染色体核型分析_百度百科
染色体核型分析
将待测细胞的染色体依照该生物固有的染色体形态结构特征，按照一定的规定，人为的对其进行配对、编号和分组，并进行形态分析的过程。
染色体核型分析定义
染色体核型分析（karyotype analysis）
将待测细胞的染色体依照该生物固有的染色体形态结构特征，按照一定的规定，人为的对其进行配对、编号和分组，并进行形态分析的过程。
染色体核型分析原理
不同物种的染色体都有各自特定的形态结构（包括染色体的数目、长度、着丝点位置、臂比、随体大小等）特征，而且这种形态特征是相对稳定的。经染色或荧光标记的染色体，通过一定的光学或电化学显色设备就可以清晰而直观的观察到染色体的具体形态结构，再与正常核型进行对比寻找差异，进而确定染色体的缺失、重复和倒置等现象。
染色体核型分析意义
是细胞遗传学研究的基本方法，是研究物种演化、分类以及染色体结构、形态与功能之间
人类G显带核型图谱
关系所不可缺少的重要手段。通过染色体核型分析，可以根据染色体结构和数目的变异情况来判断生物是否患有某种因染色体片段缺失、重复或倒置等引起的遗传病。如产前21三体综合征的诊断，通过核型分析可以在遗传基础上确定该疾病。此外，联合荧光原位杂交技术，还可以对基因进行定位。
染色体核型分析分析
正常人的体细胞染色体数目为46条，并有一定的形态和结构。染色体在形态结构或数量上的异常被称为染色体异常，由染色体异常引起的疾病为染色体病。现已发现的染色体病有100余种，染色体病在临床上常可造成流产、先天愚型、先天性多发性畸形、以及癌症等。临床上染色体检查的目的就是为了发现染色体异常和诊断由染色体异常引起的疾病。
染色体检查是用外周血细胞在生长刺激因子—植物凝集素（PHA）作用下经37℃，72小时培养，获得大量分裂细胞，然后加入秋水仙素使进行分裂的细胞停止于分裂中期，以便染色体的观察；再经低渗膨胀细胞，减少染色体间的相互缠绕和重叠，最后用甲醇和冰醋酸将细胞固定于载玻片上，在显微镜下观察染色体的结构和数量。正常男性的染色体核型为44条常染色体加2条X和Y，检查报告中常用46，XY来表示。正常女性的常染色体与男性相同，性染色体为2条XX，常用46，XX表示。46表示染色体的总数目，大于或小于46都属于染色体的数目异常。缺失的性染色体常用O来表示。
染色体核型分析分析技术
一、GRQ带技术
人类染色体用Giemsa染料染色呈均质状,但是如果染色体经过变性和(或)酶消化等不同处理后,再染色可呈现一系列深浅交替的带纹,这些带纹图形称为染色体带型。显带技术就是通过特殊的染色方法使染色体的不同区域着色,使染色体在光镜下呈现出明暗相间的带纹。每个染色体都有特定的带纹,甚至每个染色体的长臂和短臂都有特异性。根据染色体的不同带型,可以更细致而可靠地识别染色体的个性。染色体特定的带型发生变化,则表示该染色体的结构发生了改变。一般染色体显带技术有G显带(最常用),Q显带和R显带等。
二、荧光原位杂交技术
荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization,FISH)是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法,探针首先与某种介导分子结合,杂交后再通过免疫细胞化学过程连接上荧光染料。FISH的基本原理是将DNA(或RNA)探针用特殊的核苷酸分子标记,然后将探针直接杂交到染色体或DNA纤维切片上,再用与荧光素分子耦联的单克隆抗体与探针分子特异性结合,对DNA序列在染色体或DNA纤维切片上的进行定性、定位和定量分析。
三、光谱核型分析技术
SKY(spectralkaryotying)光谱染色体自动核型分析是一项显微图像处理技术,SKY通过光谱干涉仪,由高品质CCD获取每一个像素的干涉图像,形成一个三维的数据库并得到每个像素的光程差与强度间的对应曲线,该曲线经傅立叶变换之后得到该像素的光谱,再经由软件分析之后用分类色来显示图像或将光谱数据转换成相应的红绿蓝信号后以常规方式显示。[1]
．高分子实验室[引用日期]
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如何解读染色体检测报告
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染色体异常：判断MM预后的重要因素
