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槲皮素对蛋黄卵磷脂含量的影响
试验将29周龄海赛蛋鸡240只随机分4组,每组6个重复,每个重复10只鸡,对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮基础上分别添加0.02％、0.04％和0.06％槲皮素,预试期1周,试验共8周.旨在研究饲粮中添加槲皮素对蛋黄卵磷脂含量的影响.结果表明,与对照组相比,0.04％槲皮素组蛋黄卵磷脂与粗脂肪含量分别显著提高19.86％和5.81％(P＜ 0.05); 0.02％槲皮素组血清游离脂肪酸(FFA)含量显著升高(P＜0.05)；0.04％槲皮素组血清极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C)、载脂蛋白B(apo-B)、载脂蛋白A1(apo-A1)含量均显著升高(P＜0.05)；0.04％槲皮素组血清雌二醇(E2)、胰岛素(INS)含量与0.02％槲皮素组胰岛素(INS)含量均显著升高(P＜ 0.05).由此可见,一定剂量槲皮素能通过改善蛋鸡内分泌活动,提高血脂水平来提高蛋黄卵磷脂含量.
作者单位：
东北农业大学动物营养研究所
年，卷(期)：
机标分类号：
在线出版日期：
基金项目：
哈尔滨市科学技术局科技创新人才研究专项资金
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蛋黄卵磷脂”的主要成份及保健功能
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蛋黄卵磷脂”的主要成份及保健功能
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& 能提高记忆吗
能提高记忆吗
1什么药物可以提高记忆力的药物？
问：BR>详细病情及咨询目的:得过抑郁症所引起的记忆力减退，能不能依靠药物来提高记忆力，什么药物可以提高记忆力
爱心医生: 你好！首先祝你早日恢复健康！我来给你谈谈“怎样增强记忆力”的问题
人大脑中有无数亿个神经细胞在不停的进行着繁重的活动，科学研究证实，饮食不仅是维持生命的必需品，而且在大脑正常运转中也发挥着十分重要的作用。有些食物有助于发展人的智力，使人的思维更加敏捷，精力更为集中，甚至能够激发人的创造力和想象力。
　　1）营养保健专家研究发现，一些有助于补脑健智的食品，并非昂贵难觅，而恰恰是廉价又普通之物，日常生活随处可见。以下几种食品就对大脑十分有益，脑力劳动者、在校学生不妨经常选食。
　　1.牛奶。牛奶是一种近乎完美的营养品。它富含蛋白质、钙，及大脑所必需的氨基酸。牛奶中的钙最易被人吸收，是脑代谢不可缺少的重要物质。此外，它还含对神经细胞十分有益的维生素B1等元素。如果用脑过度而失眠时，睡前一杯热牛奶有助入睡。
　　2.鸡蛋。大脑活动功能，记忆力强弱与大脑中乙酰胆碱含量密切相关。实验证明，吃鸡的妙处在于：当蛋黄中所含丰富的卵磷脂被酶分解后，能产生出丰富的乙酰胆碱，进入血液又会很快到达脑组织中，可增强记忆力。
国外研究证实，每天吃1、2只鸡蛋就可以向机体供给足够的胆碱，对保护大脑，提高记忆力大有好处。
　　3.鱼类。它们可以向大脑提供优质蛋白质和钙，淡水鱼所含的脂肪酸多为不饱和脂肪酸，不会引起血管硬化，对脑动脉血管无危害，相反，还能保护脑血管、对大脑细胞活动有促进作用。
　　4.味精。味精的主要成分是谷氨酸钠，它在胃酸的作用下可转化为谷氨酸。谷氨酸是参加人体脑代谢的唯一氨基酸，能促进智力发育，维持和改进大脑机能。常摄入些味精，对改善智力不足及记忆力障碍有帮助。由于味精会使脑内乙酰胆碱增加，因而对神经衰弱症也有一定疗效。
5.花生。花生富含卵磷脂和脑磷脂，它是神经系统所需要的重要物质，能延缓脑功能衰退，抑制血小板凝集，防止脑血栓形成。实验证实，常食花生可改善血液循环、增强记忆、延缓衰老，是名符其实的“长生果”。
　　6.小米。小米中所含的维生素B1和B2分别高于大米1.5倍和1倍，其蛋白质中含较多的色氨酸和蛋氨酸。临床观察发现，吃小米有防止衰老的作用。如果平时常吃点小米粥、小米饭，将益于脑的保健。
