请教有经验的前辈，EMSA实验所需溶液的配方

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-12-31 17:04 标签： 有经验的

1. 避免缓冲液高浓度电供体基团比:NH4咁氨酸精氨酸Tris等等;

3. 各种缓冲液能高浓度强原剂比DTT防止二价Ni原; 4. 能含离型垢剂比SDS防止Ni流失;

-1mMPMSF防止目5. 破碎细胞候建议加入蛋白酶抑制剂比0.1

6. 缓冲液加叺甘油防止蛋白间由于疏水相互作用发聚集沉淀甘油浓度高达50%(v/v)

7. 应避免含碳酸氢钠柠檬酸等物质;

9. 加入变性剂促溶盐酸胍(高6M)尿素(高8M) 10.加入非离型垢剂TritonTweenNP40等高2%减少背景蛋白污染除核酸污染

1. 避免缓冲液中有高浓度的电子供體基团比如:NH4，甘氨酸精氨酸，Tris等等;

2. 各种缓冲液中不能有强螯合剂，如EDTAEGTA，等等;

3. 各种缓冲液里不能有高浓度的强还原剂，比如DTT防圵二价Ni被还原; 4. 不能含离子型的去垢剂，比如SDS防止Ni流失;

-1mM的PMSF，防止目的5. 在破碎细胞的时候建议加入蛋白酶抑制剂比如0.1

6. 缓冲液里可以加入甘油，防止蛋白之间由于疏水相互作用而发生聚集沉淀甘油浓度最高可达50%(v/v)

7. 应避免含碳酸氢钠，柠檬酸等物质;

9. 可加入变性剂促溶盐酸胍(最高可6M)，尿素(最高可8M) 10.可加入非离子型去垢剂如Triton，TweenNP40等，最高2%可以减少背景蛋白污染和去除核酸污染

感觉这样的提问没有意义

1. 避免缓冲液高浓度电供体基团比:NH4咁氨酸精氨酸Tris等等;

3. 各种缓冲液能高浓度强原剂比DTT防止二价Ni原; 4. 能含离型垢剂比SDS防止Ni流失;

-1mMPMSF防止目5. 破碎细胞候建议加入蛋白酶抑制剂比0.1

6. 缓冲液加叺甘油防止蛋白间由于疏水相互作用发聚集沉淀甘油浓度高达50%(v/v)

7. 应避免含碳酸氢钠柠檬酸等物质;

9. 加入变性剂促溶盐酸胍(高6M)尿素(高8M) 10.加入非离型垢剂TritonTweenNP40等高2%减少背景蛋白污染除核酸污染

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