《医师报》
　　南京医科大学第一附属医院 江苏省人民医院 李建勇
&&& 尽管硼替佐米、来那度胺、沙利度胺等新药物及造血干细胞移植的广泛应用明显改善了多发性骨髓瘤（MM）的预后，但MM仍是一种难以治愈的恶性血液病，患者预后差异大，生存期短者仅数月，长者可达十余年。染色体异常是影响患者预后的最重要因素之一，染色体异常研究对于揭示MM发病机制、指导临床分型、治疗及预后评估均具有非常重要的价值。　　
常规细胞遗传学& 虽有局限，但仍具不可替代的价值
&&& 常规细胞遗传学检查采用显带分析染色体数目、结构异常，可全面反映各种类型的染色体异常，是染色体异常研究最常用的方法。
&&& 与其他恶性血液病相比，常规细胞遗传学研究在MM领域存在如下局限性：（1）骨髓瘤细胞是终末分化细胞、有丝分裂活性低，难以获得足够数量的、质量好的分裂相进行染色体分析；（2）骨髓瘤细胞呈灶性分布，抽取骨髓标本时常混有大量正常造血细胞，法国南特大学Avet-Loiseau报道，近1000例MM患者骨髓单个核细胞中的中位浆细胞比例仅6%；（3）对于小的缺失或涉及端粒断裂点的易位如t（4；14）（p16.3；g32）、t（14；16）（g32；g23）等，常规细胞遗传学技术常难以识别；（4）复杂染色体异常多见。
&&& 鉴于上述原因，常规细胞遗传学分析仅显示30%~40%MM患者核型异常。南京医科大学第一附属医院李建勇等分析144例MM患者，47例（32.6%）存在染色体异常，而且33例（70.2%）为复杂核型异常。
FISH技术& 常规细胞遗传学分析的重要补充
&&& 根据DNA双链互补的原理，应用已知序列的DNA探针进行荧光原位杂交（FISH）可识别整条染色体、染色体的1个臂、1条带甚至1个基因，既能对中期分裂相，又能对间期细胞（如骨髓瘤细胞）进行检测，具有快速、灵敏、可靠、简便和安全等优点（图1）。20世纪80年代以来，FISH技术的应用不仅极大地拓展了染色体分析的范围，显著提高了其识别染色体异常的能力，而且可以克服骨髓瘤细胞无/少分裂相、小缺失及涉及断裂易位等使常规细胞遗传学分析失败的限制，因此成为常规细胞遗传学分析的重要补充。
&&& 免疫技术结合FISH&& 如采用免疫磁珠或流式细胞术分选CD138阳性细胞是解决标本中MM细胞比例低的主要方法。CD138为几乎所有的浆细胞特征性表达，由于MM患者中正常浆细胞甚少，对检测结果无影响。
&&& 美国Chen等采用Rb-1、D13S319、IgH、p53等几种探针比较CD138分选与未分选FISH结果，发现前者的染色体异常检出率显著高于后者（72% vs. 24%）。南京医科大学第一附属医院李建勇等采用3种探针和分选细胞FISH的异常检出率为83.3%，如采用足够多的探针则几乎100%的MM患者具有染色体异常。　　
&&& cIg-FISH&& 即利用MM细胞克隆性表达胞质免疫球蛋白（cIg）轻链的特征，对胞质轻链（κ或λ链）进行免疫荧光染色，筛选出MM细胞。由于其具有敏感、特异、价廉及标本用量少的优点，为目前国外最常用的一种技术。&&&&&
&&& M-FISH&& 上世纪90年代以来，应用5种荧光素的不同组合标记24种人类染色体而制备的全套彩涂探针，进行多色FISH（M-FISH）是细胞遗传学研究的一个重大技术进步。该项技术不仅可识别各种标记染色体和隐匿易位，大大提高了核型分析的灵敏度和精确性，而且真正实现了核型分析的自动化。M-FISH还可克服常规细胞遗传学难以分析复杂染色体异常的缺陷。南京医科大学第一附属医院李建勇等分析5例MM患者的复杂核型，发现20种常规细胞遗传学未发现的染色体结构异常（图2）。
染色体异常& 判断预后有重要意义
&&& 目前已明确了一些与预后相关的染色体改变，如13号染色体缺失、t（4；14）、t（14；16）、17p13缺失、1q增加（CKS1B）、1p缺失、亚二倍体等。
&&& 13号染色体缺失& 常规细胞遗传学显示，在初诊MM中13号染色体缺失（13q-）占15%，与亚二倍体一样预后差，而超二倍体则预后较好。经FISH检测，初诊MM患者中39%~54%存在13q-。1995年美国Tricot等报道，常规细胞遗传学检测为13q-的MM患者生存期短。但最近研究显示，FISH检测的13q-无独立预后价值，患者预后差主要与t（4;14）、t（14;16）或17p-等预后差染色体异常相关。因此，常规细胞遗传学检测显示13q-仍有独立的预后意义，而13q-本身对MM无特别预后价值，但可作为其他预后差因素的标志。