　　7.玉米。玉米胚中富含亚油酸等多种不饱和脂肪酸，有保护脑血管和降血脂作用。尤其是玉米中含水量谷氨酸较高，能帮助促进脑细胞代谢，常吃些玉米尤其是鲜玉米，具有健脑作用。
　　8.黄花菜。人们常说，黄花菜是“忘忧草”，能“安神解郁”。注意：黄花菜不宜生吃或单炒，以免中毒，以干品和煮熟吃为好。
9.辣椒。辣椒维生素C含量居各蔬菜之首，胡萝卜素和维生素含量也很丰富。辣椒所含的辣椒碱能刺激味觉、增加食欲、促进大脑血液循环。近年有人发现，辣椒的“辣”味还是刺激人体内追求事业成功的激素，使人精力充沛，思维活跃。辣椒以生吃效果更好。
　10.菠菜。菠菜虽廉价而不起眼，但它属健脑蔬菜。由于菠菜中含有丰富的维生素A、C、B1和B2，是脑细胞代谢的“最佳供给者”之一。此外，它还含有大量叶绿素，也具有健脑益智作用。
　11.橘子。橘子含有大量维生素A、B1和C，属典型的碱性食物，可以消除大量酸性食物对神经系统造成的危害。考试期间适量常吃些橘子，能使人精力充沛。此外，柠檬、广柑、柚子等也有类似功效，可代替橘子。
　12.菠萝。菠萝含有很多维生素C和微量元素锰，而且热量少，常吃有生津、提神的作用，有人称它是能够提高人记忆力的水果。菠萝常是一些音乐家、歌星和演员最喜欢的水果，因为他们要背诵大量的乐谱、歌词和台词。
2）“是药三分毒”，以下给你介绍一则成功治愈“记忆力差”的秘方：
鸽子蛋一个(或鹌鹑蛋5个)，打碎，莲子肉10粒，砸碎，加水约两汤匙，搅匀蒸熟，早晨空腹食用，一日一次，连吃7天，对提高智力和增强记忆力有特效，忌酒、皮蛋、蚕豆、海带、辣物。可每年或半年吃一个疗程。
以上回答如果满意，请不要辜负我的一片好意，及时点击“采纳为答案”。
爱心医生: 音频回复 GetPostFlash('3','0414533');
爱心医生: 最好不要依靠药物来提高记忆力，因为人的一生即便像爱因斯坦一样好这才不过用了百分之一，吃药只是一种心理暗示，然而吃西药肯定会有负作用，所以平时要多看书，从一点一滴记起，而且坚持每天吃几颗核桃，一个月下来你就发现效果很好。
2读书能提高记忆力吗或者读书能提高什么能
问：病情描述:我现在30岁了 感觉记忆力很不好 记不住东西 记住的东西 转眼就忘了曾经治疗情况和效果:下棋 扑克想得到怎样的帮助:读书可以提高记忆力吗 或者读书能提高什么能力
李晓雪医师: 病情分析：平时的话,保持良好情绪,经常参加体育锻炼,养成良好的生活习惯,从饮食方面来讲,造成记忆力低下的元凶是甜食和咸食指导意见：而多吃维生素,矿物质,纤维质丰富的蔬菜水果可以提高记忆力.银杏叶提取物可以提高大脑活力,注意力,对记忆力也有一定帮助.至于咖啡,它可以在短时间内使大脑兴奋,如果需要我们集中注意力,记忆力做事,可以事先喝一杯咖啡.
刘海青医师: 病情分析：现在主要是调整你的心态啊，不要太担心的啊。如茶，咖啡，巧克力及可乐饮料。指导意见：多吃有益智作用，增进神经系统活跃的食物，如大蒜，杏仁，核桃，全麦制品，糙米，植物种子，蔬菜油，三文鱼，生的葵花子等；远离污染；少摄入刺激性食物，
赵国栋医师: 病情分析：要增强记忆力除了要坚持锻炼身体外,还要保持良好的睡眠.
指导意见：
要多吃些健脑的食品如;菠菜,韭菜,南瓜,葱,花椰菜,菜椒,芹菜,西红柿,胡萝卜,蒜苗,核桃,花生,开心果,腰果,松子,杏仁,大豆及其制品.还有蛋黄等都对记忆力有很大的增强.中年人最好不要去吃药,因为是药三分毒.跑步,打太级拳,按摩头皮的等都会改善记忆力.
3补锌能增加记忆力吗
问：全部症状现在记忆力减退.头发掉.有人告诉我吃点锌就行,请问行吗?发病时间及原因:治疗情况:想要得到的帮助:吃锌可以吗?告诉一下.
爱心医生: 病情分析:你好,补一点锌是可以的,但必须知道人的记忆力是随年龄退化的.意见建议:对头发掉是没什么作用的.希望能够帮到你,祝您早日康复!
马占欣医师: 病情分析:你好,随着年龄的增长,各脏腑组织会出现衰退的表现,继而出现一系列的不良反应意见建议:补锌有提高记忆力的作用,建议使用黄金搭档,可全面补充机体需要的营养物质,同时要保持心情舒畅避免情绪暴躁不安,多吃瓜果蔬菜补充维生素,积极锻炼身体增加机体抵抗力
张小娟医师: 病情分析:您好,这样的情况补锌也是有一定的效果的.但平时要注意营养方面的加强的.意见建议:可以适当服用点健脑的食物或者药物,同时服用点安神补脑液,养血生发胶囊,用防脱的洗发水.
