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质,吸管再用时会将其带到培养液中;胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长,以免烧焦产生有毒气体,危害培养细胞,同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶,开瓶后的培养液应保持斜位,避免直立,以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口,培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话,咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时,应专管专用,一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去,以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面,用消毒水浸泡的纱布擦拭台面。(4)防止细胞交叉污染:所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备,一旦怀疑发生交叉污染,可做细胞遗传学方面的鉴定,如发现原有的细胞遗传物发生改变,可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行。(5)无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比,的优点是便宜,而且可以稀释50倍用,而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一种广谱灭菌剂菌,其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉,熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。CRL-5942 NCI-H2347细胞系 ,公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、肿瘤细胞系、癌细胞系(三千多种),提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养全方位的技术支持,让您实验再无烦扰!CRL-5944 NCI-H2405细胞系 ,公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、肿瘤细胞系、癌细胞系(三千多种),提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养全方位的技术支持,让您实验再无烦扰!CRL-5945 NCI-H2444细胞系 ,公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、肿瘤细胞系、癌细胞系(三千多种),提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养全方位的技术支持,让您实验再无烦扰!CRL-5946 NCI-H2452细胞系 ,公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、肿瘤细胞系、癌细胞系(三千多种),提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养全方位的技术支持,让您实验再无烦扰!CRL-5947 NCI-BL128细胞系 ,公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、肿瘤细胞系、癌细胞系(三千多种),MCF-7人乳腺癌传代形式细胞株提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养全方位的技术支持,让您实验再无烦扰!CRL-5948 NCI-BL209细胞系 ,公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、肿瘤细胞系、癌细胞系(三千多种),提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养全方位的技术支持,让您实验再无烦扰!CRL-5949 NCI-BL1184细胞系 ,公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、肿瘤细胞系、癌细胞系(三千多种),提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养全方位的技术支持,让您实验再无烦扰!CRL-5950 NCI-BL1339细胞系 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