&&& 涉及14q32（IgH基因）的易位& 常规细胞遗传学发现涉及14q32的易位约30%，核型识别的大多为t（11;14）（q13;q32）。1997年Bergsagel等发现，至少90%的人类MM细胞系存在IgH基因（位于14q32）易位。随后，FISH等技术发现，60%的MM患者存在14q32易位，伙伴染色体（基因）众多，包括11q13（BCL1/CCND1）、4p16.3（FGR3和MMSET）、16q23（CMAF）、20q11（MAFB）和6p21（CCND3）等，这五种主要易位占IgH易位的60%，并具有互相排斥性。常见的染色体异常如下：
&&& 1. t（11;14）（q13;q32）：该染色体异常患者骨髓瘤细胞增殖指数低，形态学表现为小的成熟浆细胞、高表达CD20，预后中等。
&&& 2. t（4;14）（p16;q32）：是骨髓瘤特征性异常，此类患者预后差，且其他因素也影响其预后，如2007年法国Avet-Loiseau 报道，接受自体造血干细胞移植的t（4;14）患者中，低?茁2-微球蛋白（?茁2-MG）患者的生存期较高?茁2-MG患者长；而美国Mayo 临床医学中心在常规剂量马法兰治疗的患者中未发现此种现象。FISH研究显示，至少85%的t（4;14）患者同时存在13q-。
&&& 3. t（14;16）（q32;q23）：也是骨髓瘤特征性异常，占5%，常伴13q-。该易位导致16q32上的MAF基因过度表达，而MAF是CCND2、ITGB7等的正向转录调节因子。存在该染色体异常的患者生存期短。
&&& 17p缺失& 近来报道17号染色体短臂缺失，即17p-，在MM患者中约占10%。该区因染色体缺失而致许多基因丢失，其中最受关注的是位于17p13的p53基因。p53基因参与细胞的凋亡过程，它的缺失导致患者对化疗药物不敏感，预后极差。　
&&& 1q区域异常& 美国阿肯色州大学小石城分校的研究团队近来报道了1q区域获得性异常的预后价值。细胞遗传学分析表明，1号染色体长臂的额外染色体片断在1/3的患者中被发现。在接受整体治疗的患者中，具有1q21获得性异常或该区域CKSIB基因过表达的患者预后较差。
染色体异常& 凸显重要分型及指导治疗价值
&&& 染色体异常具有重要的预后价值，但不同的治疗策略预后价值存在差异。来那度胺、沙利度胺等新的治疗药物及异基因造血干细胞移植等，能部分克服预后不良细胞遗传学异常的影响，而以硼替佐米为基础的方案，则可能是目前克服不良预后因素（包括预后不良细胞遗传学异常）的最佳治疗策略。
&&& 美国Mayo临床医学中心主要依据染色体异常，提出了MM预后的mSMART分型（见表1、表2），并提出了相应的治疗策略：（1）初治高危、标危患者：初治高危患者采用硼替佐米为基础的治疗，标危患者则采用来那度胺或沙利度胺联合其他药物治疗。（2）首次复发高危患者：自体移植后复发患者，采用硼替佐米或来那度胺/沙利度胺为基础的方案或再次自体移植，如移植前的方案疗效好则重复原来方案；采用来那度胺/沙利度胺为基础的方案后复发，可考虑自体移植或硼替佐米为基础的方案；采用硼替佐米为基础的方案后复发，可考虑自体移植、部分可考虑异基因移植，也可选择来那度胺/沙利度胺为基础的方案；而化疗后复发者，可采用自体移植或重复既往治疗。
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请各位帮我看看我的染色体核型图
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在江苏省人民做的染色体检查，报告上是22p+，但是后来了解到22p+不是正规写法，请各位帮我看看到底是什么另外，还想问一下，同样是G显带，为什么有的能查出是ps+或pstk+，但是有的就只能查出p+
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add其实是一种非常模糊的表达方式表示从染色体某个位点开始 到所在臂末端的片段无法识别因此无法确定其临床意义只能通过其他手段来鉴定比如 N带（能够显示着丝粒） arrayCGH（能够检测基因组中有没有拷贝数发生变化）我个人认为不必过于担心 我们报过比你这个大得多的add 最后验证还是ps+你的这份染色体报告大概是400条带左右 这个水平可见的结构变化一般在10-20M以上 而这种长度的数量（拷贝数）增加或减少的患者一般都有较为明显的先天表型
