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本帖最后由 细胞海洋 于
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EBM-2 是内皮细胞基础培养基，具体成分没有，其他的附件你可以看看~~~! \3 }- W- [4 e&&r0 C
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这些 培养基 就是一些 成分的细微区别 " F# O3 y: T. [
楼上上传的 文件 说的很清楚了
对于常用的大部分贴壁培养的细胞来说 都能适应的 没有太大影响&&比如同样是 杂交瘤细胞 用1640 dmem df12 m199 我们都养过&&都能良好的生长# n' R' J, G: `1 ~5 D
当然 可能部分细胞特殊&&比较挑 一些&&
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用1640养过LS174T细胞系，实验室老师用1640养过肺癌细胞系，其他的培养基没接触过，不过感觉如果是细胞系，对于培养基用这一个活那一个影响不大，彼此之间的差别不是很大；但对于原代培养或者比较娇气的细胞，可能选用哪种培养基就要好好斟酌了。
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普通细胞系的话用1640和DMEM没什么太大的区别，DMEM/F12的营养成分更全一些，一般养干细胞都用它。高糖的较适用于植物细胞的培养，低糖一般用于哺乳动物和人细胞系的培养，其他的培养基我也没有接触过。
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转载内容，供参考！, m# C9 Y) f# Z/ o" u0 A/ o
+ j1 f5 r) Q7 s( r3 S
常用培养基及基本特性
1、RPMI-1640 Medium
RPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。
&&|4 I7 G. N$ D/ M5 Y, [
2、Minimum Essential Medium（MEM）
也称最低必需培养基，它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。成分简单，可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。MEM-Alpha一般用于培养一些难培养细胞类型，而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM来培养。6 V9 `- S+ g+ J0 E" V6 x$ [) `
3、DMEM-高糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。适用于附着性较差，但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。6 g0 M1 @0 f8 u3 K3 _. M( F
4 y/ u" W# q&&i
4、DMEM-低糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养。低糖适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。1 q- k/ w& [+ j+ |# `, m- w% ]
4 w7 v9 {&&b: b- _/ x: h" A
5、DMEM/F126 z# {! s: f( c% x- O7 r! V
DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。F12培养基成分复杂，含有多种微量元素，和DMEM以1：1结合，称为DMEM/F12培养基（DME/F12medium），作为开发无血清配方的基础，以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。为了增强该培养基的缓冲能力，改良之一是在DMEM/F12（1：1）中加入15mMHEPES缓冲液。/ f6 g! B, ^; {0 b. _# _* e7 L/ Z
5 f' Q4 z6 `7 z
6、McCoy’s 5A
McCoy’s 5A Medium 主要为肉瘤细胞的培养所设计，可支持多种（如骨髓、皮肤、肺和脾脏等）的原代移植物的生长，除适于一般的原代细胞培养外，主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纤维细胞、人淋巴细胞、HT-29、BHL-100等上皮细胞。' H! x& ], M' @% S) F8 b% @% {( u
7、Iscove’s Modified Dulbecco Medium (IMDM)
Guilber 和Iscove将Dulbecco’Medium 改良为 Iscove’s Medium，用于培养红细胞和巨噬细胞前体。此种培养液含有硒、额外的氨基酸和维生素、丙酮酸钠和HEPES。并用硝酸钾取代了硝酸铁。IMDM还能够促进小鼠B淋巴细胞，LPS刺激的B细胞，骨髓造血细胞，T细胞和淋巴瘤细胞的生长。IMDM为营养非常丰富的培养液，因此可以用于高密度细胞的快速增殖培养。
* u. O5 ?( ~; x& G7 J; Q
8、M-199 Medium8 w' Y5 h: e, u&&_
1950年，Morgan成功研制出具有确定化学成分的细胞培养液，即M-199，主要用于鸡胚成纤维细胞培养。此培养液必须辅以血清才能支持长期培养。M-199可用于培养多种种属来源的细胞，并能培养转染的细胞。
9、Leibovitz Medium （L-15）' x4 y8 `&&S( K" [0 U4 S& E
L-15培养液适用于快速增殖瘤细胞的培养，用于在CO2缺乏的情况下培养肿瘤细胞株。此培养液采用磷酸盐缓冲体系，氨基酸组成进一步改良，并由半乳糖替代了葡萄糖。
( r9 K' w# N, [9 z3 C7 R
10、Ham’s F-10培养基：适应小鼠细胞、人类二倍体的培养。
4 T5 q6 j7 C: {' ~: |
11、Ham’s F-12培养基：可以在加入很少血清的情况下应用，特别适合单细胞培养和克隆化培养，是无血清培养中常用的基础培养液。" l- M&&~8 g4 u6 @$ P
