柱层析柱洗脱技术也称柱色谱技術
一根柱子里先填充不溶性基质形成固定相,
质混合样品加到柱子上后用特别的溶剂洗脱
根据蛋白质混合物中各组分在固定向和流动楿中的分配系数
不同经过多次反复分配,将不同蛋白组分逐一分离
根据填充基质和样品分配交换原理不同,离子交换层析柱洗脱凝胶過滤层析柱洗脱
和亲和层析柱洗脱是三种分离蛋白质的经典层析柱洗脱技术。
柱层析柱洗脱分离净化的实验技巧和方法
种模式常压分离昰最简单的分离模式方便、
减压分离尽管能节省填料的使用量
但是由于大量的空气通过填料会使
并且有时在柱子外面会有水汽凝结
以及有些易分解的化合物
而且还必须同时使用水泵或真空泵抽气。
只不过外加压力使淋洗液更快洗脱压力的提供可以是压缩空气
市场上有各种規格的柱层析柱洗脱分离柱。柱子长了
分离就好目前市场上的柱子
具体的选择要根据样品的性质
如果所需组分和杂质的分离度较大
在分离條件下比较难以溶解的样品可以先用极性较强的溶剂溶解然后用硅胶吸附,蒸干溶剂后使用干法上样,这样不需要极性较强的溶剂上樣可以大大增加试样分开的可能性。
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