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在江苏省人民做的染色体检查，报告上是22p+，但是后来了解到22p+不是正规写法，请各位帮我看看到底是什么另外，还想问一下，同样是G显带，为什么有的能查出是ps+或pstk+，但是有的就只能查出p+图片来了
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最好能把整个核型图都发出来
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最好能把整个核型图都发出来只有这么多，我在江苏省人民医院做的，当时只给了结论，都没给核型图，还是我后来去找了实验室人，他才拍了这么个照片给我
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如果不是摆放错误的话看起来是一个比较大的ps+
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如果不是摆放错误的话看起来是一个比较大的ps+亲，什么意思啊，怎么会涉及到摆放错误？是不是摆倒了？如果摆倒了是怎样？
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我觉得你知道的比一些专业人员都多！你是个爱学习的人！先来解释一下，p+就是短臂多一点东西不知道是什么性质,ps+短臂随体增加,pstk+短臂随体柄增加。要想分辨清楚，要求G显带质量要高，不能一个细胞，要多个细胞都有表现！有疑问就要进一步做N带，专门显示是不是随体的！
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我觉得你知道的比一些专业人员都多！你是个爱学习的人！先来解释一下，p+就是短臂多一点东西不知道是什么性质,ps+短臂随体增加,pstk+短臂随体柄增加。要想分辨清楚，要求G显带质量要高，不能一个细胞，要多个细胞都有表现！有疑问就要进一步做N带，专门显示是不是随体的！我已经在湖南家辉做n带了，但是结果还没出，已经53天了，做n带要这么久吗
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bbmc_sxh 我觉得你知道的比一些专业人员都多！你是个爱学习的人！先来解释一下，p+就是短臂多一点东西不知道是什么性质,ps+短臂随体增加,pstk+短臂随体柄增加。要想分辨清楚，要求G显带质量要高，不能一个细胞，要多个细胞都有表现！有疑问就要进一步做N带，专门显示是不是随体的！正如楼主说的 “p+”是一种不规范的描述方式 ISCN中 ps和pstk的+/-是近端着丝粒染色体短臂仅有的两种多态性这些（13、14、15、21和22号）染色体短臂上任何未知来源的片段 无论大小都应写作add(V)(p11.2)不仅是“p+” 我在国内一些单位的报告中还见过很多不规范的描述 比如“45,X0” “Yq+” “Y+” 甚至直接写“大Y”这些描述不属于任何命名体系 没有任何规范支持 却荼毒甚广 实在匪夷所思
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Davidzjy edited on
shirley落叶不死 亲，什么意思啊，怎么会涉及到摆放错误？是不是摆倒了？如果摆倒了是怎样？我只看到了一张不完整的核型图 只能就事论事 图中某些染色体有染色不均的情况 左边这条22号（按照规则 异常染色体应摆放在右侧）很像长臂被浅染了的20号 但这只是非常极端的情况而且 正如7L战友所说 单子上的结果是报告者看了很多图（规则要求至少20个细胞）才做出的判断所以我说的这种情况基本可以忽略 不放心的话做个N带 或者找一家报告质量（分辨率）高一些的单位再做一次就好了先前回复中所谓的排除“摆放错误” 只是本人习惯了这种严谨的表达方式 造成困惑 还请谅解平时骨髓看多了 读片时比较多疑 染色体稍微有点形态上的瑕疵就要仔细判读 以防漏诊
