中性粒细胞吞噬实验中瑞士染液加入后未能及时加入ph7.4的pbs缓冲液配方会怎么样

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2.小吞噬实验分析课件
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3秒自动关闭窗口篇一:巨噬细胞吞噬实验&沉淀实验实验报告;实验二;一巨噬细胞吞噬功能实验;【原理】巨噬细胞是单核吞噬细胞系统的主要细胞,局;在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后,再给小鼠腹腔注;【方法】体内法:;(1)实验前3小时,小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1;(2)实验时,每只小鼠注射鸡红细胞1ml,轻柔腹;(3)30min后,将小鼠拉颈处死,固定,打开腹;(4)高倍
篇一:巨噬细胞吞噬实验&沉淀实验实验报告
巨噬细胞吞噬功能实验
【原理】巨噬细胞是单核吞噬细胞系统的主要细胞,局域活跃的吞噬功能。吞噬细胞受抗原刺激后活化,可使吞噬功能明显增强。
在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后,再给小鼠腹腔注射鸡血红细胞,30min后处死小鼠,取出腹腔液,以冷亚甲蓝染色,显微镜下计数吞噬红细胞的百分数,及观察吞噬细胞内鸡红细胞的数目,以判断吞噬细胞的杀伤能力,由此间接地测定机体的非特异性免疫水平。
【方法】体内法:
(1)实验前3小时,小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml,诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。
(2)实验时,每只小鼠注射鸡红细胞1ml,轻柔腹部,使其在腹腔中分布均匀,利于吞噬。
(3)30min后,将小鼠拉颈处死,固定,打开腹腔暴露肠管,用载玻片轻擦腹腔,使腹腔液均匀涂于载玻片过,再滴一滴0.03%冷亚甲蓝溶液,盖上盖玻片。
(4)高倍镜下进行观察,计数。
在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后,再给小鼠注射鸡红细胞后镜检腹腔液,可观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,并且可看到部分鸡红细胞聚集到吞噬细胞附近。
双向琼脂扩散实验【原理】将可溶性抗原与相应抗体分别加入琼脂板上的孔内,二者均可发生扩散,并且随扩散距离的增大浓度降低,在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。本实验是定性实验,常用于分析抗原抗体的纯度关系以及相互关系。
(1)制板:将熔化的1%琼脂加在载玻片上约5ml
(2)打孔:待琼脂凝固后,将载玻片置于打孔样板上,用打孔器打孔
(3)加样:在中央孔内加抗体,上下两孔加抗原1,左右加抗原二,每孔加10μl
(4)结果观察:将琼脂板置于湿盒,37℃一天后观察结果。
在中央孔与添加抗原1的孔之间出现沉淀线,有抗原抗体反应,为阳性反应,说明抗原1与抗体相对应。中央孔与添加抗原2的孔之间没有沉淀线,说明抗原2与抗体之间不相对应。
【分析】抗体与抗原发生扩散时,随扩散距离的增大浓度降低,在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。当有沉淀线出现时,说明有抗原抗体反应。
琼脂铺板时要一次铺成,并且铺设均匀。
打孔时要注意垂直打孔,注意不要有裂隙产生。篇二:中性粒细胞吞噬功能试验(小吞噬试验) 中性粒细胞吞噬功能试验(小吞噬试验)
1.熟悉中性粒细胞的吞噬作用原理和方法。
血液中的中性粒细胞即小吞噬细胞,通过趋化、调理、吞入和杀菌等几个步骤,能吞噬和消化衰老、死亡细胞及病原微生物等异物,是机体非特异性免疫的重要组成部分。 实验材料
瑞氏染色法:取瑞氏染液数滴滴于上述血片上先染1分钟。然后加等量蒸馏水,
轻轻晃动混匀,继续染5分钟,水洗,用吸水纸吸干后镜检。
油镜检查:寻找中性粒细胞,如果染色结果正确,可见细胞核及被吞噬的细菌染
成紫色,而粒细胞的细胞浆则为淡红色。 中性粒细胞吞噬试验
计数:1.吞噬百分率:观察100个中性粒细胞,计算其中吞噬有细菌的中性粒细胞数,计算出吞噬细胞百分率。 2.吞噬指数:观察100个中性粒细胞,计算其中被吞噬的细菌总 篇三:吞噬细胞吞噬功能检测实验
