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【求助】求助实验室的核酸污染问题。
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这个帖子发布于3年零99天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
之前做实验时大量摇菌提含HCV片段的质粒，可能把实验室污染了，现在取少量高压过的纯水在不同的屋子开盖放置30min后，用逆转录后real-time PCR检测HCV，仍然能扩出来，Ct值有时在36
有时在38左右，试剂无污染。使用了不同的方法来消除污染，如开窗通风，紫外照射，次氯酸钠擦台面，拖地，70%乙醇喷洒空气等等，过了1周继续检测，Ct居然到了29！
求助各位该如何消除核酸污染呀！这几天查到applichem公司的-Exitus
DNA-ExitusPlus，说是喷洒到台面上就可以迅速消除DNA污染，不知道有谁用过没，靠不靠谱呀！
不知道邀请谁？试试他们
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cl871021 之前做实验时大量摇菌提含HCV片段的质粒，可能把实验室污染了，现在取少量高压过的纯水在不同的屋子开盖放置30min后，用逆转录后real-time PCR检测HCV，仍然能扩出来，Ct值有时在36
有时在38左右，试剂无污染。使用了不同的方法来消除污染，如开窗通风，紫外照射，次氯酸钠擦台面，拖地，70%乙醇喷洒空气等等，过了1周继续检测，Ct居然到了29！
求助各位该如何消除核酸污染呀！这几天查到applichem公司的-Exitus
DNA-ExitusPlus，说是喷洒到台面上就可以迅速消除DNA污染，不知道有谁用过没，靠不靠谱呀！那可以试一下啊，如果不贵的话
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viviank 那可以试一下啊，如果不贵的话500ml 700+RMB，买了试一下，现在也只能死马当活马医了。
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cl871021 500ml 700+RMB，买了试一下，现在也只能死马当活马医了。这个还好的，不算太贵，实验重要啊
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viviank 这个还好的，不算太贵，实验重要啊今天买来验证了一下 10ul PCR产物 292bp +3ul DNA清除剂 作用5min。。。跑电泳 根本没作用。。。K！ 所谓的这么好的效果 根本没看到额。。。哭
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cl871021 今天买来验证了一下 10ul PCR产物 292bp +3ul DNA清除剂 作用5min。。。跑电泳 根本没作用。。。K！ 所谓的这么好的效果 根本没看到额。。。哭可以投诉了，别太伤心
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viviank 可以投诉了，别太伤心想是要解决问题，虽说可以退货但问题也是没解决。。。哎
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cl871021 想是要解决问题，虽说可以退货但问题也是没解决。。。哎你到这里去提问，高手多一些，可以帮你一起想想办法：
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现在解决了吗？
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wanghaiyan029 现在解决了吗？用了1M HCl 和10%NaClO擦了生物安全柜内部，再做阴性就检测不到了，但是这两者都是有强腐蚀性的，不能经常擦。。。
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cl871021 之前做实验时大量摇菌提含HCV片段的质粒，可能把实验室污染了，现在取少量高压过的纯水在不同的屋子开盖放置30min后，用逆转录后real-time PCR检测HCV，仍然能扩出来，Ct值有时在36
有时在38左右，试剂无污染。使用了不同的方法来消除污染，如开窗通风，紫外照射，次氯酸钠擦台面，拖地，70%乙醇喷洒空气等等，过了1周继续检测，Ct居然到了29！
求助各位该如何消除核酸污染呀！这几天查到applichem公司的-Exitus
DNA-ExitusPlus，说是喷洒到台面上就可以迅速消除DNA污染，不知道有谁用过没，靠不靠谱呀！想请问一下楼主是因为什么考虑到可能污染实验室才做PCR验证的，如是操作所致，需要注意什么？如果不是操作原因，是否提质粒过程导致实验室污染是不可避免的呢？
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找个没做过DNA的实验室，一般经常做DNA、RNA的实验室都会有基因污染
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关于丁香园如何除实验室核酸污染
幽灵战狼344
