大家都丙烯颜料用什么稀释释DNA

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如何选择测量DNA合适的稀释倍数
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在吸光度检测范围之内
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双链DNA浓度=A260值×50×稀释倍数探讨i2000化学发光仪检测HBsAg的适用稀释液及最适稀释倍数,为乙型肝炎感染患者的临床诊断和治疗提供准确的检测结果。方法 (1)稀释倍数的选择:按厂家建议的方法将稀释后的1 192例检测结果进行不同稀释倍数的频数统计分析,以确定最适稀释倍数。(2)适用稀释液选择:使用仪器厂家的稀释液、全阴性混合血清、生理盐水、10%小牛血清分别对HBsAg2...
扫描下载二维码如何稀释dna至很小的浓度
我的想把plasmid DNA大约50ng/ul稀释至0.05ng/ul,可是当我稀释到0.5ng/ul时,再次稀释DNA就再也不能均匀分布在水中,一会儿测出来是0.7,一会儿0.5,一会儿又是负数。请教我该如何做
09-10-13 &
我们一般不去特意检测提取的得到的模板浓度,纯度倒是要注意一下,紫外分光达到1.8即可,不过我们一般也不去检测。PCR的时候可以设置梯度,分别加0.5μl,1μl,1.5μl,2μl,2.5μl,3μl。不要低于0.5μl,也不要高于3μl。选择几个梯度做一下看看哪个效果好就用哪个。有时候为了省钱,就直接用1μl上去P,一般问题不大,出了问题再回头做梯度也不迟。总而言之,使得模板量在1μl左右最好。
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【求助/交流】dna测浓度怎样选择合适的稀释倍数
DNA测浓度如何选择合适的稀释倍数啊?之前有做过稀释200倍,测出数据是负值,这是怎么回事啊?请大家帮忙看看!
比色皿新不新和有没有问题没有任何关系
质量差的比色皿,两只之间有个0.0几的吸光值差很正常,跟新旧无关
稀释倍数太大的话吸光值就很小,小于0.1就不太准,小于0.05一般认为没有参考意义的
3ml的太大了,浪费样品。找个核酸分析仪测,几微升就搞定
至少也要找个斜口的微量比色皿,几百微升就能装满,可以少稀释几倍,避免吸光值太小
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我也是…………那个很难掌握好分寸忘报到了
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请问做pcr的模板DNA用什么稀释要好些,TE 还是ddH2O?
查看完整版本请点击这里:
请问做pcr的模板DNA用什么稀释要好些,TE 还是ddH2O? [转自 丁香园论坛]
还有,原理是什么? 查看完整版本请点击这里:
冷太阳 ( 14:56:33)
一般来说还是ddH2O比较好,TE buffer 中含有EDTA,会螯合PCR体系里边的镁离子,对PCR有影响!!!
冷太阳 ( 14:57:08)
谢谢回复!
但是配TE的时候一般用的都是EDTA.Na2,应该对镁离子影响不大吧?
冷太阳 ( 14:57:45)
强烈建议用TE去溶解稀释DNA模板!!!ddH2O去溶的话不利于DNA的保存,反复冻溶和保存时间稍微长一些的话,DNA就会降解的很厉害,尤其在DNA浓度不是很高的情况下。而TE溶液中保存的话,则可以大大的缓解这种情况。至于,EDTA螯合PCR体系里边的镁离子的问题,完全可以忽略,或者稍微提高镁离子的使用终浓度来解决。我做的100ul体系里面加入10ul的模板,也没有看到对PCR产物的产量有什么影响。一家之言,仅供参考。
冷太阳 ( 14:58:06)
而且我听说用TE溶解的话ph值更稳定,更有利于pcr扩增。
冷太阳 ( 14:58:36)
如果短期,还是DD水方便,但是要长期保存TE更好!它的PH值更利于DNA不降解
冷太阳 ( 14:59:11)
楼主,你好
TE buffer 是Tris碱和EDTA配成的缓冲夜,实验室融解DNA用的一般为PH8.0的,关于你的问题我的看法如下:
1:你提出的DNA如果是PCR用,TE或ddH2O融解,对PCR基本上没有影响
2:如果你提出的DNA是用来酶切的,尽量用ddH2O,因为EDTA对有些酶有抑制作用
3,如果提出的DNA需要长期保存,一定用TE来融解,可避免反复冻融,延长DNA的使
冷太阳 ( 15:00:36)
楼上的分析的很好!
虽然只是个小问题,很容易忽视,反正我是拿不太准。
我是新手,多谢指教!
冷太阳 ( 15:01:23)
用5mM的Tris行么?真的没认用过
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