-----吞噬细胞吞噬功能检测实验 实验概要
本文介绍了吞噬细胞吞噬功能检测(assay of the phagocytic function of phagocyte)实验的基本原理、操作步骤及注意事项等。
吞噬细胞具有对异物(细菌、绵羊红细胞、鸡红细胞等)吞噬和消化的功能,在机体非特异性免疫中发挥重要作用。
小鼠腹腔内注射硫代乙醇酸钠,可刺激巨噬细胞的聚集。四日后小鼠腹腔内注入羊红细胞悬液,一小时后解剖收集腹腔吞嗜细胞,染色、镜检可观察对羊红细胞的吞嗜现象。通过计算吞嗜百分比或吞噬指数可测定吞噬细胞的吞嗜功能。
1. pbs 缓冲液
2. 3%硫代乙醇酸钠
3. 1%羊红细胞悬液
4. 瑞氏染液
1. 解剖器材
4. 橡皮吸头
实验材料icr 小鼠实验步骤
1. 实验准备:用无菌注射器吸取3%硫代乙醇酸钠3ml,注射于小鼠腹腔内。
2. 四日后,注射1%羊红细胞悬液1ml 于小鼠腹腔内。
3. 注射1 小时后,将小鼠用颈椎脱臼法处死,解剖暴露腹腔,于腹腔靠上部位,用镊子轻轻夹起腹膜,将腹膜剪一小口,用尖吸管注入5ml 预温的pbs,同时用手反复揉搓腹腔约1―2 分钟,以便尽可能多地冲洗出小鼠腹腔的吞噬细胞。
4. 用尖吸管吸取腹腔液,置一洁净试管内。
5. 用尖吸管将腹腔液吹打均匀(尽量避免产生气泡),吸取一滴滴于载玻片上,加盖玻片镜检。
6. 观察结果,也可以将腹腔液涂片,平放于湿盘内,37℃,孵育30 分钟。取出涂片,用预温的pbs 冲洗3 次,然后用甲醇固定1 分钟,以瑞氏染液1 份加ph6.4 的pbs 2 份混匀后,滴于涂片上染色5-10 分钟,以蒸馏水冲洗(切勿先将染液倾去)后,待干,镜检。
7. 实验结果
观察小鼠腹腔巨噬细胞和中性粒细胞对羊红细胞的吞噬现象,计算吞噬百分比,即每100 个吞噬细胞中吞噬有羊红细胞的细胞数。也可用吞噬指数表示,即将100 个吞噬细胞中所吞噬羊红细胞的总数除以100,即为吞噬指数。吞噬百分比和吞噬指数一般是平行的。
注意事项1. 充分揉搓腹腔,尽可能将吞噬细胞冲洗下来。
2. 用尖吸管吸取腹腔液时,尽量避开腹腔脏器,避免损伤血管引起出血,影响实验结果。
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 巨噬细胞吞噬实验&沉淀实验实验报告_临床医学_医药卫生_专业资料。实验二 一 巨噬细胞吞噬功能实验 【原理】巨噬细胞是单核吞噬细胞系统的主要细胞,局域活跃的吞噬...  中性粒细胞吞噬功能试验(小吞噬试验)中性粒细胞吞噬功能试验(小吞噬试验)隐藏&& 中性粒细胞吞噬功能试验(小吞噬试验)实验目的 1.熟悉中性粒细胞的吞噬作用原理和方法...  免疫学实验报告_医学_高等教育_教育专区。实验一一、免疫细胞检测: 1、淋巴细胞转化试验 免疫学实验 2、E 花环形成试验 3、大吞噬试验 4、小吞噬试验 二、凝集...  吞噬细胞吞噬功能检测实验_自然科学_专业资料。本文介绍了吞噬细胞吞噬功能检测(Assay...小试管 6. 载玻片 实验材料 ICR 小鼠 实验步骤 1. 实验准备:用无菌注射器...  残余颗粒百分比 p5?篇四:巨噬细胞吞噬实验&沉淀实验实验报告 实验二 一 ...(注意观察各个沉淀桶的絮凝沉淀情况) 8) 程序结束后,打开沉淀桶的小阀门,取...  学号 验报告 姓名 班级 细胞生物学实 实验八 一、实验原理 巨噬细胞吞噬现象的观察 巨噬细胞由骨髓干细胞分化生成,然后进入血液到达各组织内,并进一步分 化为...  实验报告( 实验报告(一)实验名称:实验性空气栓塞 实验时间: 成绩: 实验目的:...还有许多散在或成堆的吞噬细胞, 这些细胞胞浆内充满了棕褐色的颗粒 (含铁 血...  大学物理实验总结报告1_理学_高等教育_教育专区。大...? ?? “吞噬” cos? ?? ? ?? “产生” 4....由于其平衡电压最小也在 80 多伏, 所以其油滴...  (6%淀粉中含 0.3%台 盼蓝) 3.材料:小白鼠;0.5%鸡红细胞悬液 实验步骤...六 实验报告 1. 绘图:小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的各种形态。 2. 计算...君,已阅读到文档的结尾了呢~~
该实验是用已知抗原检测血清中抗体的定量试验,可检测出血清中抗体的效价.即用...了解对流免疫电泳的操作步骤,结果观察及实际应用并在此基础上了解各类沉淀反应的...
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