（1） Tris 吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害.戴好手套和护目镜. （2） 氨基乙酸：吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害.戴好手套和护目镜.避免吸入尘埃. （3） X-半乳糖 (X-gal)：对眼睛和皮肤有毒性.使用粉剂时遵循常规注意事项.应注意的是,X-gal 溶液是在一种有机溶剂（DMF）中制备的. （4）β-半乳糖苷酶：有刺激性,可产生过敏反应.吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害.戴好手套和护目镜. （5）苯二胺 ：吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （6）苯酚：有剧毒性和高度腐蚀性,可致严重烧伤.吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害.戴好合适的手套和护目镜,穿好防护服,在通风橱内操作.若有皮肤接触药物,可用大量清水冲洗,并用肥皂和水清洗,不要用乙醇洗. （7）苯甲基磺酰氟化物(PMSF)：为一有剧毒的胆碱酯酶抑制剂.对上呼吸道的黏膜、眼睛和皮肤有极大损害.戴好合适的手套和护目镜,在通风橱内操作.万一眼睛或皮肤接触到此药品,立即用大量的水冲洗,丢弃被污染的衣物. （8）苯甲酸：有刺激性.吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害.戴好手套和护目镜,不要吸入. （9）苯甲酸苄酯：有刺激性.吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害.避免接触眼睛.戴好合适的手套和护目镜. （10）苯乙醇：有刺激性.吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害.戴好手套和护目镜,远离火源、火花和明火. （11）丙烯酰胺（未聚合的）：为一种潜在的神经毒素,可通过皮肤吸收（有累积效应）.避免吸入尘埃.称量丙烯酰胺和亚甲基双酰胺粉末时,戴好手套和面罩,在化学通风橱内操作.聚合的丙烯酰胺是无毒的,但是使用时也应小心,因为其中可能喊有少量未聚合的丙烯酰胺. （12）蛋白酶K：有刺激性.吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害.戴好手套和护目镜. （13）碘化丙锭：吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害.刺激眼睛、皮肤、黏膜和上呼吸道.可诱导突变并可能致癌.戴好手套和护目镜,穿好防护服,在通风橱内小心操作. （14）碘乙酰胺：能碱基化蛋白质上的氨基,从而影响抗原的氨基酸序列分析.有毒性.吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作,勿吸入尘埃. （15）叠氮化钠：有剧毒性,可阻断细胞色素电子转运系统.含此药物的溶液要明确标记.吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害.戴好手套和护目镜,并小心使用.此药品为氧化剂,故保存时要远离可燃物品. （16）多聚甲醛：有剧毒.易通过皮肤吸收,并对皮肤、眼睛、黏膜和上呼吸道有严重破坏性.避免吸入尘埃.戴好手套和护目镜,在通风橱内操作.多聚甲醛是甲醛的未解离形式. （17）3,3’-二氨基联苯胺四氢氯化物：为一种致癌剂,操作时要非常小心.避免吸入气体.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （18）二甲苯：可燃,高浓度有麻醉作用.吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作.始终远离热源、火花和明火. （19）二甲苯蓝：见二甲苯. （20）二甲次胂酸钠：可能为致癌剂,并含有砷,有剧毒性.戴好手套和护目镜,只在通风橱内操作. （21）N,N-二甲基酰胺(DMF)：刺激眼睛、皮肤和黏膜.可通过吸入,摄入,和皮肤吸收发挥其毒性.慢性吸入可导致肝、肾损害.戴好手套和护目镜,在通风橱内操作. （22）二甲亚砜(DMSO)：吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害.戴好手套和护目镜,在通风橱内操作.DMSO为可燃物保存于密封容器中.远离热源、火花和明火. （23）二硫苏糖醇(DTT)：为一强还原剂,有恶臭味.吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害.当使用固体形式或高浓度溶液时,戴好手套和护目镜并在通风橱内操作. （24）4ˊ,6-二脒基-2ˊ-苯基吲哚盐酸(DAPI)：可能为一种致癌剂.吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害.可引起刺激.避免吸入.戴好手套和护目镜,在通风橱内操作. （25）放射性物质：当计划的一个实验涉及放射性物质的使用时,应包括以下内容：同位素的理化性质（如半衰期,放射型,辐射能量）,辐射物质的化学形式,其辐射度（具体的活性）总量,化学浓度,需要使用多少就预定多少,使用放射性物质时,要始终戴好手套和护目镜,穿实验室工作服.X和γ射线为由仪器产生放射性物质辐射出的短波电磁波,它们会丛放射源辐射出来或聚成光束.它们的潜在危险决定于暴露于其中的时间、强度和它的波长. （26）放线菌素D：是一种畸胎剂和致癌剂,有剧毒.吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害,甚至是致命的.应避免吸入.戴好手套和护目镜,并始终在化学通风橱内操作,放线菌D见光分解. （27）高压玻璃器皿时要格外小心.