4有哪些方法能快速提高记忆力
问：病情描述:小时候记忆还行，在初三时以为拔虎牙打了麻醉，后来记忆越来越差，高中又因为阑尾炎手术打了麻醉，现在记忆渐渐退化，刚说的事一会就忘了。。。能否有提高记忆的方法？？？曾经治疗情况和效果:有经常吃核桃。想得到怎样的帮助:想得到有效提高记忆力的方法。
刘兴力医师: 病情分析：你好，一定要保证每天有7-8小时睡眠，让大脑得到非常充分的休息才行。指导意见：你可以经常用枸杞、桂圆、合欢花等泡水喝，有助于睡眠作用。可以增加身体的锻炼，才改善血液循环的新陈代谢，促进大脑的供血，增强你的记忆
尹泽远医师: 病情分析：您好；提高记忆力，可多吃核桃、芝麻、桂圆、天麻、莲子等，精神紧张、压力过大、焦虑不安等情绪，对大脑不利。指导意见：应多进行体育锻炼，提高大脑的供氧量。保持补充睡眠，建议可服用健脑丸。
张花换医师: 病情分析：现在主要是调整你的心态啊，不要太担心的啊。指导意见：多吃有益智作用，增进神经系统活跃的食物，如大蒜，杏仁，核桃，全麦制品，糙米，植物种子，蔬菜油，三文鱼，生的葵花子等；远离污染；少摄入刺激性食物，如茶，咖啡，巧克力及可乐饮料。
5我20岁是学生怎样才能有效的提高记忆力
问：我20岁是学生怎样才能有效的提高记忆力？
病情描述:以前记忆很好现在很差有时候背什么老师留得作业什么的有点难的背诵有时候还行不过大部分记得也容易忘掉我想提高记忆力还想把记住的保持着不要忘掉吃些什么好
爱心医生: 病情分析：1.注意集中。记忆时只要聚精会神、专心致志，排除杂念和外界干扰，大脑皮层就会留下深刻的记忆痕迹而不易遗忘。
2.兴趣浓厚。感兴趣就很容易记住。3.理解记忆。理解是记忆的基础。只有理解的东西才能记的牢、记得久。
4.过度学习。即对学习材料在记住的基础上，多记几遍，达到熟记、牢记的程度。过度学习的最佳程度是150%。5.及时复习。对刚学过的知识，趁热打铁，及时温习巩固，是强化记忆痕迹、防止遗忘的有效手段。6.经常回忆。学习时，不断进行尝试回忆，可使记忆错误得到纠正，遗漏得到弥补，使学习内容难点记的更牢。
7.读、想、视、听相结合。可以同时利用语言功能和视听觉器官的功能，来强化记忆，提高记忆效率。8.运用多种记忆手段。根据情况，灵活运用分类记忆、特点记忆、谐音记忆、争论记忆、联想记忆、趣味记忆、图表记忆、缩短记忆及编提纲、做笔记、卡片等记忆方法，均能增强记忆力。9.掌握最佳记忆时间。一般来说，上午9～11时，下午3～4时，晚上7～10时，为最佳记忆时间。
10.科学用脑。在保证营养、积极休息、进行体育锻炼等保养大脑的基础上，科学用脑，防止过度疲劳，保持积极乐观的情绪，能大大提高大脑的工作效率。这是提高记忆力的关键。指导意见：有益增强记忆力的食物：葡萄汁还可以在短期内提高记忆力。野生蓝莓果能加快大脑海马部神经元细胞的生长分化，提高记忆力。牛奶；鸡蛋；鱼类；贝类；动物内脏(心、脑、肝、肾)；瘦肉；花生；小米；玉米；黄花菜；辣椒；菠菜；橘类；菠萝；胡萝卜；油梨；藻；卷心菜；大豆；木耳；杏子
6怎样才能提高记忆力
问：全部症状:记忆力不好。鱼的记忆还有三秒呢？有时候转身就忘事！！但有段时间强制自己记住事，好了一点。之后又不行了。发病时间及原因:小的时候，有的事情没办好时我就会说我忘记了，这时家长也不会太责怪。久了我就经常拿这个打掩护，渐渐的记性就不行了。当时是有这个心理暗示吧。但现在肯定是没有了吧。那现在怎么样能提高记忆力呢？治疗情况:没有想要得到的帮助:我不要药物治疗，我不会随便吃任何补脑的药！请给我介绍一些食物治疗法。我经常喝牛奶，不过不是纯牛奶。也吃过核桃但我觉得没什么用。疗效慢一点没关系。
爱心医生: 病情分析:你好，人的大脑一般是越用越好用，你现在长时间记忆力不好，也有可能是你自己的下意识里就认为自己记忆力不好，所以不去记。意见建议:你可去书店买些针对记忆力的书籍，多用大脑，经常地对一些想要记住的东西进行重复记忆，还有就是有意识的对自己说，我可以记住，我能行，慢慢进行改善，祝你身体健康。
许友忠医师: 病情分析:你好，可选用口服五味子颗粒，健脑补肾丸，对于疾病的恢复都有帮助，也可以用参麦氨基酸口服液治疗，具有抗疲劳，调节免疫功能，改善记忆，补气益血的功能。意见建议:需要养成良好的饮食习惯，多吃新鲜果蔬、高蛋白类的食物，多喝水，补充身体所需的水分，多参加各种运动锻炼，加强体质，还要有科学的生活规律，不要经常熬夜
爱心医生: 病情分析:一般的心里作用大 而且时间常了 有依赖性 时刻告诉自己记忆力不比别人差意见建议:核桃是比较有用的 还有杏仁 榛子 干果都是 有助于记忆。平时记些数字，比如大马路上的数字，练一练。实际这也和懒惰有关 我及记忆力不好 。但是经过练习提升了
7咋样才能提高记忆力，请帮助
问：病情描述:记忆力原来原差，生活中，工作中办的事，考试题，记不住，有时候连以前的朋友名字也记不起。曾经治疗情况和效果:一直没有得到治疗想得到怎样的帮助:想提高记忆力