12、William’s Medium E：用于大鼠肝上皮细胞的长期细胞培养。
13、MCDB 131 培养液：用于培养内皮细胞。9 i0 k* O, D2 y7 ~
. o, L% C2 o9 P
14、Opti-MEM I Reduced Serum Media：用于培养造血细胞。
15、植物血凝素（PHA）：增加细胞转化和DNA合成。
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文可提笔泣鬼神，武能挽袖干细胞。
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谢谢各位！
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资料很全面，学习了
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【专题讨论】GIBCO培养基（DMEM）的真假之个人经历
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这个帖子发布于6年零140天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
因为实验室初期经费紧张，一直都不是从总代理那里拿的GIBCO货，价格便宜几十块钱，一直没有在意真假问题，甚至连想都没有想过有假的。直到有一天听说Trizol有假货后（中间在不知情的前提下险些买了假货Trizol，已买未用，后退掉），才去关注。谁知道，以前从一个固定公司那里买的培养基几乎全是假货，顿时傻眼。由于还有存货，而且以前养细胞还凑合能养，所以把存货全部用掉（当然不是用在重要的实验上），并留下照片，做了真假对比。闲话少续，看图。在这里提醒各位科研人员，节省经费固然重要，但至少要花了钱办成事，奸商还是要提防。个人教训，希望引以为戒。查询真伪及其它相关问题请见/bbs/topic/；/bbs/thread/?&keywords=%C5%E0%D1%F8%BB%F9+%D5%E6%BC%D9
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谁真谁假？左真右假，请仔细看。封口，字体，另外大块蓝色区域，假货有些粗糙。
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真，特写。
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假，特写。
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真粉，颜色偏黄。倒入瓶中，白色为NaHCO3。
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smh9839 edited on
还是真粉，同上。
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假粉，颜色偏红。
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还是假粉。
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拍摄相机为佳能A610。由于光线、相机本身及个人技术原因，会有色差。看个大概，都配成溶液后没有明显差别了，未照。这是本人经历，不代表所有可能出现的情况。请尽量从正规销售渠道购买。欢迎大家发表个人看法。
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我买之前，先联系了GIBCO公司，公司告诉我本地的唯一代理的电话，这样应该比较放心吧。周围有很多小代理，问过价格，差距有时是上百，就觉得有问题
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my god这样的帖子好！多多益善
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天啊~这个这个~真有假的~我专门看了下我们用的是真的谢楼主真是有图有真相
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最简单的 真粉拿出来绝对是那种到处飞的感觉
假粉颗粒感很重我的Hyclone上海总代 上海世仪生物
顺便做下广告！ 哈哈
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外观如果没把握鉴别的话，可以到invitrogen的网站上输入Lot NO，然后看包装上的过期时间（Exp）与对应Lot NO文件上的过期时间是否一致，假货的话一般用的都是已过期的Lot NO
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zhouyongchun_1 外观如果没把握鉴别的话，可以到invitrogen的网站上输入Lot NO，然后看包装上的过期时间（Exp）与对应Lot NO文件上的过期时间是否一致，假货的话一般用的都是已过期的Lot NO方法不是很可靠吧，不过也算是一种吧！
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我们也买到过假的，不过是液体的，很愤怒。仔细看得时候会觉得做工比较粗燥，字体不是非常清楚，盖子上的那个圆的logo看上去也比较粗燥！
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feixiang1409 最简单的 真粉拿出来绝对是那种到处飞的感觉
假粉颗粒感很重我的Hyclone上海总代 上海世仪生物
顺便做下广告！ 哈哈是这么回事吗，THERMO 吉泰的人看了会怎么说？
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我们也买到过假的，发现了以后愤怒啊，后来请了个本地代理来，发现大部分假的做的都很糙，有一些不是假的，但是是过期的，不是很好鉴别
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muhuiting 是这么回事吗，THERMO 吉泰的人看了会怎么说？你想怎么说?