高压锅和金属容器中的玻璃器皿,宜放入金属网中或蒲氏隔板中.在真空状态下使用玻璃器皿,如真空收集器、干燥设备或氩气条件下的反应器等,要谨慎操作.戴好护目镜. （28）过二硫酸铵：对黏膜组织、上呼吸道、眼睛和皮肤有极大的破坏性.吸入可致命.戴好手套和护目镜,穿好防护服.必须在化学通风橱内操作.操作后要彻底清洗. （29）过氧化氢：有腐蚀性、毒性,对皮肤有强损害性.吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害.戴好手套和护目镜,只在化学通风橱内操作. （30）环乙酰亚胺：吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害.戴好手套和护目镜,只在化学通风橱内操作. （31）磺基蓖麻酸（二水合物）；对黏膜和呼吸系统有极大破坏性.不要吸入粉尘,戴好手套和护目镜,在化学通风橱内操作. （32）甲氨蝶呤(MTX)：为一种致癌剂和致畸胎剂.吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害.暴露于其中可导致胃肠反应,骨髓抑制,肝或肾损害.戴好手套和护目镜,在化学通风橱内操作. （33）甲醇：有毒,可致失明.吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害.要有足够的通风以减少挥发气.不要吸入这些气体.戴好手套和护目镜,在化学通风橱内操作. （34）甲基磺酸乙酯(EMS)：为一种可诱导机体突变和突变和致癌的挥发性有机溶剂.吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害. （35）甲醛：有剧毒性和挥发性.也是一种致癌剂.可通过皮肤吸收,对皮肤、眼睛、黏膜和上呼吸道有刺激或损伤.避免吸入气体.戴好手套和护目镜.始终在通风橱内操作.远离热源、火花和明火. （36）甲酸：有剧毒,对黏膜组织、上呼吸道、眼睛、皮肤有极大的损伤.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （37）甲酰胺：可导致畸胎.其挥发的气体刺激眼睛、皮肤、黏膜和上呼吸道.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.操作高浓度甲酰胺时要在通风橱内操作.尽可能将反应的溶液盖住. （38）焦磷酸钠：有刺激性.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.不要吸入粉尘. （39）焦碳酸二乙酯(DEPC)：是一种潜在的蛋白质变质剂,且为可疑的致癌剂.开启时瓶口不要指向操作者或其他人.瓶内压可导致喷溅.戴好手套并穿实验室工作服,在通风橱内操作. （40）聚丙烯酰胺：无毒性,但仍应谨慎使用,因为其中可能含有少量未聚合的物质. （41）聚乙二醇(PEG)：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.避免吸入粉末.戴好手套和护目镜. （42）菌种（运输）：健康教育福利部门根据运输器具将各种细菌划分为不同的类别.大肠杆菌的非病原种（K12）和枯草芽孢杆菌为第一类,正常运输条件下是无危害或危害性很微小的.但是沙门菌、嗜血杆菌、链霉菌和假单孢菌的一些菌种为第二类.第二类细菌为“一般潜在危害剂：能造成不同严重程度的疾病,但在普通实验室技术下可操作.” （43）抗淬灭剂：见苯二胺. （44）考马斯亮蓝：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜. （45）联结剂(DMP)：刺激眼睛、皮肤和黏膜.可通过吸入,摄入,皮肤吸收发挥其毒性.不要吸入气体,戴好手套、面罩和护目镜. （46）链霉素：有毒性,怀疑为致癌剂和突变诱导剂.可导致过敏反应.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜. （47）亮肽素；吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （48）邻苯二甲酸二丁酯：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.不要吸入气体. （49）磷酸二氢钠：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （50）磷酸：高腐蚀性.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜. （51）磷酸钾：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.不要吸入粉尘,在通风橱内操作. （52）磷酸钠：刺激眼睛和皮肤.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.不要吸入粉尘. （53）磷酸氢钠：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （54）硫氰酸胍：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜. （55）硫氰酸胍盐；见硫氰酸胍. （56）硫酸：剧毒性,对黏膜组织、上呼吸道、眼睛和皮肤有极大的损伤.可造成烧伤,与其他物质（如纸）接触可能引发火灾.戴好手套和护目镜,在通风橱内操作. （57）硫酸镁：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （58）氯仿：刺激眼睛、呼吸道、皮肤和黏膜.