刘猛医师: 病情分析：平时的话,保持良好情绪,经常参加体育锻炼,养成良好的生活习惯,从饮食方面来讲,造成记忆力低下的元凶是甜食和咸食,指导意见：而多吃维生素,矿物质,纤维质丰富的蔬菜水果可以提高记忆力.银杏叶提取物可以提高大脑活力,注意力,对记忆力也有一定帮助.至于咖啡,它可以在短时间内使大脑兴奋,如果需要我们集中注意力,记忆力做事,可以事先喝一杯咖啡.undefined
爱心医生: 你好，可选用口服五味子颗粒，健脑补肾丸，对于疾病的恢复都有帮助，也可以用参麦氨基酸口服液治疗，具有抗疲劳，调节免疫功能，改善记忆，补气益血的功能。一种高纯度蛋黄卵磷脂的制备方法
专利名称一种高纯度蛋黄卵磷脂的制备方法
技术领域本发明涉及食品、药品配料生产领域，特指一种以蛋黄为原料，采用脉冲超声波提取技术、亚临界流体萃取技术以及磁性纳米分离技术生产高纯度蛋黄卵磷脂的方法。
背景技术卵磷脂(PC)是目前全世界医学界唯一公认有健脑、健智及增强记忆力、提高抵抗力的保健产品，享有“血管清道夫”的美誉，其来源主要有蛋黄、脑髓、内脏、血液及油料作物的种子，其中以大豆和蛋黄为主。相比于大豆PC，蛋黄PC乳化性强、氧化稳定性好，在生物亲和性和安全性等方面明显优于植物来源的大豆PC，因此，近年来西方发达国家的人们更钟情于蛋黄PC。综上，蛋黄PC将会成为日后PC产品研究与开发的热点。
国内外蛋黄PC的提取方法主要包括有机溶剂萃取法、超临界CO2萃取法等，高纯PC的 精制方法主要以柱层析法为主。其中有机溶剂萃取法研究应用最多，CN. 5、CN、CN.CN. 2.CN. 5、CN. 2 等公开了蛋黄磷脂的有机溶剂萃取法，此法虽然产量大，但有机溶剂耗量大、工艺时间长、提取率低，且所采用的有机溶剂多数不符合环保要求，部分有机溶剂残留于磷脂中会造成食品安全隐患。为了提高该法的萃取率，消除可能产生的食品安全隐患，研究人员采用食品上允许使用的乙醇作为溶媒，采用超声等手段辅助提取蛋黄磷脂，如肖虹等(超声辅助提取鸡蛋卵磷脂的工艺研究，食品工业科技，2010)、CN. O、CN. 4公开的蛋黄卵磷脂的超声-乙醇辅助提取法；然而单频超声波强度较强，容易造成蛋黄蛋白质的严重变性。针对上述有机溶剂萃取法存在的技术关键问题，本发明引进脉冲超声波辅助乙醇提取技术，脉冲超声波技术与传统恒定声强的超声波技术相比，对细胞壁的破坏作用更强，提取效率高，同时萃取温度更低，对PC和蛋黄蛋白质的变性程度影响也较小。此外，采用超临界CO2萃取法制备PC也备受关注，CN. O、CN. I、CN. O、CN、CN. I、CN、CN. O、CN. 5、CN. O公开了蛋黄卵磷脂的超临界流体萃取技术，然而超临界CO2萃取法始终存在着处理量小、设备投入大、产品成本较高等问题，制约了其在磷脂生产工艺中的大规模推广。亚临界流体萃取技术是一项新型萃取与分离技术，具有无毒、环保，非热加工、保留提取物的活性成分不破坏、产能大、可进行工业化大规模生产，节能、运行成本低等优点，为蛋黄中蛋黄油的萃取提供了新思路。张民等人报道了亚临界丙烷萃取蛋黄粉中蛋黄油的研究，该法采用淋洗工艺、所需溶剂易得、蛋黄油得率较高。但是它的不足点为(I)萃取效率较低、提取时间较长；(2)溶剂消耗量大、因而耗能高，且易残留。而本发明选择丙烷或丁烷为萃取溶剂，采用搅拌浸提式工艺进行蛋黄油的逆流重复提取，大大提高萃取效率，缩短了提取时间。制备高纯蛋黄卵磷脂的另一关键技术就是后续精制步骤，目前，对PC纯化研究较多、且获得产业化的方法主要是柱层析法，如王卫芬(蛋黄油脱酸及蛋黄卵磷脂纯化工艺研究,江南大学硕士论文，2008)、CN. X、CN. 5通过硅胶或氧化铝柱层析纯化蛋黄磷脂，有效提高了终产物蛋黄卵磷脂的纯度。柱层析法虽然可以得到含量90%左右的高纯度PC，但处理量小，周期长，且需引入部分有毒溶剂是此法突出的缺点。采用无机盐复合沉淀法，也可实现PC的纯化。日本专利报道用95%乙醇与粗蛋黄磷脂混合，然后用ZnCljX淀离心分离后，收集ZnCl2磷脂复合物，再加入冷却的丙酮，在氮气保护下搅拌过滤后蒸脱溶剂，可得到纯度达99. 6%的卵磷脂。无机盐复合沉淀法利用无机盐对磷脂分子的选择性，虽然可以大大提高卵磷脂的含量，但会在操作中引入金属离子，影响产品质量，造成金属离子污染。磁性纳米分离技术是以磁性纳米载体为依托的高新分离技术，当颗粒的粒径小于30 nm时，则具有超顺磁性，称为超顺磁性纳米颗粒；超顺磁性纳米颗粒具有较强的磁响应性，在外加磁场的作用下，磁性颗粒可以快速富集、定位，当外加磁场消失后，颗粒的磁性也 随即快速消失，目前已在生物医药、生物技术、化学、环境治理等领域得到了广泛的应用，成为当今最富有发展前景的新型分离技术之一。目前磁性纳米分离技术在高纯蛋黄PC的制备工艺中未见报道。本发明采用特定金属离子对超顺磁性Fe3O4纳米颗粒进行表面功能化修饰，赋予其特异性分离目标组分的功能，且制备所得的磁性纳米载体可实现重复利用，大大降低了工业化生产成本。