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shirley落叶不死 亲，什么意思啊，怎么会涉及到摆放错误？是不是摆倒了？如果摆倒了是怎样？我只看到了一张不完整的核型图 只能就事论事 图中某些染色体有染色不均的情况 左边这条22号（按照规则 异常染色体应摆放在右侧）很像长臂被浅染了的20号 但这只是非常极端的情况而且 正如7L战友所说 单子上的结果是报告者看了很多图（规则要求至少20个细胞）才做出的判断所以我说的这种情况基本可以忽略 不放心的话做个N带 或者找一家报告质量（分辨率）高一些的单位再做一次就好了先前回复中所谓的排除“摆放错误” 只是本人习惯了这种严谨的表达方式 造成困惑 还请谅解平时骨髓看多了 读片时比较多疑 染色体稍微有点形态上的瑕疵就要仔细判读 以防漏诊呵呵，谢谢你，这么耐心回复我，做医学研究的嘛，严谨点也是对患者负责，不用抱歉哈。我已经在家辉做n带了，就是结果等的人好揪心。都53天了，亲你知道家辉吗，除了家辉哪里还能做n带啊
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shirley落叶不死 亲，什么意思啊，怎么会涉及到摆放错误？是不是摆倒了？如果摆倒了是怎样？我只看到了一张不完整的核型图 只能就事论事 图中某些染色体有染色不均的情况 左边这条22号（按照规则 异常染色体应摆放在右侧）很像长臂被浅染了的20号 但这只是非常极端的情况而且 正如7L战友所说 单子上的结果是报告者看了很多图（规则要求至少20个细胞）才做出的判断所以我说的这种情况基本可以忽略 不放心的话做个N带 或者找一家报告质量（分辨率）高一些的单位再做一次就好了先前回复中所谓的排除“摆放错误” 只是本人习惯了这种严谨的表达方式 造成困惑 还请谅解平时骨髓看多了 读片时比较多疑 染色体稍微有点形态上的瑕疵就要仔细判读 以防漏诊亲，我还想问一下，如果是add未知片段增加，会有表型异常的表现吗？
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bbmc_sxh 我觉得你知道的比一些专业人员都多！你是个爱学习的人！先来解释一下，p+就是短臂多一点东西不知道是什么性质,ps+短臂随体增加,pstk+短臂随体柄增加。要想分辨清楚，要求G显带质量要高，不能一个细胞，要多个细胞都有表现！有疑问就要进一步做N带，专门显示是不是随体的！正如楼主说的 “p+”是一种不规范的描述方式 ISCN中 ps和pstk的+/-是近端着丝粒染色体短臂仅有的两种多态性这些（13、14、15、21和22号）染色体短臂上任何未知来源的片段 无论大小都应写作add(V)(p11.2)不仅是“p+” 我在国内一些单位的报告中还见过很多不规范的描述 比如“45,X0” “Yq+” “Y+” 甚至直接写“大Y”这些描述不属于任何命名体系 没有任何规范支持 却荼毒甚广 实在匪夷所思目前国内太混乱了，专业人员参差不齐，培训不规范，没有准入制度，没有考核体系，甚至没有相应的职称！太可悲了，那些被试剂公司捧上天的专家，你不服我我不服你！没有一个真正的专家！怎么和国外比呀，落后人家太多了。我看不清方向，只是自己慢慢求知吧！希望和楼主是同道中人，只为本医学遗传学专业贡献自己的微薄之力！
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像这样猜来猜去，不如做个基因芯片看看，是不是有重复的片段
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像这样猜来猜去，不如做个基因芯片看看，是不是有重复的片段我的n带结果刚出来，是22ph+，这正常吗？我网上都搜不到这种次缢痕增加的
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像这样猜来猜去，不如做个基因芯片看看，是不是有重复的片段我的n带结果刚出来，是22ph+，这正常吗？我网上都搜不到这种次缢痕增加的多态性，没有必要太担心！
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不管做N带或者Q带，分析方法和分辨率远不如芯片，当然也不是说芯片就是万能的，打个比方，既然有显微镜，干嘛非要用放大镜呢
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