为一种致癌剂.有肝、肾毒性.有挥发性.避免吸入蒸汽.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （59）氯化铵：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （60）氯化钙：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作.（61）氯化钾：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （62）氯化锂：刺激眼睛、呼吸道、皮肤和黏膜.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （63）氯化镁：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （64）氯化锰：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （65）氯化铁：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （66）氯化锌：有腐蚀性,对胎儿有潜在危险.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （67）3-（N-吗啉）-丙磺酸：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.刺激眼睛、呼吸道、皮肤和黏膜.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （68）没食子酸丙酯(NPG0：见苯甲酸. （69）柠檬酸钠：见柠檬酸. （70）柠檬酸：有刺激性.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜. （71）硼酸：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜. （72）羟胺：有腐蚀性和毒性.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （73）氢氧化铵：为氨的水溶液.具有腐蚀性.操作时要小心.氨气可从氨水中挥发出来,具有腐蚀性、毒性和爆炸性.戴好手套.必须在通风橱内操作. （74）氢氧化钾：剧毒性.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.溶液为强碱性,当心使用.戴好手套. （75）氢氧化钠：溶液有剧毒,强碱性,当心使用.戴好手套.其他所有高浓度碱溶液都应以类似方式操作. （76）秋水仙碱：有剧毒,可致命,可导致癌症和可遗传的基因损害.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作.不要吸入粉尘. （77）β-巯基乙醇：吸入或皮肤吸收可致命,摄入有害.高浓度溶液对黏膜、上呼吸道、皮肤和眼睛有极大损害.β-巯基乙醇有难闻气味.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （78）去氧胆酸钠：刺激黏膜和呼吸道.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.使用粉末时,戴好手套和护目镜.不要吸入粉尘. （79）溶剂；谨慎操作. （80）溶菌酶：对黏膜有腐蚀性.戴好手套和护目镜. （81）三氯乙酸：有很强的腐蚀性.戴好手套和护目镜. （82）三乙胺：有剧毒,易燃.对皮肤、眼睛、黏膜和上呼吸道有强腐蚀性.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.始终在通风橱内操作.远离热源、火花和明火. （83）三乙醇胺：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.始终在通风橱内操作. （84）十二烷基磺酸钠(SDS)：有毒性和刺激性,有严重损伤眼睛的危险.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.不要吸入粉尘. （85）双丙烯酰胺：是一种潜在的神经毒素,可通过皮肤吸收,避免吸入,在称量时,戴好手套和护目镜. （86）四环素：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （87）N,N,N’,N’-四甲基乙二胺：对皮肤、眼睛、黏膜和上呼吸道有极大损伤.吸入可致命,长时间接触可产生严重刺激或烧伤.戴好手套和护目镜.穿防护服,必须在通风橱内操作.使用完毕要彻底清洗.易燃性,其挥发气体可到达一定距离,形成引燃源,瞬间发生火灾.远离热源、火花和明火. （88）四水合乙酸镁：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜. （89）四唑氮蓝；有危险性,小心操作. （90）碳酸钠：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜. （91）同位素125I；在甲状腺,为一潜在的健康杀手.无论何种形式的同位素都用铅板遮挡.操作同位素时,要戴一到两副手套,着取决于同位素的用量和所进行的操作难度. （92）胃酶抑素：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （94）硝酸：具有挥发性,操作时要小心.