本发明提供一种高纯度蛋黄PC的制备技术，通过脉冲超声波辅助乙醇提取蛋黄PC粗提物；再将亚临界流体萃取技术应用于蛋黄PC粗提物中的蛋黄油的高效分离；最后以磁性纳米技术实现蛋黄PC的精制，制备得到高纯度的蛋黄PC。本发明解决其技术问题所采用的技术方案是首先新鲜鸡蛋检查消毒后进行蛋清、蛋黄分离，将蛋黄液置于提取罐中并加入乙醇溶剂以脉冲超声波辅助提取，醇提取液经浓缩后得到蛋黄磷脂粗提物，然后采用亚临界流体萃取技术分离出蛋黄油，最后以磁性纳米分离技术进一步纯化，制备得到高纯度蛋黄卵磷脂。本发明的方法具体按照下述步骤进行
(I)蛋黄、蛋清分离首先对新鲜鸡蛋检查消毒，破壳后将蛋黄、蛋清分离，蛋黄搅拌均匀后，得到新鲜蛋黄液；其中消毒条件为95 100 1的沸水中，浸泡5 7 S。(2)中性脂质的提取将新鲜蛋黄液与水按重量比I: I 1:3稀释并搅拌均匀后加入到超声波提取罐中，并向提取罐中加入I 9倍体积的质量分数为80 95%乙醇溶液，随后采用脉冲超声波进行辅助提取，提取O. I I h后将混合物经离心或过滤分离，反复提取I 5次，合并醇提取液即为蛋黄中性脂质提取液(内含蛋黄PC)，其中脉冲超声波频率20 200 KHz，优选20 80 KH提取温度20 70 °C，其中优选45 60 °C ;提取时间
10 60 min,脉冲间隔I 5 S。(3)浓缩，干燥将(2)中所得的蛋黄中性脂质提取液于40 50 °C下减压浓缩至稠膏状，回收溶剂，将所得稠膏状物于50 65 °C下真空干燥，即得浅黄色蛋黄卵磷脂粗提物。(4)亚临界流体脱除蛋黄油将经步骤(3)获得的蛋黄卵磷脂粗提物装入萃取釜，将萃取釜抽真空，利用压力差将溶剂罐内亚临界溶剂(丙烷或丁烷)注入萃取釜内进行搅拌式逆流浸提，整个萃取过程在完全封闭的工艺条件下完成，其中萃取条件为浸提次数I 5次，料液比I: I 1:6,萃取时间10 120 min,搅拌速度35 100 r/min,萃取温度10 90 °C，其中优选40 60 °C，压力O. 2 I. O M经脱除蛋黄油后的卵磷脂记作蛋黄卵磷脂复合物。 (5)蛋黄卵磷脂复合物脱溶首先采用蒸汽(或热水)对萃取釜进行加热，并搅拌，加热温度10 110 °C，搅拌速度30 100 r/min，待萃取釜压力降到O. 01 MPa，启用真空泵进行负压蒸发，直至压力降至-O. 09 MPa以下；打开萃取釜，排出低温脱油蛋黄卵磷脂；气化后的丁烷经压缩、冷凝液化后，回到溶剂储罐中循环使用；
(6)磁性纳米载体的制备采用化学共沉淀法将可溶性的七水硫酸亚铁和六水氯化铁溶解于水溶液中，二者摩尔比为1:2 2:1，总铁离子浓度为O. 01 O. 5 mol/L ;机械搅拌转数为200 800 r/然后加入聚乙二醇6000 (PEG 6000)，其中加入量为总铁质量的1/10 ;控制温度为40 70 V,除氧30之后在机械搅拌状态下，快速加入25%氨水或氢氧化钠碱溶液，使反应溶液的pH &10,搅拌反应10 min后在剧烈搅拌状态下缓慢加入质量浓度为5 %的羧甲基壳聚糖(CM-CTS)溶液，，CM-CTS溶液的加入量为总反应溶液体积的1/10，加样完毕后将温度迅速升高到70 90 °C反应30 120反应结束后，在外加磁场的作用下快速分离出磁性颗粒，用去离子水清洗数次以去除未反应完全的化学物质，直至最后溶液的pH在7左右；最后收集黑色的磁性竣甲基壳聚糖纳米颗粒(简与为Fe3O4(PEG+CM-CTS))，并进行冷冻干燥处理；然后采用Ca2+对Fe3O4 (PEG+CM-CTS)表面进一步修饰，工艺条件如下1 mg/mL Fe3O4 (PEG+CM-CTS)纳米颗粒分别与2 mg/mL的Ca2+溶液混合，调节混合溶液的pH值到5. O 8. 0，并于200 800 r/min的持续搅拌状态下，于25 50 1的恒温条件下动态吸附30 120 min，使其达到吸附平衡，制备得到Ca2+修饰的固定化金属离子亲和磁性纳米颗粒，简写为Fe3O4 (PEG+CM-CTS) @ Ca2+，其中提供Ca2+的可能是氯化钙、碳酸钙、磷酸钙、草酸钙、醋酸钙中的一种或者两种的组合。(7)PC分离纯化采用质量分数为80 95%乙醇溶液溶解步骤(5)所得的脱溶蛋黄磷脂复合物，之后加入Fe3O4 (PEG+CM-CTS) i Ca2+磁性纳米颗粒，在O 37 1搅拌反应10 180 min，使溶液中的PE特定地吸附在Fe3O4 (PEG+CM-CTS) i Ca (II)磁性纳米颗粒表面，在外加磁场的作用下将吸附有PE的磁性纳米颗粒从反应溶液中分离出来，收集吸附液，采用高效液相色谱一蒸发光散射测定法测定PC含量和纯度；
(8)PC脱色对高纯蛋黄卵磷脂进行中性活性炭脱色处理，脱色温度25 45 °C、力口样量2. O 5. 0%、脱色时间为30 90 min。本发明的优点