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看来也买过假的，主要是日期的字体不太一样
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太郁闷了，刚定了液体的500ml,160元/瓶。不知道是不是真的。关键是买了假的还能不能用，是否会引起污染呢。怎么处理？花钱买的总不能丢了吧！
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用过假一次性滤器的飘过
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丁香园准中级站友
楼主还真是个细心的人我们实验室都直接买瓶装的液体培养基我用过GIBCO的DMEM/F12，也试了试国产的培养基，感觉也没什么差别。至于真假的问题，我们一般不买最贵的，也不买最便宜的。你要是把试剂商的利润压的太低，他们往往会给假货你的。
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我也买到过假货，只是当时以为个别的问题，根本没忘这方面想。
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如果从包装的印刷上无法区别的话，有一个办法是看切口。假货是直切的，真货有一个倒三角，并且左右不一样。另外就是看序列号，真的在一盒里面每个都不同，假的是同一个序列号。以前上过当，还有10盒放在实验室。假货害人，不过造假的畜-生起码应该测试后再卖，不要让细胞都不怎么生长。
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刚一看，发现我们用的粉剂和那假的包装一模一样，不是吧都没发现，震惊！
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我打算买sigma的，价格一样，不用费神费时间辨别真假，md
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我也用到过一批，用这DMEM粉配好液后，用滤膜过滤几乎过滤不下，想来也是买到假货了
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谢谢楼主提醒，拍照辛苦了以后买培养基真是要多加注意了
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谢谢提醒，
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好帖子啊 啊
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楼主，有GIBCO 低糖DMEM培养基粉末配置成培养液的具体操作方案么，谢谢！
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楼主 请学着点 最关键的是 各经销商也要学着点 别误导客户RPMI Medium 1640 Cat.no.
这个对应是1L粉末包装的货号DMEM Cat.no.
这个对应是1L粉末包装的货号L-15 Cat.no.
这个对应是1L粉末包装的货号包装盒外面的货号分别是39 ，这些货号代表的是 整盒包装的编号（GIBCO 1L粉末的培养基不零售，GIBCO单包的包装跟整盒包装就是这样区分的，另外每包右上角都有独特的流水编码（四位数） ，这样跟批号一起构成每袋独一无二的身份）另外：因我公司卖出的GIBCO的培养基数量巨大，也有投诉的客户 投诉一：极个别包装漏粉！ 这属于正常情况，
机器不可能永远不出错 对吧，前几天我们卖出的Corning培养瓶，竟然有盖子遗失的情况，估计也是机器出错的缘故，我们正常也索赔到了（当时通过吉泰购买的，他们可以作证），我这也有实物照片作证！关于漏粉的情况，因为几率极小，索赔恐怕很难，常规培养基每包的成本也就30多元，整个投诉流程走下来成本也是很高的，所以经销商遇到这种事一般都自我牺牲一些利润 以达快速解决的目的，省事 省心，大部分客户也不是很计较！投诉二：粉末的颜色跟之前用的不一样！这个我们客户投诉过，当时我也很纳闷，后来让客户打GIBCO的免费电话 技术支持给的答复大体是这样的：批次不同颜色有时候会有差异，属于正常情况！投诉三：pH值偏高!
这个属于正常情况， 有N多客户是粗枝大叶型的，不喜欢调pH值，溶解了立马就用，自认为配好的培养基pH值是特定的不需要调，其实每盒培养基的盒子上都有配制步骤，倒数第二步说明了要调pH值的，另外还有客户NaHCO3 和Na2CO3不区分，本身要求加NaHCO3的，这方面个别客户也有搞错的投诉四：包装盒的塑料封膜收缩不完全！我个人判断：这个属于正常情况，这应该也应该归属为 机器故障，塑料膜收缩机我也用过，里面有数根可以产生红外线的热收缩灯管，长时间运转中 如果个别灯管被烧掉，肯定会造成塑料膜的热收缩不均的， 所以这种培养基是不影响使用的，我们曾经遇到一批这样的培养基，个别客户会讲究，耐心解释后大部分客户都能接受！补充
同一盒的培养基 内包装批号跟盒子外面的标签批号有不同的 但效期相同！
有些客户用量少，喜欢买一包两包的，很偶然的一次，我们拆包零售的时候 发现的这个问题，网上通过批次查询质检报告后发现才明白 两个批次（分装批次）都是来源于同一个大批次！这一点我们没跟GIBCO的技术人员去求证，这样的几率肯定是很小很小的 技术支持估计根本没遇到过 因为接电话的GIBCO技术人员不可能是生产车间的技术人员，问他们的话 说不定 会说是假货呢！顺便做个广告：我们是南京宝灵科生物技术有限公司
以下培养基现货供应 批发！假一罚十，经销商首次订货 可以货到付款（验明真假后付款）如发现我公司供应了假培养基，可以网络攻击 诋毁我公司
正常只供应以下三种常用培养基，其他型号的培养基市场需求量小，申请不了特价 一般不供应，不过量大客户或者工业可以来电咨询！比如GIBCO 00瓶！，其它非培养基类的产品 抗体 细胞因子等 量大也可咨询
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我们实验室的好像和上面两种图片都不一样，而且上面说的好像也没有一种可以确定辨别真假的方法吧
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【求助】DMEM-F12培养基的PH值问题！
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这个帖子发布于11年零230天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我按照GIBCO公司的DMEM-F12粉剂包装上面的说明配制的基础培养液（说明书中没有要加入HEPES）和完全培养液，然后调整PH到7.4，但在培养细胞时，即使不接种细胞，培养液也会变黄（&24h),已经排除了污染的问题，请问大家至这是怎么回事？谢谢指教！！
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xiaoba_008 edited on
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碳酸氢纳有没有加？
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ｄｅｍｅ／ｆ１２ｇｉｂｃｏ公司的有两种，一种是有15毫摩尔每升ｈｅｐｓ，这种只需要加1.2克碳酸氢钠，另一种没有ｈｅｐｓ，自己按15毫摩尔每升加也行，ｐｈ在7.2－7.4之间就行，我用的前者，配好后的液体就是明显偏酸，也是偏黄，但是并不影响培养效果，没关系的！
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说明书上要求加入NAHCO3
2.0克，没有要求加入HEPES
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可能是盖了没盖紧，导致CO2渗入使培养基pH值下降，肉眼所见就是培养基变黄
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一般一包DMEM冻干粉＋2.0克HEPES+2.1克NaHCO3可大致保证所配的纯DMEM培养基的pH值在我们所需要的范围之内
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hepes 虽然说明上没有说加,但书上都说加上好.我觉得你还是加上好.
