细胞宝宝1-10个月生长曲线线有哪些影响因素

目的:探讨获取和培养人胚胎神经幹细胞的方法.方法:实验于4-12在重庆医科大学基础研究所完成.人胚胎来源为7~12周人工药物流产胎儿,由重庆医科大学附属第二医院及重庆市妇幼保健院提供,征得产妇本人同意.①从人胚胎大脑皮质中分离、培养、纯化原代神经干细胞,经体外反复传代培养以获得能在体外长期生存的神經干细胞.②免疫细胞化学鉴定神经干细胞特异性表达抗原.③观察不同种植细胞密度对神经干细胞增殖的影响,分析其生长特点并绘制宝宝1-10个朤生长曲线线.④采用悬浮细胞培养法扩增细胞,冷冻复苏后观察细胞的生物学特性.结果:①人胚胎神经干细胞体外生长特点:从7~12周流产胎儿大腦皮质中获得了能在体外长期生存的神经干细胞.经体外传至15代,神经干细胞细胞数量扩增至200倍.②神经干细胞接种密度对增生的影响:当种植细胞的密度为1×105 L-1,1×107 L-1时,体外培养30 d后仍呈单细胞贴壁状态.以1×109 L-1细胞密度接种时,12 h后即见多个单细胞聚成的小球,悬浮生长.③神经干细胞自我更新能力嘚检测结果:多数单个细胞在培养后24~48 h分裂为2~4个细胞的小克隆,7~10 d均发展为上百个细胞的较大的克隆.④nestin抗原的表达:培养的神经干细胞神经球nestin免疫细胞染色均呈阳性.⑤神经干细胞多向分化能力检测:NSE和GFAP免疫细胞化学染色显示,被测细胞胞浆有棕黄色颗粒沉着,呈阳性表达.⑥神经干细胞複苏后的存活率:冻存1,4,8,12周的神经干细胞存活率基本相似[(80.2±1.8)%,(80.1±1.2)%,(79.9±0.8)%,(80.1±2.1)%,P>0.05].结论:成功地从人胚胎大脑皮质中分离得到了神经干细胞.经体外培养证明:人胚胎神经干细胞具有自我更新增殖能力和向神经元样细胞、星形胶质样细胞分化的潜能.

一条典型的宝宝1-10个月生长曲线线鈳分为那几个生长时期,如何缩短迟滞期,指数期细胞有何应用.
可以采用与之前一样的培养基和培养条件;加大接种量;用指数期的接种的方法缩短迟滞期.

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细胞接种的密度与细胞宝宝1-10个月生长曲线线的测量结果之间有什么关系

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细胞的接种密度过小,细胞的滞留期就会比较长,如果接种密度比较大,则很快就能进入对数期.

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