(I)本发明进行蛋黄PC提取时，以对人体无害的食用酒精为溶媒，采用脉冲超声波辅助乙醇提取，加快了蛋黄磷脂溶出速度，缩短了生产周期，同时又可降低提取过程中蛋黄蛋白质的变性程度。(2)本发明采用亚临界流体萃取技术脱除蛋黄油，相对于超临界萃取技术而言，设备制造成本低，缩短了生产周期，萃取过程均是在完全封闭的工艺条件下完成，实现了零排放，生产中无“三废污染”，不会对环境造成污染。(3)本发明采用磁性纳米分离技术对蛋黄PC进行精制处理，操作简单，分离周期较短，PE的特异性吸附好，反应条件温和，不会引起PC的变性，且能进行工业化连续生产。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明做进一步阐述。实施例I
将100.0 kg新鲜鸡蛋经拣 蛋、洗蛋后经消毒(95 100°C的沸水中，浸泡5 7 S)，风干，破壳后以蛋清、蛋黄分离设备将蛋清和蛋黄分离，得到28. O kg蛋黄液。蛋黄液中加Λ 28 L水稀释并搅拌均匀后，将该蛋黄稀释液加入提取罐中，随后加入56 L的质量分数为80%乙醇溶液，在20 KHz、45 °C下浸提10 min，脉冲间隔I S，提取后浸提液进行过滤，滤液于室温下静置过夜弃去沉淀得到蛋黄中性脂肪浸提液(内含蛋黄卵磷脂)，并于45 °C下减压浓缩至稠膏状，回收溶剂，将所得稠膏状物于55 °C下真空干燥，得到浅黄色的蛋黄卵憐脂粗提物4. I kg ο将4. I kg蛋黄卵磷脂粗提物置于亚临界萃取釜中，将萃取釜抽真空，利用压力差将4. I L溶剂罐内亚临界丁烷注入萃取釜内；萃取过程在完全封闭的工艺条件下完成，搅拌速度为35 r/min,萃取温度40 °C ,压力控制在O. 2 Mpa,萃取120 min后,混合油进入蒸发罐，在减压状态下，50 1热水加热脱溶，气化的丁烷经压缩机压缩后，在冷凝器中液化后回到溶剂罐中；最后对萃取釜中的蛋黄卵磷脂进行减压蒸发脱溶向夹套和搅拌叶片中通入蒸汽加热、并搅拌脱溶，搅拌速度30 r/min，脱溶温度控制在50 °C，至萃取釜中压力-0.09 MPa以下，气化的丁烷压缩冷凝液化循环使用；最终得到蛋黄磷脂复合物I. I
kg ο随后进行载体制备，采用化学共沉淀法将9. 3 g七水硫酸亚铁和18 g六水氯化铁溶解于10 L水溶液中；机械搅拌转数为800 r/然后加入2. 73 g PEG 6000，控制温度为40 V,除氧30之后在机械搅拌状态下,快速加入25%氨水溶液，使反应溶液的pH&10，搅拌反应10 min后在剧烈搅拌状态下缓慢加入IL浓度为5%的CM-CTS，加样完毕后将温度迅速升高到70 °C反应30反应结束后，在外加磁场的作用下快速分离出磁性颗粒，用去离子水清洗数次以去除未反应完全的化学物质，直至最后溶液的PH在7左右；最后收集黑色的磁性羧甲基壳聚糖纳米颗粒(简写为Fe3O4 (PEG+CM-CTS))，并进行冷冻干燥处理。然后采用Ca2+对Fe3O4 (PEG+CM-CTS)表面进一步修饰，工艺条件如下lmg/mL Fe3O4(PEG+CM-CTS)纳米颗粒与2 mg/mL氯化I丐金属离子溶液充分混合,调节金属离子溶液的pH值到5. 0，并于200 r/min的持续搅拌状态下，于25 V的恒温条件下动态吸附30 min,使其达到吸附平衡，制备得到Ca2+修饰的固定化金属离子亲和磁性纳米颗粒，简写为Fe3O4(PEG+CM-CTS)i Ca2+;最后将得到的蛋黄磷脂进一步采用Fe3O4 (PEG+CM-CTS)i Ca (II)磁性纳米颗粒进行分离纯化，并以中性活性炭进行脱色处理(脱色温度25°C、加样量2.0%、脱色时间为30 min)，最终得到高纯PC 0.7 kg，PC纯度&95%。实施例2
将100. O kg新鲜鸡蛋经拣蛋、洗蛋后经消毒(95 100 1的沸水中，浸泡5 7 S)，风干，破壳后以蛋清、蛋黄分离设备将蛋清和蛋黄分离，得到28. O kg蛋黄液。所得蛋黄液中加入28 L水稀释并搅拌均匀后，将该蛋黄稀释液加入提取罐中，随后加入504 L质量分数为95 %乙醇溶液，在80 KHz、60 °C下浸提5次，每次60 min，脉冲间隔5 S，提取后浸提液进行过滤，滤液于室温下静置过夜弃去沉淀得到蛋黄中性脂肪浸提液(内含蛋黄卵磷脂)，并于50 °C下减压浓缩至稠膏状，回收溶剂，将所得稠膏状物于65 °C下真空干燥，得到浅黄色的蛋黄卵磷脂粗提物8. I kg ο将8. I kg蛋黄卵磷脂粗提物置于亚临界萃取釜中，将萃取釜抽真空，利用压力差将48. 6 L溶剂罐内亚临界丙烷注入萃取釜内；萃取过程在完全封闭的工艺条件下完成，搅拌速度为100 r/min,萃取温度60 °C ,压力控制在I Mpa,重复浸提5次,每次10 min,萃取结束后，混合油进入蒸发罐，在减压状态下，70 °C热水加热脱溶，气化的丙烷经压缩机压缩后，在冷凝器中液化后回到溶剂罐中；最后对萃取釜中的蛋黄卵磷脂进行减压蒸发脱溶向夹套和搅拌叶片中通入蒸汽加热、并搅拌脱溶，搅拌速度35 r/min，脱溶温度控制在70°C，至萃取釜中压力-0.09MPa以下，气化的丙烷压缩冷凝液化循环使用；最终得到蛋黄磷脂复合物2. I kg。