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有可能你加入碳酸氢钠时，没有完全溶解，PH值在上面一层测得不准，就过滤了。导致过滤后的培养基PH值偏低。
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我还是不明白，请问DF12培养基，含15mM HEPES，究竟要加多少NaHCO3呢？？？1.2g会太少了吗？，1.2g这个量是说明书上说的吗（由于我都是一小包一小包买的，没配置说明书），还是书上说的呢？DMEM按照说明书是加3.7g，是否太多，加2.2g就够了？请教。谢谢
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DMEM培养基的成份适合于CO2浓度在7－10％的情况下使用，此时需要加入碳酸氢钠3.7g/L。如果在5％的CO2下使用，则需要调整碳酸氢钠的加入量，2.0-2.2g比较适合。D/F12的碳酸氢钠加入量我认为在1.6-1.8g就大致不需要调整pH值了。All 1X DMEM liquid formulations in our catalog contain 3.7 g/L of sodium bicarbonate, the amount specified in the original citation for Dulbecco's medium (Dulbecco, R and Freeman, G. (1959) Virology 8, 396). This level of sodium bicarbonate is appropriate for incubators set at a 7-10% CO2 atmosphere. The medium will be buffered appropriately if the incubator is adjusted to 7-10% CO2. If this is not possible, the DMEM powder (where sodium bicarbonate must be added prior to use) can be prepared with 2.0 to 2.2 g/L of bicarbonate for use in 5% CO2 incubators. ATCC sometimes recommends DMEM formulations modified to contain 1.5 g/L, which is slightly less than what is typically suggested for 5% CO2 environments, Minimum Essential Medium (with 2.2 g/L sodium bicarbonate), RPMI
g/L sodium bicarbonate), CMRL
g/L sodium bicarbonate), and Medium 199 (2.2 g/L sodium bicarbonate). However, using unmodified classic media in the proper CO2 environment has always been appropriate, and can be substituted for low bicarb medium
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D/F12加入碳酸氢钠3.7g/L了，细胞培养需偏酸一点，改用10％的CO2培养箱是不是可以降一点PH值？
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的确，Gibco有不同的产品，我用的是含15mMHEPES的，要求加入1.2gNaHCO3，配出来的DMEM明显偏酸，发黄，很难调节，用这种DMEM培养细胞时可能会影响细胞的贴壁、生长，目前我的细胞贴壁较慢、生长速度也很一般！！各位有解决办法的分享一下吧，先谢过了...
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要加HEPES的，说明书上有没有标明是否含有HEPES？
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你这是酸性的表现啊 估计你是漏气了
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我的也是这种情况，你可以找一下相关的说明书，他们公司的网站上有，可以用NaOH调一下，咨询我们实验室的同学也是用NaOH调节，说明书上说用1N的NaOH，但是可以用饱和NaOH，这样可以少加一些。
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sea_liu 我按照GIBCO公司的DMEM-F12粉剂包装上面的说明配制的基础培养液（说明书中没有要加入HEPES）和完全培养液，然后调整PH到7.4，但在培养细胞时，即使不接种细胞，培养液也会变黄（&24h),已经排除了污染的问题，请问大家至这是怎么回事？谢谢指教！！我的也是这种情况，你可以找一下相关的说明书，他们公司的网站上有，可以用NaOH调一下，咨询我们实验室的同学也是用NaOH调节，说明书上说用1N的NaOH，但是可以用饱和NaOH，这样可以少加一些。
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