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作.远离热源、火花和明火. （95）硝酸银：强氧化剂,小心操作.皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作.与其他物质接触会发生爆炸. （96）溴酚蓝：皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （97）5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷：对眼睛和皮肤有毒性.皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜. （98）5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸酯：有毒性.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜. （99）5-溴-2’-脱氧脲苷；为致畸胎剂.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.有刺激性.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （100）溴乙啡啶：为一种强致突变剂,有毒性.避免吸入粉尘.操作含此染料的溶液时,戴上手套. （101）血（人类）和血产品和爱普斯坦病毒：其中可能含有隐藏的传染性物质,如乙型肝炎病毒、HIV,可能造成实验上室传染.戴一次性手套,使用吸枪式吸管,在生物安全橱中、操作,防止形成悬浮和污染.污染的塑料器皿在丢弃前要高压处理；污染的液体高压处理或丢弃前用漂白粉处理至少30min. （102）N,N’-亚甲基丙烯酰胺：为毒药,作用于中枢神经系统.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.有刺激性.戴好手套和护目镜. （103）亚精胺：有腐蚀性.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.有刺激性.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （104）亚铁氰化钾：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.有刺激性.戴好手套和护目镜.在通风橱内相当谨慎地操作.远离强酸. （105）盐酸：有挥发性.吸入,摄入,皮肤吸收可致命.对皮肤、眼睛、黏膜和上呼吸道有极大损害.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （106）盐酸胍：刺激黏膜、上呼吸道、皮肤和眼睛.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜. （107）盐酸胍盐：见盐酸胍. （108）乙醇：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜. （109）乙基亚硝基脲：见N-乙基-N-亚硝基脲 （110）N-乙基-N-亚硝基脲（ENU）：有致癌性,为潜在的突变诱导剂.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作.用1ml/LNaOH溶液清洗所有接触过ENU的物品. （111）乙酸铵：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （112）乙醇胺：有毒性.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作.具有高腐蚀性,并可与酸发生强烈反应. （113）乙酸：使用时要非常小心.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （114）乙酸钠：见乙酸. （115）乙酸铀酰：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.在通风橱内操作. （116）异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜. （117）异丁烯酸酯：有毒.吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.不要吸入其气体. （118）异硫氰酸胍盐：见硫氰酸胍盐. （119）抑肽酶：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤还可导致过敏反应.暴露其中可引起胃肠反应,肌肉疼痛,血压改变或支气管痉挛.戴好手套和护目镜.不要吸入粉尘,必须在通风橱内操作. （120）月桂酰基氨酸钠：吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤.戴好手套和护目镜.不要吸入粉尘.
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核酸是遗传信息的载体，是最重要的生物信息分子，是分子生物学研究的主要对象，因此核酸的提取是分子生物学实验技术中最重要、最基本的操作。本篇文章来源于网络，如有异议请联系我们，我们将在3个工作日内作出处理。
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核酸实验室使用注意事项
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