随后进行载体制备，采用化学共沉淀法将926. 7 g水硫酸亚铁和450 g六水氯化铁溶解于IOL水溶液中；机械搅拌转数为200 r/然后加入137. 67 g PEG 6000，控制 温度为70 V,除氧30之后在机械搅拌状态下,快速加入25%氨水溶液,使反应溶液的pH &10，搅拌反应10 min后在剧烈搅拌状态下缓慢加入IL浓度为5%的CM-CTS，加样完毕后将温度迅速升高到90 °C反应120反应结束后，在外加磁场的作用下快速分离出磁性颗粒，用去离子水清洗数次以去除未反应完全的化学物质，直至最后溶液的pH在7左右；最后收集黑色的磁性羧甲基壳聚糖纳米颗粒(简写为Fe3O4 (PEG+CM-CTS))，并进行冷冻干燥处理。然后采用Ca2+对Fe3O4 (PEG+CM-CTS)表面进一步修饰，工艺条件如下lmg/mLFe3O4 (PEG+CM-CTS)纳米颗粒与2 mg/mL氯化韩金属离子溶液充分混合,调节金属离子溶液的PH值到8. 0，并于800 r/min的持续搅拌状态下，于50 V的恒温条件下动态吸附120min,使其达到吸附平衡，制备得到Ca2+修饰的固定化金属离子亲和磁性纳米颗粒，简写为Fe3O4 (PEG+CM-CTS) i Ca2+。最后将得到的蛋黄磷脂进一步采用 Fe3O4 (PEG+CM-CTS) i Ca
(II)磁性纳米颗粒进行分离纯化，并以中性活性炭进行脱色处理(脱色温度45°C、加样量5.0%、脱色时间为90min)，最终得到高纯PC 1.4 kg，PC纯度彡95%。实施例3
将100. O kg新鲜鸡蛋经拣蛋、洗蛋后经消毒(95 100°C的沸水中，浸泡5 7 S)，风干，破壳后以蛋清、蛋黄分离设备将蛋清和蛋黄分离，得到28. O kg蛋黄液。所得蛋黄液中加入56 L水稀释并搅拌均匀后，将该蛋黄稀释液加入超声波提取罐中，随后加入126 L质量分数90%乙醇溶液，在40 KHz、55 °C下浸提2次，每次30 min，脉冲间隔2 S，提取后浸提液进行过滤，滤液于室温下静置过夜弃去沉淀得到蛋黄中性脂肪浸提液(内含蛋黄卵磷脂)，并于50 °C下减压浓缩至稠膏状，回收溶剂，将所得稠膏状物于55 °C下真空干燥，得到浅黄色的蛋黄卵磷脂粗提物7. 5 kg。将7. 5 kg蛋黄卵磷脂粗提物置于亚临界萃取釜中，将萃取釜抽真空，利用压力差将15 L溶剂罐内亚临界丁烷注入萃取釜内；萃取过程在完全封闭的工艺条件下完成，搅拌速度为80 r/min，萃取温度40 °C，压力控制在O. 3 Mpa，重复浸提3次，每次萃取40 min,萃取结束后，混合油进入蒸发罐，在减压状态下，60 °C热水加热脱溶，气化的丁烷经压缩机压缩后，在冷凝器中液化后回到溶剂罐中；最后对萃取釜中的蛋黄卵磷脂进行减压蒸发脱溶向夹套和搅拌叶片中通入蒸汽加热、并搅拌脱溶，搅拌速度60 r/min，脱溶温度控制在60 °C，至萃取釜中压力-0.09 MPa以下，气化的丁烷压缩冷凝液化循环使用；最终得到蛋黄磷脂复合物I. 8 kg。随后进行载体制备，采用化学共沉淀法将111. 2 g七水硫酸亚铁和162 g六水氯化铁溶解于10 L水溶液中，机械搅拌转数为800 r/然后加入27. 3 g PEG 6000，控制温度为60 °C，除氧30之后在机械搅拌状态下，快速加入氢氧化钠溶液，使反应溶液的PH &10，搅拌反应10 min后在剧烈搅拌状态下缓慢加入IL浓度为5%的CM-CTS，加样完毕后将温度迅速升高到80 °C反应60反应结束后，在外加磁场的作用下快速分离出磁性颗粒，用去离子水清洗数次以去除未反应完全的化学物质，直至最后溶液的PH在7左右；最后收集黑色的磁性羧甲基壳聚糖纳米颗粒(简写为Fe3O4 (PEG+CM-CTS))，并进行冷冻干燥处理。然后采用Ca2+对Fe3O4 (PEG+CM-CTS)表面进一步修饰，工艺条件如下Img/mL Fe3O4 (PEG+CM-CTS)纳米颗粒与2 mg/mL氯化韩金属离子溶液充分混合,调节金属离子溶液的PH值到6. 0，并于400 r/min的持续搅拌状态下，于37 °C的恒温条件下动态吸附90 min,使其达到吸附平衡，制备得到Ca2+修饰的固定化金属离子亲和磁性纳米颗粒，简写为Fe3O4 (PEG+CM-CTS) i Ca2+;最后将得到的蛋黄磷脂进一步采用Fe3O4 (PEG+CM-CTS ) i Ca
(II)磁性纳米颗粒进行分离纯化，并以中性活性炭进行脱色处理(脱色温度35°C、加样量4.0%、脱色时间为60 min)，最终得到高纯PC 1.2 kg，PC纯度&95%。
1.一种高纯度蛋黄卵磷脂的制备方法，其特征在于按照下述步骤进行
(1)蛋黄、蛋清分离首先对新鲜鸡蛋检查消毒，破壳后将蛋黄、蛋清分离，蛋黄搅拌均匀后，得到新鲜蛋黄液；其中消毒条件为95 100 1的沸水中，浸泡5 7 S ;
(2)中性脂质的提取将新鲜蛋黄液与水按重量比1:1 1:3稀释并搅拌均匀后加入到超声波提取罐中，并向提取罐中加入I 9倍体积的质量分数为80 95%乙醇溶液，随后采用脉冲超声波进行辅助提取，提取O. I I h后将混合物经离心或过滤分离，反复提取I 5次，合并醇提取液即为蛋黄中性脂质提取液，其中脉冲超声波频率20 200 KHz，提取温度20 70 °C，提取时间10 60 min，脉冲间隔I 5
(3)浓缩，干燥将(2)中所得的蛋黄中性脂质提取液于40 50°C下减压浓缩至稠膏状，回收溶剂，将所得稠膏状物于50 65 °C下真空干燥，即得浅黄色蛋黄卵磷脂粗提物；
(4)亚临界流体脱除蛋黄油将经步骤(3)获得的蛋黄卵磷脂粗提物装入萃取釜，将萃取釜抽真空，利用压力差将溶剂罐内亚临界丙烷或亚临界丁烷注入萃取釜内进行搅拌式逆流浸提，整个萃取过程在完全封闭的工艺条件下完成；其中萃取条件为浸提次数I 5次，料液比I: I 1:6,萃取时间10 120 min,搅拌速度35 100 r/min,萃取温度10 ·90 °C，其中优选40 60 °C，压力O. 2 I. O M经脱除蛋黄油后的卵磷脂记作蛋黄卵磷脂复合物；
(5)蛋黄卵磷脂复合物脱溶首先采用蒸汽或热水对萃取釜进行加热，并搅拌，加热温度10 110 °C，搅拌速度30 100 r/min，待萃取釜压力降到O. 01 MPa，启用真空泵进行负压蒸发，直至压力降至-0.09 MPa以下；打开萃取釜，排出低温脱油蛋黄卵磷脂；气化后的丁烷经压缩、冷凝液化后，回到溶剂储罐中循环使用；
(6)磁性纳米载体的制备采用化学共沉淀法将可溶性的七水硫酸亚铁和六水氯化铁溶解于水溶液中，二者摩尔比为1:2 2:1，总铁离子浓度为O. 01 O. 5 mol/L ;机械搅拌转数为200 800 r/然后加入聚乙二醇6000，其中加入量为总铁质量的1/10 ;控制温度为40 70 V,除氧30之后在机械搅拌状态下，快速加入质量浓度为25%氨水或氢氧化钠碱溶液，使反应溶液的pH &10,搅拌反应10 min后在剧烈搅拌状态下缓慢加入质量浓度为5 %的羧甲基壳聚糖溶液，CM-CTS溶液的加入量为总反应溶液体积的1/10，加样完毕后将温度迅速升高到70 90 °C反应30 120反应结束后，在外加磁场的作用下快速分离出磁性颗粒，用去离子水清洗数次以去除未反应完全的化学物质，直至最后溶液的PH在7左右；最后收集黑色的磁性羧甲基壳聚糖纳米颗粒，并进行冷冻干燥处理；然后采用Ca2+对磁性羧甲基壳聚糖纳米颗粒表面进一步修饰,工艺条件如下I mg/mL磁性羧甲基壳聚糖纳米颗粒分别与2 mg/mL的Ca2+溶液混合,调节混合溶液的pH值到5. O ·8. 0，并于200 800 r/min的持续搅拌状态下，于25 50 V的恒温条件下动态吸附30 ·120 min，使其达到吸附平衡，制备得到Ca2+修饰的固定化金属离子亲和磁性纳米颗粒，其中提供Ca2+的可能是氯化钙、碳酸钙、磷酸钙、草酸钙、醋酸钙中的一种或者两种的组合；
(7)PC分离纯化采用质量分数为80 95%乙醇溶液溶解步骤(5)所得的脱溶蛋黄磷脂复合物，之后加入Ca2+修饰的固定化金属离子亲和磁性纳米颗粒，在O 37 1搅拌反应·10 180 min,使溶液中的PE特定地吸附在Ca2+修饰的固定化金属离子亲和磁性纳米颗粒表面，在外加磁场的作用下将吸附有PE的磁性纳米颗粒从反应溶液中分离出来，收集吸附液，采用高效液相色谱一蒸发光散射测定法测定PC含量和纯度；(8)PC脱色对高纯蛋黄卵磷脂进行中性活性炭脱色处理，脱色温度25 45 °C、力口样量2. O 5. 0%、脱色时间为30 90 min。
2.根据权利要求I所述的一种高纯度蛋黄卵磷脂的制备方法，其特征在于步骤(2)中脉冲超声波频率20 80 KH提取温度45 60 V ;提取时间10 60 min，步骤(4)中萃取温度40 60 °C。
本发明提供一种高纯度蛋黄卵磷脂的制备方法，涉及食品、药品配料生产领域。将新鲜鸡蛋经拣蛋、洗蛋、消毒处理后，进行蛋清和蛋黄的分离，得到蛋黄液；经一定量纯水稀释后加入到超声波提取罐中，以80%～95%乙醇为溶剂，采用脉冲超声波进行1～5次重复浸提，后经浓缩干燥制备得到PC粗提物；之后将PC粗提物置入亚临界萃取釜中，以液化丙烷或丁烷为溶媒，进行1～5次亚临界逆流浸提，萃取时间10～120min，料液比1:1～6，萃取温度10～90℃，萃取压力0.2～1.0MPa，之后进行减压脱溶，得到无油PC复合物；最后采用磁性纳米颗粒进一步精制，获得高纯度蛋黄PC。采用上述方法制备得到的蛋黄PC不仅得率大大提高，纯度也高达98%以上。
文档编号C07F9/10GKSQ
公开日日 申请日期日 优先权日日
发明者徐斌, 姜松, 孙俊, 董英, 李波, 高志 申请人:江苏大学